NIBS邵峰再发PNAS文章

来自北京生命科学研究所,中国农业大学的研究人员发表了题为“Structural mechanism of ubiquitin and NEDD8 deamidation catalyzed by bacterial effectors that induce macrophage-specific apoptosis ”的文章,针对在病原体毒理作用机制上应用广泛的脱氨修饰,分析了CHBP这种病原体脱氨效应因子的作用方式,为进一步解析病原体宿主相互作用提供了重要信息,相关成果公布在《美国国家科学院院刊》(PNAS)杂志上。 文章的通讯作者是北京生命科学研究所邵峰研究员,邵峰研究组主要研究方向为在病原细菌感染宿主和宿主先天性免疫防御的分子机制,曾发表多篇Nature,Science,Cell杂志文章。 2010年,邵峰研究组在Science杂志上发表文章,发现类鼻疽杆菌CHBP具有很强的抑制真核细胞的泛素......阅读全文

胰蛋白酶切磷酸化多肽作图实验

胰蛋白酶切蛋白质样品的制备双向薄层电泳与层析分离多肽片段反向高效液相层析绘制多肽图谱实验材料蛋白质                                                          试剂、试剂盒甲醇                                  

胰蛋白酶切磷酸化多肽作图实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 甲醇电泳缓冲液仪器、耗材 凝胶电泳实验步骤 1. 用单向或者双向凝胶电泳将 32P 标记的目的蛋白质与其他不需要的成分分开。2. 电泳结束后,用 50% 甲醇清洗三次,时间控制在 6 小时,去处 SDS 和电泳缓冲液将凝胶放在两张塞热玢膜(Bio-Rad) 之间吸干。用

胰蛋白酶切磷酸化多肽作图实验

胰蛋白酶切蛋白质样品的制备 双向薄层电泳与层析分离多肽片段 反向高效液相层析绘制多肽图谱             实验材料 蛋白质

胰蛋白酶切磷酸化多肽作图实验—样品制备

实验材料蛋白质试剂、试剂盒甲醇电泳缓冲液仪器、耗材凝胶电泳实验步骤1. 用单向或者双向凝胶电泳将 32P 标记的目的蛋白质与其他不需要的成分分开。2. 电泳结束后,用 50% 甲醇清洗三次,时间控制在 6 小时,去处 SDS 和电泳缓冲液将凝胶放在两张塞热玢膜(Bio-Rad) 之间吸干。用放射性墨

NIBS邵峰再发PNAS文章

  来自北京生命科学研究所,中国农业大学的研究人员发表了题为“Structural mechanism of ubiquitin and NEDD8 deamidation catalyzed by bacterial effectors that induce macrophage-speci

胰蛋白酶切磷酸化多肽—反向高效液相层析绘制多肽图谱

实验材料胰蛋白酶切样品试剂、试剂盒尿素或盐酸胍仪器、耗材离心机实验步骤1. 加样前。做一次模拟加样,进行整个程序的洗脱,测 OD 初始值。记录所有实验变量:加样量、溶剂梯度、流速、吸收范围等。2. 制备 32P 标记的胰蛋白酶切样品(需要几千 cpm 才能有效地检测到 32P 标记的多肽 )。用 0

胰蛋白酶切磷酸化多肽作图_双向薄层电泳/层析分离多肽

实验材料多肽样品试剂、试剂盒电泳缓冲液仪器、耗材平板电泳仪实验步骤1. 将平板电泳仪(型号 FBE-3000, Phannacia) 放在通过循环仪连接到恒温水浴的冷却板上进行电泳。电泳前 30 分钟将水浴温度调至 10℃ 到 15℃ 之间。每个电极槽加 400 ml 缓冲液。切两张 Whatman

《分子细胞》—邵峰小组—病原菌和酶研究

2007年11月29日,北京生命科学研究所邵峰博士实验室在《分子细胞》(Molecular Cell)杂志上在线发表(Immediate Online Publication)题为Structural Insights into the Enzymatic Mechanism of the Path

病原菌的鉴别实验

实验方法原理1.致病性葡萄球菌耐盐,在高盐培养基上能生长;2. 致病性葡萄球菌能发酵甘露醇。3. 当颗粒性抗原(如:细菌)与特异性抗体结合后,在有电解质存在的环境下,抗原抗体可凝集成肉眼可见的块状物。仪器、耗材脓液标本增菌液高盐琼脂培养基甘露醇发酵培养基革兰氏染液NS抗金黄色葡萄球菌抗体玻片接种环酒

植物病原菌的分离

一、实验原理植物患病组织内的真菌菌丝体,如果给予适宜的环境条件,除个别种类外,一般都能恢复生长和繁殖。植物病原菌的分离就是指通过人工培养,从染病植物组织中将病原真菌与其它杂菌相分开,并从寄主植物中分离出来,再将分离到的病原菌于适宜环境内纯化,这个过程总称植物病菌的分离培养。植物病原真菌的分离一般都是

病原菌的鉴别实验

实验方法原理 1.致病性葡萄球菌耐盐,在高盐培养基上能生长;2. 致病性葡萄球菌能发酵甘露醇。3. 当颗粒性抗原(如:细菌)与特异性抗体结合后,在有电解质存在的环境下,抗原抗体可凝集成肉眼可见的块状物。仪器、耗材 脓液标本增菌液高盐琼脂培养基甘露醇发酵培养基革兰氏染液NS抗金黄色葡萄球菌抗体玻片接种

什么是磷酸化与去磷酸化

磷酸化,将磷酸基团加在中间代谢产物上或加在蛋白质(protein)上的过程。其中除去磷酸基团的酶称为磷酸酶。 蛋白质磷酸化可发生在许多种类的氨基酸(蛋白质的主要单位)上,其中以丝氨酸为多,接着是苏氨酸。去磷酸化:磷酸基团的除去,对许多生物起着“开/关”作用。防止质粒载体的自身连接,最常用于质粒进行单

如何查看抗体是磷酸化还是非磷酸化

  磷酸化和非磷酸化的抗体主要区别有:  1.磷酸化抗体的检测的是出于活性状态(磷酸化)的蛋白。  2.磷酸化抗体只针对磷酸化位点设计,是一种位点特异性的多抗,这到有些单抗的特性。3.普通抗体的合成(多抗):原核表达蛋白-〉纯化-〉免疫动物-〉收获抗体。  4.磷酸化抗体合成:人工合成含磷酸化位点的

酶的磷酸化与脱磷酸化的比较

磷酸化是一种常见的修饰形式。酶蛋白中带羟基的氨基酸残基Thr、Ser与Tyr可作为磷酸化修饰位点。磷酸化是由ATP提供磷酸基,并在蛋白激酶的催化下完成的。脱磷酸反应则是由磷酸酶的催化下完成的。有的酶在磷酸化修饰后活性增高,而另一些酶则在磷酸化修饰后活性反受抑制。由上可见,酶的化学修饰调节具有以下特点

临床生物化学检验

《临床生物化学检验》是高等医药院校专业系列教材之一。全书分20章,详细讲述了医学生物化学检验的理论及技术操作,并列举多个临床实例,结合临床常见疾病介绍了各种生化指标的检验方法,将生化检验与疾病诊断、病情监测和预后判断等结合起来,从现代检验医学的高度开拓临床医学的新视野。书中内容全面,结构合理,重点突

肝脏的生物化学

  肝脏在人体生命活动中占有十分重要作用。在消化、吸收、排泄、生物转化以及各类物质的代谢中均起着重要的作用,被誉为“物质代谢中枢”。  肝脏具有肝动脉和门静脉的双重血液供应,具有丰富的血窦,肝细胞膜通透性大,利于进行物质交换。从消化道吸收的营养物质经门静脉进入肝脏被改造利用,有害物质则可进行转化和解

生物化学的组成

除了水和无机盐之外,活细胞的有机物主要由碳原子与氢、氧、氮、磷、硫等结合组成,分为大分子和小分子两大类。前者包括蛋白质、核酸、多糖和以结合状态存在的脂质;后者有维生素、激素、各种代谢中间物以及合成生物大分子所需的氨基酸、核苷酸、糖、脂肪酸和甘油等。在不同的生物中,还有各种次生代谢物,如萜类、生物碱、

抗体磷酸化与非磷酸化的区别与关系

非磷酸化是测该蛋白的含量,不能知道其活性状态,抗体磷酸化是测该蛋白的磷酸化水平如何,侧重于了解该蛋白的一种活性状态。很多信号通路的蛋白在受到某些刺激后都是通过改变其磷酸化水平的改变而引起细胞的一系列反应,其蛋白含量并不见得会有多大的变化。首先要说明的就是检测的蛋白质在你检测的组织或者细胞中是表达的,

磷酸化和非磷酸化的抗体什么区别

1.磷酸化抗体的检测的是出于活性状态(磷酸化)的蛋白。2.磷酸化抗体只针对磷酸化位点设计,是一种位点特异性的多抗,这到有些单抗的特性。3.普通抗体的合成(多抗):原核表达蛋白-〉纯化-〉免疫动物-〉收获抗体。4.磷酸化抗体合成:人工合成含磷酸化位点的多肽-〉人工体外磷酸化-〉链接半抗原-〉免疫动物-

磷酸化和非磷酸化的抗体什么区别

  磷酸化和非磷酸化的抗体主要区别有:  1.磷酸化抗体的检测的是出于活性状态(磷酸化)的蛋白。  2.磷酸化抗体只针对磷酸化位点设计,是一种位点特异性的多抗,这到有些单抗的特性。3.普通抗体的合成(多抗):原核表达蛋白-〉纯化-〉免疫动物-〉收获抗体。  4.磷酸化抗体合成:人工合成含磷酸化位点的

植物与病原菌“作战”新路径

  国际知名学术期刊《自然》(Nature)16日在线发表了中国科学院分子植物科学卓越创新中心何祖华研究团队的一篇研究论文。该研究揭示了一条全新的植物免疫的基础代谢调控网络,为水稻抗病育种提供了新思路,有助减少农药使用。  作为水稻的“癌症”,稻瘟病会造成水稻的减产甚至绝产。何祖华研究员介绍,稻瘟病

关于病原菌的危害相关介绍

  病原菌为什么会使人生病呢?是因为它们能产生致病物质,造成宿主感染。如果不产生致病物质,就是非病原菌。至于正常菌群,当与宿主处于生态平衡状态,它们并不引起机体的感染,故属于非病原菌范畴。但是,在特定条件下,因为菌群失调、宿主免疫功能低下或菌群寄居部位改变造成了生态失调状态,正常菌群也能引起感染,这

口腔颌面部感染的病原菌

  口腔颌面部感染以化脓性细菌感染为主,常见的致病菌主要有金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和大肠杆菌、绿脓杆菌等;少见厌氧性腐败坏死性细菌所引起的腐败坏死性感染;偶见特异性感染如结核杆菌、梅毒螺旋体及放线菌等感染也可见到。感染可以由一种致病菌引起,也可由多种细菌所引起,一与颌面部腔窦相通的感染常是由需氧

NFκB-抑制蛋白的定义和作用

中文名称NFκB 抑制蛋白英文名称inhibitor-κ binding protein定  义一组能够抑制核因子κB(NFκB)的转录因子活性的蛋白质。在细胞质内与NFκB 结合而阻止其进入细胞核。IκB被磷酸化后就被蛋白酶降解,使NFκB得以释放并进入细胞核发挥转录激活作用。应用学科生物化学与分

NFκB-抑制蛋白的主要特征及作用

中文名称NFκB 抑制蛋白英文名称inhibitor-κ binding protein定  义一组能够抑制核因子κB(NFκB)的转录因子活性的蛋白质。在细胞质内与NFκB 结合而阻止其进入细胞核。IκB被磷酸化后就被蛋白酶降解,使NFκB得以释放并进入细胞核发挥转录激活作用。应用学科生物化学与分

什么是磷酸化

磷酸化是将磷酸基团加在中间代谢产物上或加在蛋白质(protein)上的过程。其中除去磷酸基团的酶称为磷酸酶。 蛋白质磷酸化可发生在许多种类的氨基酸(蛋白质的主要单位)上,其中以丝氨酸为多,接着是苏氨酸。除了蛋白质以外,部分核苷酸,如三磷酸腺苷(ATP)或三磷酸鸟苷(GTP)的形成,也是经由二磷酸腺苷

细菌的生物化学试验

各种细菌具有各自独特的酶系统,因而对底物的分解能力不同,其代谢产物也不同。用生物化学方法测定这些代谢产物,可用来区别和鉴定细菌的种类。利用生物化学方法来鉴别不同细菌,称为细菌的生物化学试验或称生化反应。生物化学试验的方法很多,主要有以下几类。  一、碳水化合物的代谢试验1.糖(醇、苷)类发酵试验  

CAM的生物化学途径

CAM的生物化学途径:夜间,大气中CO2自气孔进入细胞质中,被磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)羧化酶催化,与PEP结合形成草酰乙酸,再经苹果酸脱氢酶作用还原为苹果酸,贮于液泡中,其浓度每升可达100毫摩尔。苹果酸从细胞质通过液泡膜进入液泡是主动过程,而从液泡回到细胞质中则是被动过程。在日间,苹果酸从液泡中

细菌的生物化学试验

各种细菌具有各自独特的酶系统,因而对底物的分解能力不同,其代谢产物也不同。用生物化学方法测定这些代谢产物,可用来区别和鉴定细菌的种类。利用生物化学方法来鉴别不同细菌,称为细菌的生物化学试验或称生化反应。生物化学试验的方法很多,主要有以下几类。  一、碳水化合物的代谢试验1.糖(醇、苷)类发酵试验  

《生物化学》――名词解释

       氨基酸(amino acids):  是含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物,氨基一般连接在α-碳上。氨基酸是肽和蛋白质的构件分子。  必需氨基酸(essential amino acids):  指人(或其它脊椎动物)自己不能合成,需要从饮食中获得的氨基酸,例如赖氨酸、苏氨酸等