基因枪的操作方法及注意事项
一.基因枪的操作方法 1.材料准备 在9cm2培养皿上铺一薄层培养基,把材料(一般用未成熟胚、成熟胚、小愈伤组织、悬浮细胞、原生质体等)平铺于培养皿中心,直径在3cm范围内。 2.金粉的处理 取60mg金粉或钨粉置于离心管中,加入lml无水乙醇,充分振荡3min,以9615g离心1rain,去上清,再加入lml无菌水充分混匀后,以9615g离心,重复上述步骤3次。最后,将金粉悬浮于lml无菌蒸馏水中,置4‘C或室温下储存。 3.DNA的处理 取50tA金粉悬浮液,依次加入5rd的质粒DNA(1.0/lg~1)溶液、50//l 0.1mol/L亚精胺(所用的溶液经无菌消毒),振荡3rain后,在室温下放置10min,以9615g离心10s,弃去上清液;加入250~1无水乙醇,振荡后以9615g离心10s,弃上清液。沉淀重新悬浮于60/1l无水乙醇中,可供5枪(每枪10~1)使用。 4.......阅读全文
转基因技术基因枪法简介
利用火药爆炸或高压气体加速(这一加速设备被称为基因枪),将包裹了带目的基因的DNA溶液的高速微弹直接送入完整的植物组织和细胞中,然后通过细胞和组织培养技术,再生出植株,选出其中转基因阳性植株即为转基因植株。与农杆菌转化相比,基因枪法转化的一个主要优点是不受受体植物范围的限制。而且其载体质粒的构建
基因枪法转化大麦实验(二)
4. 粒子轰击幼胚(1) 幼胚渗透处理轰击前,取分离 1 天后的幼胚,放在高渗培养基中处理 4 h。每皿 20~30 枚幼胚,置于培养皿中心 1.6 cm2 范围内,盾片朝上。胚可以放得紧密一些,但相互之间不要碰到。轰击之后幼胚继续高渗处理 16 h。(2) 基因枪准备① 基因枪所有组件和内部的枪体
基因枪技术定义与原理
基因枪法是一种基因导入仪技术,它把遗传物质或其他物质附着于高速微弹直接射入细胞、组织和细胞器,是目前国际上最先进的基因导入技术。气体基因枪以压缩气体(氦或氮)转换成的气体冲击波为动力,使气体基因枪枪产生一种“冷”的气体冲击波进入轰击室,因此可免遭由“热”气体冲击波引起的细胞损伤。气体基因枪可在广泛的
基因枪法转化大麦实验(一)
实验材料 麦穗试剂、试剂盒 植物凝胶乙醇次氯酸钠蒸馏水亚精胺仪器、耗材 EP 管移液枪实验步骤 1. 组织培养基的准备( 1 ) 首先准备所需浓度 2 倍的植物凝胶,高压灭菌(见注 2 ) 。( 2 ) 所有的组织培养基都要过滤灭菌,因此除了无菌的储备液,其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀,
基因枪法转化小麦实验(二)
实验材料 BIO-RAD 亚微米金粉试剂、试剂盒 无水乙醇TE 缓冲液亚精胺仪器、耗材 离心管实验步骤 1. 准备金粉颗粒( 1 ) 称取 20 m BIO-RAD 亚微米金粉(0.6 μm) 至 1.5 ml 离心管中,加入 1 ml 无水乙醇。超声波处理 2 min,短暂离心 3s,然后弃上清。
基因枪法转化小麦实验(一)
实验材料 幼胚盾片试剂、试剂盒 乙醇漂白消毒剂仪器、耗材 诱导培养基实验步骤 下面介绍的是经过优化的针对幼胚盾片转化的方法,幼穗可以代替幼胚盾片使用。对某些特定的品种,幼穗转化比幼胚盾片转化更有效,如普通小麦品种 T.aestivum vars. Baldus 和 Brigadier,以及其他小
基因枪活体植物基因转染
本实验所用基因传递系统(基因枪)原理:低压基因递送系统(GDS-80 基因枪 U.S. Patent Number: 6,436,709 B1),根据火箭喷嘴原理和空气动力学原理设计,是用于传递生物微粒进入靶细胞的一种新型系统。如图1中所示,当左侧出现输入气体压力时(如:氦气),两个腔室之间将形成巨
测长机的使用及操作方法
(一)、测帽的选择和调整本投影测长机是用接触法测量的,所以测帽的选择和调整可以避免较大的测量误差。测帽选择的原则是被测件与测帽的接触面为最小,即接近于点或线。1、测量平面物体时,使用R20球形测帽;2、测量圆柱物体时,使用1.5*8刃形测帽;3、测量球形物体时,使用φ2、φ8平面测帽;4、三针法测量
测长机的使用及操作方法
(一)、测帽的选择和调整本投影测长机是用接触法测量的,所以测帽的选择和调整可以避免较大的测量误差。测帽选择的原则是被测件与测帽的接触面为最小,即接近于点或线。1、测量平面物体时,使用R20球形测帽;2、测量圆柱物体时,使用1.5*8刃形测帽;3、测量球形物体时,使用φ2、φ8平面测帽;4、三针法测量
集热式磁力搅拌器操作方法及使用注意事项
集热式磁力搅拌器使用方法:1、电源、盛杯准备就绪,打开不锈钢容器盖,将盛杯放在不锈钢容器中间,往不锈钢容器中加入导热油或硅油至恰当高度,将搅拌子放入盛杯溶液中。开启电源开关,指示灯亮,将调速电位器按顺市政方向旋转,简便转速由慢到快。调节到要求转速为止。 2、要加热时,连接温度传感器探头,将探头夹在支
可见分光光度计操作方法及注意事项
可见分光光度计基本使用方法: 1、按“COTO”键,输入设定波长; 2、四个比色皿,其中R位置放置参比试样,其余三个放入待测试样。将比色皿放入样品池内的比色皿架中,盖上样品池盖; 3、将参比试样推入光路,按“ABS%”键,使仪器自动调零和置满度; 4、然后将待测试样推入光路,显
大电流试验器(AD901B)操作方法及注意事项
大电流试验器(AD901B)工作原理图如下大电流试验器(AD901B)操作方法说明1、接通工作电源,操作台上的电压表显示输入电压值。按下启动按钮,绿色指示灯亮,此时大电流试验器的升流器部分等待升流。2、顺时针均匀旋转调压器手柄,注意操作台上输出电流指示(单位:安培)直到所需的大电流,为了保证测试精度
热导仪实际应用时的具体操作方法及注意事项
热导仪是一种测量样品的导热系数随温度的函数关系的仪器。用于金属与合金、钻石、陶瓷、石墨与碳纤维、填充塑料、高分子材料等的测试。之前的文章中,我们介绍了热导仪用于检测钻石的真伪,本文我们再来说说具体的操作方法和注意事项。 热导仪检测钻石真伪的具体操作方法: 1、打开电源,电源指示灯点亮,热导
多功能真空滤油机的调试及操作方法和注意事项分析
多功能真空滤油机的调试及操作方法和注意事项分析一、 安装调试1、 将本机进油管接设备主油箱底部排油口,出油管接在油箱管路上从上部返回油管。2、 按机器总功率的大小接好三相三线电源,并使排油泵转向与箭头指向一致。3、 点动进油泵、排油泵应无卡阻和偏心振动现象。4、 检查各油、路应无泄露。二、 多功能真
CAMP原理及测定操作方法
CAMP试验 是根据B群链球菌能产生CAMP因子,可促进葡萄球菌的B-溶血素溶解红细胞的活性,因此在两菌(B群链球菌和葡萄球菌)的交界处溶血力增加,出现矢形(半月形)的溶血区这样的原理进行的试验。方法:在羊血或马血琼脂平板上,先以β-溶血的金黄色葡萄球菌划一横线接种。再将被检查部位所取出的培养液中的
Southern-Blot原理及操作方法
原理:将待检测的DNA分子用/不用限制性内切酶消化后,通过琼脂糖凝胶电泳进行分离,继而将其变性并按其在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上,固定后再与同位素或其它标记物标记的DNA或RNA探针进行反应。如果待检物中含有与探针互补的序列,则二者通过碱基互补的原理进行结合,游离探针洗涤后用自显影或
落地式实验室离心机操作方法及注意事项
落地式实验室离心机操作方法及注意事项如下:1、使用离心机前,检查离心室内有无异物。2、使用离心机前,检查外接电源是否符合要求,离心机是否可靠接地。3、使用离心机前,仔细检查转子和离心管是否有裂纹或腐蚀,严禁使用有裂纹或腐蚀的转子、离心管。4、挂稳离心管,检查离心管有无卡滞现象。5、严禁不平衡运转。6
电泳仪简单操作方法及六大使用注意事项
电泳仪简单操作方法及六大使用注意事项电泳仪正是基于上述原理设计制造的。电泳是指带电粒子在电场中的运动,不同物质由于所带电荷及分子量的不同,因此在电场中运动速度不同,根据这一特征,应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析,或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备,这在临床检验或实验研究中具有极
电泳仪简单操作方法及六大使用注意事项
电泳仪简单操作方法及六大使用注意事项电泳仪正是基于上述原理设计制造的。电泳是指带电粒子在电场中的运动,不同物质由于所带电荷及分子量的不同,因此在电场中运动速度不同,根据这一特征,应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析,或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备,这在临床检验或实验研究中具有极
基因枪应用技术问答解疑
1. 基因枪转化法对受体有啥要求?基因枪对动物:任何可暴露于基因枪口外的组织(皮肤、器官)细胞、外植体和器官培养;植物:田间和温室使用、植物培养细胞和外植体;酵母、细菌、其它微生物细胞器、叶绿体、线粒体;受体广泛。2. 基因枪(颗粒轰击法)相比传统的转化那些优势?简单快速功能灵活,各类细胞类型通用只
量热仪的操作方法与注意事项
在燃烧皿中称取分析试样(粒度≤0.2mm)0.9-1.1g(到0.0002g)。燃烧易于飞溅的试样,可先用已知重量的擦镜纸包紧或在压饼后切成2-4mm的小块使用。不易完全燃烧的试样,可先在坩埚底部铺上一层石棉衬垫,用手压实(石英坩埚不需要任何衬垫)。如加衬垫仍燃烧不完全,则用已知质量和热值的擦镜纸包
热膨胀仪的操作方法与注意事项
热膨胀仪操作规程:1、开机。打开仪器、循环水浴和计算机电源。开机约2小时后,可开始样品测试。2、打开DIL402PC测量软件。3、测定试件变形量前,必须先在标准棒上校准测量框架,使百分表对准零位(或记下表盘的刻度值)。4、将制作好的试件两端擦拭干净,然后放置在工作台上,将校准过的测量框架套在试件上,
量热仪的操作方法与注意事项
在燃烧皿中称取分析试样(粒度≤0.2mm)0.9-1.1g(到0.0002g)。燃烧易于飞溅的试样,可先用已知重量的擦镜纸包紧或在压饼后切成2-4mm的小块使用。不易完全燃烧的试样,可先在坩埚底部铺上一层石棉衬垫,用手压实(石英坩埚不需要任何衬垫)。如加衬垫仍燃烧不完全,则用已知质量和热值的擦镜纸包
量热仪的操作方法与注意事项
在燃烧皿中称取分析试样(粒度≤0.2mm)0.9-1.1g(到0.0002g)。 燃烧易于飞溅的试样,可先用已知重量的擦镜纸包紧或在压饼后切成2-4mm的小块使用。不易完全燃烧的试样,可先在坩埚底部铺上一层石棉衬垫,用手压实(石英坩埚不需要任何衬垫)。如加衬垫仍燃烧不完全,则用已知质量和
石墨炉原子吸收分光光度计的操作方法及注意事项
石墨炉原子吸收分光光度计,又称光谱仪是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。 不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的380~7
快速水分仪的原理及操作方法
快速水分仪适用于一切需要快速测量水分的行业,如医药、粮食、烟草、化工、茶叶、食品、纺织、农历等。 该仪器可与计算机通讯,并通过计算机把测试水分数据结果打印出来,也可以通过选配的打印机把测试水分数据结果打印出来。 工作原理 采用干燥失重法原理。在干燥过程中,快速水分测定仪持续测量并即时
透射及扫描电镜的操作方法
一、实验目的:1、了解透射电镜、扫描电镜各部件的名称、结构及性能;2、了解透射及扫描电镜的基本操作程序;3、了解电镜样品制备的配套设备。二、实验仪器及用品:透射电镜;扫描电镜;小白鼠肝脏超薄切片;酵母菌或乳酸杆菌的负染样品;喷好金膜的叶片及花粉样品三、方法步骤:(一)透射电镜操作规程:1、本仪器的
透射及扫描电镜的操作方法
一、实验目的:1、了解透射电镜、扫描电镜各部件的名称、结构及性能;2、了解透射及扫描电镜的基本操作程序;3、了解电镜样品制备的配套设备。二、实验仪器及用品:透射电镜;扫描电镜;小白鼠肝脏超薄切片;酵母菌或乳酸杆菌的负染样品;喷好金膜的叶片及花粉样品三、方法步骤:(一)透射电镜操作规程:1、本仪器的操
移液器的正确操作方法及使用技巧
移液六部曲1. 装吸头移液器套柄用力下压,需要时小幅度旋转即可。错误操作:用力敲击吸头。此方法会带来吸头损坏甚至移液器套柄磨损,从而影响其密封性。2. 量程设定操作之前请先选择正确的移液器,移液器可在10-100%量程范围内操作,但在10%量程处操作对于移液技巧要求高,故推荐在35-100%量
分配色谱的原理及操作方法
一种物质在两种互不相溶的溶剂中振摇,当达到平衡时,在同一温度下,该物质在两相溶剂中浓度的比值是恒定的,这个比值就称为该物质在这两种溶剂中的分配系数。在天然药物提取分离工作中常用的溶剂萃取,就是利用天然药物中化学成分在互不相容的两相溶剂中的分配系数不同从而使其达到分离的。如果需要分离的物质在两