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细胞爬片的制作方法

【爬片的准备】1. 爬片:24*24盖玻片,刚好用于6孔板。也可用更大的盖玻片,放在大的培养皿中爬片。2. 盖玻片泡酸过夜,第二天先用自来水冲洗20遍,再置于无水酒清中浸泡6小时,再用三蒸水冲洗3遍(个人认为主要目的是将酸冲洗干净就可以了,如果不干净的话,细胞帖壁不好),放在饭盒或者玻璃培养皿中烘干后进行高压消毒、烤干。3.盖玻片浸泡75%乙醇10分钟消毒,然后酒精灯上烤干,直接放入培养皿,开始种细胞。重点是玻片是干净的、无菌的。4.盖玻片在液体中经常有贴壁吸附力,用一般镊子很难一次性夹起,将注射器针头针尖向背面弄个小钩,这样将爬片轻轻勾起,用小镊子取出就可以。【细胞爬片】1. 胰酶消化细胞后计数重悬细胞于完全培养基中。2. 加细胞时,根据玻片的大小,先在每个孔里准备放爬片的位置滴少量培养基,目的是使玻片与培养皿靠培养基的张力粘合到一起,然后放玻片,防止加细胞悬液时玻片漂起,造成双层细胞贴片。整个过程注意无菌操作。3. 根据自己......阅读全文

关于细胞爬片的一些小知识

么叫细胞爬片?细胞爬片就是让玻片浸在细胞培养基内,细胞在玻片上生长,主要用于组织学,免疫组织化学,冰冻切片,细胞涂片,原位杂交等.LANSO细胞爬片特点:1.TC处理(细胞贴壁处理,利于细胞贴壁),双面均可使用.2.γ射线灭菌,保证无菌.3.使用便捷,只需打开包装,将爬片放入孔板内,将细胞悬液滴到爬

24孔板细胞爬片的直径是多大

圆形(φ24mm、φ20mm、φ14mm、φ8mm)。分别对应6孔板配套用细胞爬片、12孔板配套用细胞爬片、24孔板配套用细胞爬片、48孔板配套用细胞爬片。在医学生物研究中,免疫荧光检测等需用到细胞爬片。细胞爬片就是让玻片浸在细胞培养基内,细胞在玻片上生长。主要用于组织学,免疫组织化学,冰冻切片,细

检测细胞凋亡的实验方法比较-2

二、细胞凋亡的细胞化学测定细胞凋亡的细胞化学测定包括细胞表面(细胞膜)的结构和通透性改变的测定和细胞核DNA改变的测定。根据应用的范围,又可分为细胞群休和单个细胞测定两种,以下仅介绍其中几种较为常用的方法。碘化丙啶(propidium iodide,PI)检测早期死亡细胞膜通透性状态的不同是区分细胞

细胞免疫荧光实验步骤

细胞免疫荧光主要用于蛋白定位研究和细胞内信号转导,细胞免疫荧光技术是利用免疫技术和荧光标记技术相结合,原理就是利用抗原-抗体反应之后,采用荧光标记,标记完成后,显微镜下观察细胞内某种抗原成分的多少,从而做出一个定位研究,也可以为细胞内信号传导提供一个明确的指导,细胞免疫荧光具有敏感性强、特异性高、速

细胞免疫荧光步骤

细胞免疫荧光可应用于:可以观察组织或细胞内抗原物质的定位,以及一些特殊信号分子蛋白的出核/入核的定位变化。实验方法原理在进行细胞免疫荧光过程中,需要用到细胞爬片,通过将爬片浸在细胞培养基内,细胞在爬片上生长,进而进行细胞的免疫荧光。实验材料细胞样品试剂、试剂盒多聚甲醛70%甲醇丙酮PBSTriton

兔膀胱平滑肌细胞培养实验

酶分离法             实验方法原理 运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层

兔膀胱平滑肌细胞培养实验

酶分离法             实验方法原理 运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层

兔膀胱平滑肌细胞培养实验——酶分离法

兔膀胱平滑肌细胞培养可以:(1)分离得到高纯度兔膀胱平滑肌细胞;(2)进行细胞学鉴定研究;(3)用于细胞学其他研究。实验方法原理运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下观察细胞形态及生长

兔膀胱平滑肌细胞培养

实验方法原理 运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下观察细胞形态及生长状况,同时进行细胞爬片H-E染色和透射电镜等形态学观察分析,并应用免疫荧光染色平滑肌特有的α-肌动蛋白进行细胞学鉴

细胞爬片的免疫组化染色鉴定

实验概要本实验介绍了细胞爬片的免疫组化染色鉴定操作流程及注意事项。主要试剂PBS,0.5%Triton X-100(DPBS配),3%H2O2,封闭血清 (5%正常二抗血清DPBS液),一抗(PBS配,滴度1:200,湿盒),二抗工作液(湿盒),C液(湿盒),DAB显色液,苏木素,树胶主要设备20m

细胞爬片的免疫组化染色鉴定

实验概要本实验介绍了细胞爬片的免疫组化染色鉴定操作流程及注意事项。主要试剂PBS,0.5%Triton X-100(DPBS配),3%H2O2,封闭血清 (5%正常二抗血清DPBS液),一抗(PBS配,滴度1:200,湿盒),二抗工作液(湿盒),C液(湿盒),DAB显色液,苏木素,树胶主要设备20m

细胞爬片全过程经验总结

1.  爬片可用一般的盖玻片,也可用爬片; 2.  应用盖玻片,可根据自己的需要剪裁成合适的大小,以备置于 6 孔板、12 孔板或 24     孔板;裁剪时可用前护士输液用于打开玻璃安瓶的小沙轮,或者是口腔科

吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色

AO / EB原理与流程zhongyisheng:1、原理:吖啶橙(AO)能透过胞膜完整的细胞,嵌入细胞核DNA,使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭(E仅能透过胞膜受损的细胞,嵌入核DNA,发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强,荧光更为明亮,均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅

细胞爬片的制作方法

【爬片的准备】1. 爬片:24*24盖玻片,刚好用于6孔板。也可用更大的盖玻片,放在大的培养皿中爬片。2. 盖玻片泡酸过夜,第二天先用自来水冲洗20遍,再置于无水酒清中浸泡6小时,再用三蒸水冲洗3遍(个人认为主要目的是将酸冲洗干净就可以了,如果不干净的话,细胞帖壁不好),放在饭盒或者玻璃培养皿中烘干

激光共聚焦实验的样品准备新方法

  激光共聚焦显微镜可以观察到细胞内已经标记好的蛋白质和分子,为生物学研究提供了更直观的观测方法。如今,激光共聚焦成像已经是一个非常常规的实验操作,应用于生物学各个研究领域中。   在细胞实验中,如果要进行一次激光共聚焦成像,除了要知道相关的显微镜参数设置和操作以外,样品的准备也是非常重要的一环。 

激光共聚焦实验的样品准备方法对比

 激光共聚焦显微镜可以观察到细胞内已经标记好的蛋白质和分子,为生物学研究提供了更直观的观测方法。如今,激光共聚焦成像已经是一个非常常规的实验操作,应用于生物学各个研究领域中。  在细胞实验中,如果要进行一次激光共聚焦成像,除了要知道相关的显微镜参数设置和操作以外,样品的

什么是细胞爬片

细胞爬片就是让细胞(贴壁细胞)在片子(盖玻片)上生长。主要用来做免疫细胞化学啊,原位杂交等吧。在做这些实验时,制作标本有两种,一是离心做细胞涂片,二是细胞爬片。利用贴壁细胞在玻璃等物质上贴壁生长的特点,让它在盖玻片上生长,可以使制作的细胞片子更牢固,在后面的洗涤过程中,不易脱落。特别是在用粘附剂如多

什么是细胞爬片

细胞爬片就是让细胞(贴壁细胞)在片子(盖玻片)上生长。主要用来做免疫细胞化学啊,原位杂交等吧。在做这些实验时,制作标本有两种,一是离心做细胞涂片,二是细胞爬片。利用贴壁细胞在玻璃等物质上贴壁生长的特点,让它在盖玻片上生长,可以使制作的细胞片子更牢固,在后面的洗涤过程中,不易脱落。特别是在用粘附剂如多

【锐赛小课堂】荧光原位杂交技术实验心得

  锐赛小课堂1221-157   荧光原位杂交技术( fluorescence in situ Hybridization,FISH)是一种非放射性原位杂交方法,用特殊的荧光素标记核酸探针,在细胞或组织切片标本上进行杂交,以检测细胞内 DNA 或 RNA 特定序列存在与否。   FISH 实验

荧光原位杂交技术实验心得

荧光原位杂交技术( fluorescence in situ Hybridization,FISH)是一种非放射性原位杂交方法,用特殊的荧光素标记核酸探针,在细胞或组织切片标本上进行杂交,以检测细胞内 DNA 或 RNA 特定序列存在与否。FISH 实验操作与用非荧光标记探针的原位杂交基本相似。在组

大鼠主动脉内皮细胞培养实验

大鼠血管内皮细胞培养可以:(1)用于血液流动性、防止血栓形成、调节血管张力等研究;(2)用于选择性通透性以及免疫调节等方面研究。实验方法贴块法实验方法原理贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。但缺点使易混有成纤维细胞和平滑肌细胞,前者的贴壁时间和内皮接

大鼠主动脉内皮细胞培养实验

贴块法             实验方法原理 贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法

大鼠主动脉内皮细胞培养实验——贴块法

大鼠血管内皮细胞培养可用于:(1)血液流动性、防止血栓形成、调节血管张力等研究;(2)选择性通透性以及免疫调节等方面研究。实验方法原理贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。实验材料雄性Wistar大鼠试剂、试剂盒DMEM胎牛血清内皮细胞生长因子肝素钠青

大鼠主动脉内皮细胞培养实验

贴块法             实验方法原理 贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法

细胞技术专题:兔膀胱平滑肌细胞培养实验(二)

二、结果 两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24 小时均可见膀胱平滑肌细胞贴壁生长,正常兔 7 天左右、而梗阻兔则需10~12 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。均传代顺利,传代后约正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。本组中均传至第8 代,经第8

大鼠卵巢颗粒细胞的原代培养与鉴定(二)

1.4 颗粒细胞鉴定1.4.1 HE染色 取生长旺盛的第4 d的细胞,用0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化后制成1×105/ml的细胞悬液,种植于已预置好小盖玻片的24孔培养板中,放人CO2 培养箱中,在37 ℃、5% CO2及完全饱和湿度条件下进行培养。当细胞生长至70%融合时取出

兔成骨细胞与骨髓基质干细胞混合培养的实验研究

对骨髓基质干细胞进行改造,使其在保持快速生长的同时向成骨细胞方向分化是目前国内外研究的热点。实验发现,成熟的成骨细胞可以通过细胞间的直接接触作用促进骨髓基质干细胞增殖[ 1 ] ,此外成骨细胞可产生多种生长因子促进其骨髓基质干细胞的增殖、分化[ 2 ] 。由于骨髓基质干细胞通过诱导向成骨细胞分化后,

细胞爬片能直接用么

细胞爬片能直接用。1.细胞爬片;首先是玻片的处理,普通的盖玻片用砂轮划成自己要的大小的小方块,先用洗衣粉洗干净,用水冲静烤干,然后泡酸过夜,捞酸后流水洗净,烤干,置于器皿中高压灭菌,然后再烤箱中大约8小时烤干备用。爬片可以在培养皿 六孔板或24孔板中都可,我选择在培养皿中爬。一为节约经费(培养皿可以

干细胞成骨诱导后的染色方法和步骤

本文来自Cyagen赛业:http://www.cyagen.com.cn  碱性磷酸酶(ALP)是成熟成骨细胞的标志性酶,同时成骨细胞形成的钙结节也是成骨细胞的标记物。   以ALP为目标物的检测方法:  1 Gomo

细胞技术专题:兔膀胱平滑肌细胞培养实验(三)

 收起  注意事项1. 应严格无菌操作。2. 仔细彻底剥除膀胱黏膜、黏膜下及浆膜层,是确保获的大量高质单个膀胱平滑肌细胞的基础。3. 膀胱平滑肌组织应尽量减碎以确保充分消化。4. 严格控制胶原酶和胰蛋白酶的浓度和消化时间,见消化液混浊、组织块呈絮状,或在倒置显微镜下见消化液中有