分析一下免疫组化实验中一些常见的问题和解决措施
分析一下免疫组化实验中一些常见的问题和解决措施： 常见问题一：所有切片呈阴性 原因分析：a.缓冲液内含叠氮化钠，抑制酶的活性； b.染色未完全按照操作步骤进行； c.漏加一种抗体或抗体失活； d.复染或脱水剂使用不当； e.底物中加入的过氧化氢少或失活。 解决措施：设立“阳性对照”。如果阳性对照有了表达，说明染色的全过程和所有试剂都没有问题。如果此时测试片仍为阴性，便是真实的阴性，说明组织或细胞没有相应的抗原表达。 常见问题二：所有切片呈阳性 原因分析：a缓冲液配置中未加氯化钠和PH值不准确，洗涤不彻底； B使用已变色的呈色第五溶液，或呈色反应时间过长； C过氧化氢浓度过高，呈色反应过快且粘附剂太厚； D切片在染色过程中抗体过浓，或干片了； E抗体孵育时间过长。 解决措施：缩短抗体孵育时间和呈色反应时长，染色过程中防止出现干片情况。 常......阅读全文
流式实验常见问题及解决方法
1.无染色/弱染色 2.高背景/非特异性染色 3.染色异常情况
免疫组化问题及解决办法
1、染色过强 原因 解决办法抗体的浓度过高或抗体孵育时间过长 降低抗体滴度（一般指浓缩性抗体）抗体 孵育时间：室温1小时或4℃过夜 孵育温度过高，孵育温度超过37℃ 一般室温20-28℃ DAB显色时间过长或DAB浓度过高 显色时间不能超过5-10分钟，以显微镜下 观察为准2、非特异性背景染色 原因
输血工作中的一些常见问题需注意
在日常输血工作中，我们往往会遇到很多细节问题，有些问题（比如血制品的输注，血液标本的采集要求，取血、输血的注意事项等），可能在临床输血实际工作中又常常容易被忽视。1浓缩血小板储存方法血小板应尽快输用，因故未能及时输用，则应在室温下放置，每隔10～15分钟轻轻摇动血袋，不超过半小时，不能放4℃冰箱暂存
关于WB实验中蛋白样品制备的常见问题分析
WB实验又称免疫印迹实验，是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术，具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现已成为蛋白分析的一种常规技术。 对于一直都在做蛋白研究的你，在样品制备
分析低温恒温槽的常见问题和故障解决方法
分析低温恒温槽的常见问题和故障解决方法：一、低温恒温槽常见的故障通常有以下几种：1.冻水泵流量不足，主要引起流量不足的原因是：⑴叶轮或水管堵塞，⑵叶轮损坏。主要用以下方法解决：①清洗叶轮或水泵，②更换叶轮2.回气管及压缩机机壳结霜，低温恒温槽回气管及压缩机机壳结霜主要是由于三个原因引起的：⑴膨胀阀开
分析和解决吹膜机吹膜的常见问题
在吹膜机进行吹膜工作时，容易出现这样或那样的问题，这时候，就要寻找到解决的办法，以下是吹膜机吹膜过程中容易出现的问题。1.薄膜出现褶皱薄膜出现褶皱，其根本原因是薄膜横向厚度不均匀，哪怕是很微小，经过积累后也可造成比较明显的褶皱，影响落膘实验、薄膜撕裂实验、薄膜摩擦系数等的测定数据。可从以下几方面解决
qPCR常见问题及其分析解决方法
常见问题 1. 无Ct值出现 检测荧光信号的步骤有误: 一般SG法采用72℃延伸时采集，Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号。 引物或探针降解: 可通过PAGE电泳检测其完整性。 模板量不足: 对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起。 模板降解: 避免样品制备中杂
ChIP常见问题分析与解决办法
本文列出了ChIP实验中常见的问题以及解决办法，供您实验参考！ 问题
免疫组化常见问题及对策
免疫组织化学是应用抗原和抗体结合的原理，检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的分布。这种方法的特异性强、敏感度高、发展迅速、应用广泛，成为生物学和医学众多学科的重要研究手段。做免疫组化可能遇到许多问题，大体归纳起来，主要有非特异性着色﹑着色部位不对﹑假阳性﹑无阳性﹑阳性弱五大类以及其他一些小问题。现在
免疫组化常见问题及对策
免疫组织化学是应用抗原和抗体结合的原理，检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的分布。这种方法的特异性强、敏感度高、发展迅速、应用广泛，成为生物学和医学众多学科的重要研究手段。做免疫组化可能遇到许多问题，大体归纳起来，主要有非特异性着色﹑着色部位不对﹑假阳性﹑无阳性﹑阳性弱五大类以及其他一些小问题。
蛋白纯化仪使用常见的一些问题解决办法
蛋白纯化怎么提纯，蛋白是大分子，和各种分子大小不同的白蛋白，有使用一些更简单的方法，以在蛋白质和小分子材料，并且还分离的蛋白质混合物中分离出来。分离不同分子大小的蛋白质主要是透析，超滤，凝胶过滤，离心分离等的方法。透析和超滤通常用于蛋白质分离方法。待分离的透析混合物放置在由半透膜的透析袋，然后浸入在
蛋白柱日常维护和常见问题了解一下！
分离时选择了合适的蛋白柱，有时往往不能成功地完成蛋白的分离，同一根蛋白分离柱在不同的使用者手中可能会有不同的柱寿命及分离效果，正确的使用蛋白柱和正确的日常维护是保证成功分离蛋白及延长柱寿命的关键。不论使用什么类型的蛋白柱，首先必须对其填料的性能有基本了解。如该柱适用什么样的溶剂，什么类型的样品，流速
对待实验室仪器摇床使用一些小问题的解决
实验中常会发生在设备上发生一些故障，让实验人员在工作中遇见一些难题。首先，实验中人员在使用恒温摇床时。第一要熟悉下摇床的基本使用工具，和外观结构。第二要学习摇床的性能和基本操作。第三要知道实验要求，和设备使用容量。解决恒温摇床设备在实验工作学习中最常见发生的问题，多掌握解决实验现象小问题。一、托盘不
对待实验室仪器摇床使用一些小问题的解决
实验中常会发生在设备上发生一些故障，让实验人员在工作中遇见一些难题。首先，实验中人员在使用恒温摇床时。第一要熟悉下摇床的基本使用工具，和外观结构。第二要学习摇床的性能和基本操作。第三要知道实验要求，和设备使用容量。解决恒温摇床设备在实验工作学习中最常见发生的问题，多掌握解决实验现象小问题。一、托盘不
免疫组化实验结果的分析和判断
⒈ 必须同时设对照染色。没有对照染色的免疫组化染色结果是不可信的。⒉抗原表达必须在特定部位。如LCA应定位在细胞膜上；CK应定位在细胞浆内；PCNA及p53蛋白应定位在细胞核内；EMA应定位在细胞膜上，等等。不在抗原所在部位的阳性着色，一概不能视为阳性。
DNA提取中的常见问题分析
提取植物DNA时遇到多糖成分的干扰， DNA质量一直不高，如何消除多糖的影响？参考见解：一般来说，SDS法提取的DNA会还有较多的多糖，使DNA成胶冻状。而CTAB法提取可基本上除去多糖。如果是植物材料本身含糖量比较高，可用以下方法试一试：1、 在 DNA 未溶出之前，先用一些缓冲液洗去多糖。如可用
DNA提取中的常见问题分析
提取植物DNA时遇到多糖成分的干扰， DNA质量一直不高，如何消除多糖的影响？ 参考见解：一般来说，SDS法提取的DNA会还有较多的多糖，使DNA成胶冻状。而CTAB法提取可基本上除去多糖。如果是植物材料本身含糖量比较高，可用以下方法试一试： 1、 在 DNA 未溶出之前，先用一些缓冲液洗去多糖。如
旋转蒸发仪的常见问题的检查内容和措施
旋转蒸发仪 主要用于在减压条件下连续蒸馏大量易挥发性溶剂； 旋转蒸发仪 有时候会出现一些细小的问题，这里归纳了几种它常出现的问题，如下： 1、 旋转蒸发仪 有时候真空抽不上。 检查内容： ①.容器内有溶剂，受饱和喷射器压限制。 ②.真空皮管，接头松动，真空表具泄漏。 ③.真空油泵能力下
旋转蒸发仪的常见问题的检查内容和措施
旋转蒸发仪旋转蒸发仪主要用于在减压条件下连续蒸馏大量易挥发性溶剂；旋转蒸发仪有时候会出现一些细小的问题，这里归纳了几种它常出现的问题，如下： 1、旋转蒸发仪有时候真空抽不上。 检查内容： ①.容器内有溶剂，受饱和喷射器压限制。 ②.真空皮管，接头松动，真空表具泄漏。
微流控芯片加工中遇到的一些常见问题
Q：PMMA、玻璃、PDMS这三种材料哪个耐用一点？A：不同材质芯片自身性质不同，在应用时应根据实验需求选择。单从耐用角度讲：玻璃芯片受使用环境影响较小，使用寿命较长，重复利用率高，但玻璃比较容易磕碰碎裂，应避免类似人为损坏；PDMS芯片属软质芯片，外力磕碰不易碎裂，但易受试剂污染，不易清洗，重复利
PCR实验操作常见问题及解决方法
1. cDNA产量的很低可能的原因：*RNA模板质量低*对mRNA浓度估计过高*反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足*同位素磷32过期*反应体积过大，不应超过50μl2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅*最常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应体系*与反
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1. cDNA产量的很低可能的原因：*RNA模板质量低*对mRNA浓度估计过高*反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足*同位素磷32过期*反应体积过大，不应超过50μl2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅*最常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应体系*与
ELISA实验中常见问题及解决方法
ELISA实验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用，但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大，如不注意，有可能导致显色不全、花板等结果。选择试剂时，应选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。 ELISA实验中加样可能碰到的问题:
组织切片机常见问题分析
分析一下免疫组化实验中一些常见的问题和解决措施： 常见问题一：所有切片呈阴性 原因分析：a.缓冲液内含叠氮化钠，抑制酶的活性； b.染色未完全按照操作步骤进行； c.漏加一种抗体或抗体失活； d.复染或脱水剂使用不当； e.底物中加入的过氧化氢少或失活。
对待实验室仪器摇床使用的一些小问题的解决
实验中常会发生在设备上发生一些故障，让实验人员在工作中遇见一些难题。首先，实验中人员在使用恒温摇床时。*要熟悉下摇床的基本使用工具，和外观结构。第二要学习摇床的性能和基本操作。第三要知道实验要求，和设备使用容量。解决恒温摇床设备在实验工作学习中zui常见发生的问题，多掌握解决实验现象小问题。一、托盘
做电泳实验常见条带问题分析
一、微笑形区带（两边翘起，中间凹下）： 形成原因：主要是由凝胶中间部分凝固不均匀引起的，多出现于较厚的凝胶中。 处理办法：待其充分凝固再做实验。 二、皱眉形区带（两边向下，中间鼓起）： 形成原因：主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是由两板之间的底部间隙气泡未排除干
做电泳实验常见条带问题分析
一、微笑形区带（两边翘起，中间凹下）： 形成原因：主要是由凝胶中间部分凝固不均匀引起的，多出现于较厚的凝胶中。处理办法：待其充分凝固再做实验。二、皱眉形区带（两边向下，中间鼓起）：形成原因：主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是由两板之间的底部间隙气泡未排除干净引起的。处理办法：可在两板之间加入适量缓
毛细管色谱柱分析常见问题的解决
一、峰丢失（进样后没有峰出现） 1、注射器有毛病，采用新注射器做验证 2、未接入检测器或检测器不起作用，检查设定值。 3、进样温度太低，检查温度，并根据需要调整。 4、柱温温度太低，检查温度，并根据需要调整。 5、无载气流量，检查压力调节阀，并检查泄露，验证柱样品流速。 6、柱断裂，如果柱断裂是在柱
TA克隆常见问题分析及其解决方案
TA克隆常见问题分析及其解决方案 问 题 可能的原因 建 议 转化后无 克隆菌产生 转化过程有问题或感受态细胞失活 可通过转化pUC18/19等未切割的可用于抗性筛选的质粒，检测感受态细胞的转化效率和转化操作是否正确 插入对照DNA片段的阳性率低 10×快速连接缓冲 液稀释不当 提供的T4 连接酶缓
DNA测序常见问题分析及解决办法
常见问题 具体情况 可能的原因 处理办法 备注 样品准备问题