用琼脂糖凝胶电泳分析核酸有哪些影响因素
核酸电泳中所用到的eb能用sybrgreen,goldview替代。GoldViewⅠ是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型DNA染料,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同。在紫外灯下双链DNA呈现绿色荧光,而单链DNA呈红色荧光。通过小鼠皮下注射实验,尚未发现GoldViewⅠ有致癌作用;而溴化乙锭(EB)是一种强致癌剂。因此用GoldViewⅠ代替EB不失为一种明智的选择。SYBR Green I 核酸凝胶染液(SYBR Green Nucleic Acid Gel Stains)是一种高敏感性的荧光染液,用于检测琼脂糖凝胶及聚丙烯酰胺凝胶中的双链DNA和寡核苷酸。当染液与核酸结合后,SYBR Green I 核酸凝胶染液的荧光信号会明显增强,因此经SYBR GreenI 核酸凝胶染液染色的凝胶显示出非常好的性价比,没有背景荧光。为获得最佳的结果,凝胶最好在跑胶后再进行染色。SYBR GreenI 核酸凝胶染液用于低含量的P......阅读全文
旋光仪准确度影响有哪些因素
1)溶剂的影响 旋光物质的旋光度主要取决于物质本身的结构。另外,还与光线透过物质的厚度,测量时所用光的波长和温度有关。如果被测物质是溶液,影响因素还包括物质的浓度,溶剂也有一定的影响。因此旋光物质的旋光度,在不同的条件下,测定结果通常不一样。 (2)温度的影响 温度升高会使旋光管膨胀而长度加长,从而
旋光仪准确度影响有哪些因素
在使用仪器的时候,它给人带来方便快捷的同时也会给人带来不必要的麻烦,一般的仪器都会出现误差,那么都会有哪些因素影响到旋光仪的使用呢? (1)溶剂的影响 旋光物质的旋光度主要取决于物质本身的结构。另外,还与光线透过物质的厚度,测量时所用光的波长和温度有关。如果被测物质是溶液,影响因素还包括物质的浓度,
琼脂糖凝胶电泳常见问题
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。琼脂糖凝胶电泳常见为题都有哪些?DNA带模糊DNA降解:琼脂糖凝胶电泳试验中要避免核酸酶污染电泳缓冲液陈旧:电泳缓冲液多系使用后,离子强度降解,PH值上升,
琼脂糖凝胶电泳常见问题
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。琼脂糖凝胶电泳常见为题都有哪些?、一、DNA带模糊、1、DNA降解:琼脂糖凝胶电泳试验中要避免核酸酶污染2、电泳缓冲液陈旧:电泳缓冲液多系使用后,离子强度
凝胶柱干了有什么影响
凝胶柱干了就无法起到对分子隔离的作用了。凝胶柱的原理就相当于固定相是一个“反筛子”尺寸比较大的分子因为无法进入凝胶内部,所以就从凝胶之间的空隙里面钻下去了,所以跑得更快。而尺寸小的分子则会进入凝胶上的微孔,不会太快被冲下来。这样就可以按照分子的尺寸而将混合物分开。凝胶柱干了,凝胶里面可能就会混进去非
凝胶电泳仪的影响因素
琼脂糖主要在DNA制备电泳中作为一种固体支持基质,其密度取决于琼脂糖的浓度。在电场中,在中性pH值下带负电荷的DNA向阳极迁移,其迁移速率由下列多种因素决定: 1、 DNA的分子大小: 线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比,分子越大则所受阻力越大,也越难
影响DNA凝胶电泳结果的因素
电流强度与释放出热量(Q)之间的关系可列成如下公式,则越慢;t为电泳时间.因此、焦耳热.在电场作用下影响电泳泳动度的因素:1.反之,则降低颗粒的泳动速度、筛孔.3.公式表明.一般来说颗粒带净电荷量越多,带电颗粒的泳动速度越快,常常会有一些离子基团如羧基,在筛孔大的凝胶中溶质颗粒泳动速度快,此溶液层会
重组M13噬菌体克隆分析
在本方案中,当外源 DNA 大于 200~300 个核苷酸时,用重组 M13 噬菌体克隆感染细菌后释放至周围培养基中的单链 DNA 进行凝胶电泳分析即可鉴定。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理在本方案中,当外源 DNA 大于 200~300 个核苷酸时,用重组 M13 噬菌
电泳技术(electrophoretic-techniques)简介2
⒈材料与试剂 醋酸纤维素膜一般使用市售商品,常用的电泳缓冲液为pH8.6的巴比妥缓冲液,浓度在0.05-0.09mol/L。⒉操作要点⑴膜的预处理:必须于电泳前将膜片浸泡于缓冲液,浸透后,取出膜片并用滤纸吸去多余的缓冲液,不可吸得过干。⑵加样:样品用量依样品浓度、本身性质、染色方法及检测方法等因素决
琼脂糖凝胶电泳实验——琼脂糖凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳可应用于:(1)DNA切胶回收;(2)DNA分离;(3)佐证DNA是否重组,质粒等是否切开以及其他分子生物学研究。实验方法原理用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻
用毛细管流变仪测绘聚合物熔体流动曲线有哪些因素影响
毛细管流变仪是模拟材料加工特性的,尤其适合挤出机和注塑加工特性研究,通过测试剪切粘度和剪切速率关系,分析材料加工特性;融指测试的熔体流动速率,不能表征真实的材料加工特性。内部因素:主要受分子量、分子量分布以及分子结构的影响。一般分子量越大粘度越大,分子量分布越窄,粘度越大。这是因为小分子量的存在相当
核酸提取仪有哪些特点?
大屏幕全中文操作 大屏幕全中文显示;触屏式操作,简单易用。 精确控制 内建工程用电脑,无需再连接个人电脑;单机操作节省更多的空间与能源,并提供高稳定度的自动化控制系统。 温度控制 可根据需求自定义裂解、洗脱温度。 自由编程 强大的程序编辑功能;灵活、高效地定义您的应用,可满
琼脂糖凝胶电泳操作应注意哪些环节
1. 根据片段大小配制不同浓度的胶(改变分辨率),片段越小,需要胶浓度越大。 2. 胶要现制先用。 3. 选择合适的Marker。 4. 配胶的缓冲液与电泳缓冲液要是同一种,且浓度一致(1倍)。 5. 点样时要加入loading buffer,并注意,不要将样点到点样孔之外(飘样),也不
琼脂糖凝胶电泳操作应注意哪些环节
琼脂糖凝胶电泳是常用的分离和检测方法,琼脂是最常用的载体支持物,核酸分子具有电荷效应和分子筛效应,利用此特性可达到分离检测的目的。一、琼脂糖凝胶的特点天然琼脂(agar)是一种多聚糖,主要由琼脂糖(agarose,约占80%)及琼脂胶(agaropectin)组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中
DNA琼脂糖凝胶电泳法需注意哪些
琼脂糖电泳的话,什么试剂、样本之类的准备肯定是前提了……关键在样本是不是很好的沉在胶孔中,点样有没有点好……电流电压有没有控制好……差不多之类的……
琼脂糖凝胶电泳操作应注意哪些环节
1. 根据片段大小配制不同浓度的胶(改变分辨率),片段越小,需要胶浓度越大。 2. 胶要现制先用。 3. 选择合适的Marker。 4. 配胶的缓冲液与电泳缓冲液要是同一种,且浓度一致(1倍)。 5. 点样时要加入loading buffer,并注意,不要将样点到点样孔之外(飘样),也不
琼脂糖凝胶电泳操作应注意哪些环节
1. 根据片段大小配制不同浓度的胶(改变分辨率),片段越小,需要胶浓度越大。 2. 胶要现制先用。 3. 选择合适的Marker。 4. 配胶的缓冲液与电泳缓冲液要是同一种,且浓度一致(1倍)。 5. 点样时要加入loading buffer,并注意,不要将样点到点样孔之外(飘样),也不
质粒DNA的限制性酶切及电泳分析
原理 限制性核酸内切酶能特异地识别和切割双链DNA中的碱基顺序,本实验中所用的pBS-SK质粒分子总长约2.9kb,经酶HindⅢ切割后,闭合环状质粒DNA即变成线性DNA分子。 不同大小、不同形状和不同构象的DNA分子在琼脂糖凝胶中有不同的电泳迁移率,因而可通过电泳使其分离。
琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳迁移速率的影响因素
琼脂糖主要在DNA制备电泳中作为一种固体支持基质,其密度取决于琼脂糖的浓度。在电场中,在中性pH值下带负电荷的DNA向阳极迁移,其迁移速率由下列多种因素决定:(1)DNA的分子大小线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比,分子越大则所受阻力越大,也越难于在凝胶孔隙中
重组M13噬菌体克隆分析
实验方法原理 在本方案中,当外源 DNA 大于 200~300 个核苷酸时,用重组 M13 噬菌体克隆感染细菌后释放至周围培养基中的单链 DNA 进行凝胶电泳分析即可鉴定。 实验材料
重组M13噬菌体克隆分析
实验方法原理 在本方案中,当外源 DNA 大于 200~300 个核苷酸时,用重组 M13 噬菌体克隆感染细菌后释放至周围培养基中的单链 DNA 进行凝胶电泳分析即可鉴定。实验材料 重组 M13 噬菌体单链 DNAM13 噬菌体重组噬菌斑M13 噬菌体非重组载体噬菌斑大肠杆菌 F' 菌株试剂
琼脂糖凝胶配方
琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶。琼脂糖分为一般琼脂糖和经化学修饰后熔点降低的低熔点琼脂 糖,琼脂糖的熔点在62〜65°C之间,融化后在37°C下可维持液态数小时,30°C时凝固成胶。多用于对染色体DNA在凝胶内进行原位酶切及DNA片段回收。琼脂糖凝胶 由于孔径大常用于大分子蛋白质、DNA的
仪器法分析cod有哪些因素影响准确度
亲,你好像理解错了哦!这种说法是不对滴!单从您提供的误差范围看,正好反了. 您朋友关于COD误差的说法出自何处就不清楚了,但现在不用这种方式表述.用精确度这个词说明仪器的测量性能是不对的,通常情况下仪器的主要误差分析指标有:准确度:测定值与真实值符合的程度.计算方法有绝对误差和相对误差. 精密度:几
有哪些因素影响气相色谱仪的应用
气相色谱分析中,影响分离度的因素有:柱长、固定液性质、柱的死体积。气相色谱分析是使混合物中各组分在两相间进行分配,其中一相是不动的(固定相),另一相(流动相)携带混合物流过此固定相,与固定相发生作用,在同一推动力下,不同组分在固定相中滞留的时间不同,依次从固定相中流出,又称色层法或者层析法。按流动相
有哪些因素会影响拉力试验机的精度
拉力试验机是针对各种材料进行仪器设备静载、拉伸、压缩、弯曲、剪切、撕裂、剥离等力学性能试验用的机械加力的试验机,适用于塑料板材、管材、异型材,塑料薄膜及橡胶、电线电缆、钢材、玻纤维等材料的各种物理机械性能测试。试验仪器在使用时不可避免会遇到各种影响因素,对测量结果造成一定的影响,那么,拉力试验机的精
有哪些因素影响的自燃?煤堆测温系统可以解决
从影响煤堆的风化因素分析,可以认识到影响风化与自然的因素很多,主要包括如下几类。⑴煤的成因类型的影响腐泥煤和残殖煤较难风化和自然,而腐殖煤焦容易自然。⑵煤化程度的影响通常腐植煤中年轻的褐煤易风化和自然,随着煤化程度的加深,煤的着火温度升高,风化和自然的下降,煤化程度较高的煤较难风化和自然⑶岩相组成的
在白细胞分类计数(DC)的时候有哪些影响因素?
1.影响分类计数准确性因素(1)细胞分布不均:体尾交界最佳,“城垛式”移动。尾部-中性粒细胞较多,淋巴细胞较少,单核细胞沿涂片长轴均匀分布。幼稚细胞分布在尾部和边缘。头部和体部-淋巴细胞、嗜碱性粒细胞分布。(2)形态识别差异①杆状核和分叶核诊断标准差异;②单核细胞和大淋巴细胞鉴别能力差异;③嗜碱性粒
有哪些影响冻干机干燥过程及其冻干质量的因素?
冻干机简称真空冷冻干燥机,按规格划分,可分为实验室冻干机、中试型冻干机、生产型冻干机。而实验室冻干机顾名思义就是用于样品实验、少量冻干的一种小型冻干机设备。 冷冻.jpg 影响冻干机干燥过程及其冻干质量的因素,也就是一条理想的冻干曲线要受到诸如物料性质、浓度、升华面积、共晶点
哪些因素影响测厚仪测量
测厚仪在测量过程中会受到很多因素的影响,而其中与材料相关的因素是对测厚仪测量影响zui大的地方,具体来看一下,和材料有关的测量因素: 材料相关的因素有:被测量物质的物理性质,化学性质,将是影响超声波计的测量范围和测量精度的因素之一。 这包括声学和几何因素。 1、声学特性测试材料:有几个条件,在
影响密度的因素有哪些
不一样的,溶剂分子量较小,填充到了聚合物分子间隙中。貌似甲苯浸泡橡胶塞会膨胀哦,这个对密度的影响比较大。液、固体体积影响因素最大的应该是温度。