如何利用透析法进行脱盐浓缩蛋白
二、蛋白质的分离纯化蛋白质的分离纯化方法很多,主要有:(一)根据蛋白质溶解度不同的分离方法1、蛋白质的盐析中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,蛋白质的溶解度增加,此称盐溶;当盐浓度继续升高时,蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出,这种现象称盐析,将大量盐加到蛋白质溶液中,高浓度的盐离子(如硫酸铵的SO4和NH4)有很强的水化力,可夺取蛋白质分子的水化层,使之“失水”,于是蛋白质胶粒凝结并沉淀析出。盐析时若溶液pH在蛋白质等电点则效果更好。由于各种蛋白质分子颗粒大小、亲水程度不同,故盐析所需的盐浓度也不一样,因此调节混合蛋白质溶液中的中性盐浓度可使各种蛋白质分段沉淀。影响盐析的因素有:(1)温度:除对温度敏感的蛋白质在低温(4度)操作外,一般可在室温中进行。一般温度低蛋白质溶介度降低。但有的蛋白质(如血红蛋白、肌红蛋白、清蛋白)在较高的温度(25度)比0度时溶解度低,更容易盐析。(2)pH值:大多数蛋......阅读全文
蛋白浓缩方法基本
蛋白浓缩方法基本有: 丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析和冷冻干燥法…… 1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。 2,免疫沉淀法:得有特异性抗体! 3,硫酸铵沉淀法:利用高浓
蛋白浓缩(protein-concentration)基本方法
蛋白浓缩方法基本有:丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析和冷冻干燥法…… 1.丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。 2.免疫沉淀法:得有特异性抗体! 3.硫酸铵沉淀法
使用甲磺酸多沙唑嗪缓释片过量的危害介绍
如果药物过量导致低血压,患者应立即平卧,取头低位.可根据个体情况,采取其它必要的支持治疗。由于多沙唑嗪与血浆蛋白结合率高,药物过量不宜采用透析法。
透析的适用范围
使体液内的成分(溶质或水分)通过半透膜排出体外的治疗方法。常用于急性或慢性肾功能衰竭、药物或其他毒物在体内蓄积的情况。常用的透析法有血液透析及腹膜透析。
透析的适用范围
使体液内的成分(溶质或水分)通过半透膜排出体外的治疗方法。常用于急性或慢性肾功能衰竭、药物或其他毒物在体内蓄积的情况。常用的透析法有血液透析及腹膜透析。
透析的适用范围
使体液内的成分(溶质或水分)通过半透膜排出体外的治疗方法。常用于急性或慢性肾功能衰竭、药物或其他毒物在体内蓄积的情况。常用的透析法有血液透析及腹膜透析。
蛋白的浓缩方法
丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析和冷冻干燥法……1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。2,免疫沉淀法:得有特异性抗体!3,硫酸铵沉淀法:利用高浓度盐将蛋白质析出(盐析)选择
蛋白浓缩方法
蛋白浓缩方法基本有: 丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析和冷冻干燥法…… 1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。 2,免疫沉淀法:得有特异性抗体! 3,硫酸铵沉淀法:利用高浓
脑脊液蛋白电泳的注意事项
由于脑脊液蛋白质含量较少,在电泳前必须进行浓缩,一般用透析法,透析液可用高分子质量聚乙二醇、右旋糖酐等。 近年,已采用高效毛细管电泳法其分辨率更高,而且脑脊液不需要经过浓缩。
什么是透析?透析的适用范围?
透析(dialysis)是通过小分子经过半透膜扩散到水(或缓冲液)的原理,将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。使体液内的成分(溶质或水分)通过半透膜排出体外的治疗方法。常用于急性或慢性肾功能衰竭、药物或其他毒物在体内蓄积的情况。常用的透析法有血液透析及腹膜透析。
透析的主要原理和适用范围
主要原理 通过小分子经过半透膜扩散到水(或缓冲液)的原理,将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。 适用范围 使体液内的成分(溶质或水分)通过半透膜排出体外的治疗方法。常用于急性或慢性肾功能衰竭、药物或其他毒物在体内蓄积的情况。常用的透析法有血液透析及腹膜透析。
透析(2)
主要原理通过小分子经过半透膜扩散到水(或缓冲液)的原理,将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。适用范围使体液内的成分(溶质或水分)通过半透膜排出体外的治疗方法。常用于急性或慢性肾功能衰竭、药物或其他毒物在体内蓄积的情况。常用的透析法有血液透析及腹膜透析。
荧光抗体的制备
1 荧光素与抗体结合(标记) 2 荧光抗体的纯化 3 荧光抗体的鉴定 1.荧光素与抗体结合方法: ⑴ 透析法:①适用于蛋白质含量低、样品体 积小的抗体溶液的标记 ②标记较均匀,非特异荧光较低 ⑵ 搅
除了凝胶层析脱盐的方法,还有什么脱盐的方法
你要脱盐的物质是什么呀,我讲下蛋白的吧.1.用透析法,不过这种方法只能用于少量蛋白的脱盐.2.可以用丙酮沉淀蛋白除盐,因为这种方法是使蛋白变性沉淀下来而除盐,这种方法可能会使部分蛋白丢失或失去活性.3.盐析,用硫酸铵,氯化钠等中性盐等沉淀蛋白而除盐
使用阿莫西林克拉维酸钾干混悬剂过量的反应介绍
可能出现胃肠道症状、水及电解质紊乱,可采用水和电解质的对症疗法并保持水与电解质平衡。 曾有阿莫西林结晶尿可导致一些患者肾功能衰竭的报道(参见【注意事项】)。 血中的本品可通过血液透析法清除。 药物滥用及依赖性:尚未见本品有药物依赖性、成瘾性和娱乐性滥用的报道。
脑脊液蛋白电泳的注意事项及相关疾病
注意事项 由于脑脊液蛋白质含量较少,在电泳前必须进行浓缩,一般用透析法,透析液可用高分子质量聚乙二醇、右旋糖酐等。 近年,已采用高效毛细管电泳法其分辨率更高,而且脑脊液不需要经过浓缩。 相关疾病 小儿球形细胞脑白质营养不良,脑膜炎,脊髓灰质炎,耳源性脑脓肿,癫痫,小儿发作性舞蹈手足徐动症
根据蛋白质分子大小的差别的分离方法介绍
1、透析与超滤透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开。超滤法是利用高压力或离心力,强使水和其他小的溶质分子通过半透膜,而蛋白质留在膜上,可选择不同孔径的泸膜截留不同分子量的蛋白质。2、凝胶过滤法也称分子排阻层析或分子筛层析,这是根据分子大小分离蛋白质混合物最有效的方法之一。柱中最常用的填充材料
什么是脂质体的包封率和载药量?
包封率:包封率=(脂质体中包封的药物/脂质体中药物总量)×100%一般采用葡聚糖凝胶、超速离心法、透析法等分离方法将溶液中游离药物和脂质体分离,分别测定,计算包封率。通常要求脂质体的药物包封率达80%以上。载药量:载药量=[脂质体中药物量/(脂质体中药物+载体总量)]×100%载药量的大小直接影响到
十五种蛋白质单晶培养的方法
15种蛋白质单晶培养的方法:(1)大量养晶法(bulk crystallization):若急着养出单晶,则将纯化之蛋白质溶液加入固体盐类或饱和盐液,直到溶液中出现乳白混浊色,离心后把上清液(suppernatant)放置数天至数周,有可能养出单晶。(2)批次养晶法(batch method):
15种蛋白质单晶培养的方法
15种蛋白质单晶培养的方法:(1)大量养晶法(bulk crystallization):若急着养出单晶,则将纯化之蛋白质溶液加入固体盐类或饱和盐液,直到溶液中出现乳白混浊色,离心后把上清液(suppernatant)放置数天至数周,有可能养出单晶。(2)批次养晶法(batch method):
15种蛋白质单晶培养的方法
15种蛋白质单晶培养的方法:(1)大量养晶法(bulk crystallization):若急着养出单晶,则将纯化之蛋白质溶液加入固体盐类或饱和盐液,直到溶液中出现乳白混浊色,离心后把上清液(suppernatant)放置数天至数周,有可能养出单晶。(2)批次养晶法(batch method):若发
关于加斯清的药代动力学介绍
1.血药浓度 2.血浆蛋白结合率 99.0%(人血清 1μg/mL,体外超滤法或平衡透析法) 3.主要代谢产物及代谢途径 主要代谢产物:去4-氟尿嘧啶。 代谢途径:主要通过肝脏代谢成去4-氟尿嘧啶,再通过对氧氮己环5位的氧化和苯环3位的羟基化代谢。 4.排泄路径和排泄率 排泄路径:
二硫键的功能特点
二硫键与蛋白质高级结构的生物活性有关,同时与蛋白质的复性也有关联。如核糖核酸酶A经巯基乙醇(还原剂)和尿素(蛋白质变性剂)处理后,发生变性作用,4对二硫键断裂,多肽链伸展开来,高级结构发生变化,失去生物活性。如果用透析法将大量还原剂和变性剂除去,在微量还原剂存在下,4对二硫键在原来的位置重新形成,伸
细胞化学基础二硫键的功能
二硫键与蛋白质高级结构的生物活性有关,同时与蛋白质的复性也有关联。如核糖核酸酶A经巯基乙醇(还原剂)和尿素(蛋白质变性剂)处理后,发生变性作用,4对二硫键断裂,多肽链伸展开来,高级结构发生变化,失去生物活性。如果用透析法将大量还原剂和变性剂除去,在微量还原剂存在下,4对二硫键在原来的位置重新形成,伸
简述二硫键的功能
二硫键与蛋白质高级结构的生物活性有关,同时与蛋白质的复性也有关联。如核糖核酸酶A经巯基乙醇(还原剂)和尿素(蛋白质变性剂)处理后,发生变性作用,4对二硫键断裂,多肽链伸展开来,高级结构发生变化,失去生物活性。如果用透析法将大量还原剂和变性剂除去,在微量还原剂存在下,4对二硫键在原来的位置重新形成
二硫键的功能介绍
二硫键与蛋白质高级结构的生物活性有关,同时与蛋白质的复性也有关联。如核糖核酸酶A经巯基乙醇(还原剂)和尿素(蛋白质变性剂)处理后,发生变性作用,4对二硫键断裂,多肽链伸展开来,高级结构发生变化,失去生物活性。如果用透析法将大量还原剂和变性剂除去,在微量还原剂存在下,4对二硫键在原来的位置重新形成,伸
二硫键的基本功能
二硫键与蛋白质高级结构的生物活性有关,同时与蛋白质的复性也有关联。如核糖核酸酶A经巯基乙醇(还原剂)和尿素(蛋白质变性剂)处理后,发生变性作用,4对二硫键断裂,多肽链伸展开来,高级结构发生变化,失去生物活性。如果用透析法将大量还原剂和变性剂除去,在微量还原剂存在下,4对二硫键在原来的位置重新形成,伸
热敏脂质体的评价方法介绍
如何评价脂质体的热敏性是研究过程中的一个关键问题。常用的评价方法有差示扫描量热法(DSC)和热敏释放百分率等。 差示扫描量热法通过分析各样品中的DSC曲线来考察热敏脂质体被加热时相转变的情况,该结果可以对脂质体药物的释放随温度升高而增加的现象做出理论解释。而热敏释放百分率评价方法则是采用透析法
怎样制备荧光抗体?
(一)抗体要求将荧光素与特异性抗体以化学共价键的方式结合而成。一般需经纯化提取IgG后再作标记。(二)荧光素要求 异硫氰酸荧光素最常用要求:①应具有能与蛋白质分子形成共价键的化学基团,与蛋白质结合后不易解离,而未结合的色素及其降解产物易于清除;②荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率;③
辅酶的作用和应用
与酶蛋白结合疏松,用透析法容易与蛋白部分分开的有机小分子。由于辅酶在酶催化反应中其化学组分发生了变化,因此可以认为辅酶是一种特殊的底物或者称为“第二底物”。这种所谓的第二底物可以被许多酶所利用。例如,已知有约七百种酶可以利用辅酶NADH进行催化。在细胞内,反应后的辅酶可以被再生,以维持其胞内浓度在一