分析一下免疫组化实验中一些常见的问题和解决措施

分析一下免疫组化实验中一些常见的问题和解决措施: 常见问题一:所有切片呈阴性 原因分析:a.缓冲液内含叠氮化钠,抑制酶的活性; b.染色未完全按照操作步骤进行; c.漏加一种抗体或抗体失活; d.复染或脱水剂使用不当; e.底物中加入的过氧化氢少或失活。 解决措施:设立“阳性对照”。如果阳性对照有了表达,说明染色的全过程和所有试剂都没有问题。如果此时测试片仍为阴性,便是真实的阴性,说明组织或细胞没有相应的抗原表达。 常见问题二:所有切片呈阳性 原因分析:a缓冲液配置中未加氯化钠和PH值不准确,洗涤不彻底; B使用已变色的呈色第五溶液,或呈色反应时间过长; C过氧化氢浓度过高,呈色反应过快且粘附剂太厚; D切片在染色过程中抗体过浓,或干片了; E抗体孵育时间过长。 解决措施:缩短抗体孵育时间和呈色反应时长,染色过程中防止出现干片情况。 常......阅读全文

分析一下免疫组化实验中一些常见的问题和解决措施

  分析一下免疫组化实验中一些常见的问题和解决措施:   常见问题一:所有切片呈阴性   原因分析:a.缓冲液内含叠氮化钠,抑制酶的活性;   b.染色未完全按照操作步骤进行;   c.漏加一种抗体或抗体失活;   d.复染或脱水剂使用不当;   e.底物中加入的过氧化氢少或失活。  

浅谈实验中一些常见问题及解决办法

  实验室中常见的一些工作小问题和仪器设备出现的小状况,多学习以下的方式解决实验中常出现的麻烦    1、 被胶塞粘结的温度计要如何取出?  当温度计或玻璃管与胶塞或胶管粘结在一起而难以取出时,可用小改锥或刀锉的尖端插入温度计(或玻璃管)与胶塞(或胶管)之间,使之形成空隙,再滴上几滴水,如此操作并沿

免疫组化常见问题分析

1,石蜡切片在染色过程中出现脱片现象1)烤片时间不够,或温度不够,可以延长烤片时间和提高烤片温度;2)用含有多聚赖氨酸的玻片,可以购买到或这自己做;3)有些组织本身就容易掉片,如骨组织等,操作时冲PBS不要直接冲到组织上,冲到组织上方,让它流下冲洗组织;4)用高温修复时,温度骤冷也可能引起。2,边缘

免疫组化常见问题及其解决办法

1、 一抗从4度拿出后,为什么要进行37度复温?(1)一方面,防止切片从4度直接放入PBS易脱片;(2)另一方面,使抗原抗体结合更稳定。一般不需要,但对表达较弱的抗原可能有用,4度和37度时分子运动方式不同,前者分子碰撞机率和运动速度小于后者,后者结合更快,但敏感性也提高了并易造成非特异染色。(3)

免疫组化常见问题及解决方法

当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗

IHC免疫组化常见问题分析

  分析一下免疫组化实验中一些常见的问题和解决措施:   常见问题一:所有切片呈阴性   原因分析:a.缓冲液内含叠氮化钠,抑制酶的活性;   b.染色未完全按照操作步骤进行;   c.漏加一种抗体或抗体失活;   d.复染或脱水剂使用不当;   e.底物中加入的过氧化氢少或失活。  

免疫组化具体步骤中的一些问题

问:我现在刚开始做石蜡切片免疫组化,具体操作过程中有些问题想要咨询一下1.脱蜡至水:二甲苯I II 各10分钟后 100% 95% 85% 75%酒精各多久呢(因看各个版本的介绍都不同) 弱弱的问:只搞一个浓度的酒精如95%时间稍微长一些可以吗2.抗原修复:可以枸橼酸加热至沸腾再放入切片保温5-10

PCR实验常见问题、原因分析及其解决方案

PCR产物的电泳检测时间,一般为48h以内,有些最好于当日进行检查,大于48h后带型不规则甚至消失。但有时仍会与到这样那样的问题,影响检测结果的判断,具体归类为以下常见的4点,描述如下:问题一:无扩增产物现象:正对照有条带,而样品则无。原因:1、模板:含有抑制物,含量低。2、Buffer对样品不合适

蛋白纯化实验一些常见问题总结

蛋白纯化过程中常遇见一些问题,这里整理了下几个蛋白纯化实验中的遇见的问题及其解决方式。1)我现在手头有个融合蛋白,纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析,之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列,没有问题。细胞破碎后,融合蛋白在沉淀里,我用助

蛋白纯化实验一些常见问题总结

蛋白纯化过程中常遇见一些问题,这里整理了下几个蛋白纯化实验中的遇见的问题及其解决方式。1)我现在手头有个融合蛋白,纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析,之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列,没有问题。细胞破碎后,融合蛋白在沉淀里,我用助

离心机的一些常见问题与解决方法

离心分离技术也经历了数代更换,由医用离心机,低速冷冻离心机,高速离心机到高速冷冻离心机,超大容量冷冻离心机,超速离心机,超速冷冻离心机,智能高速冷冻离心机。  问题1:离心机的摆放应该注意什么?  答:离心机一般放在干燥、避免阳光直射的地方。离心机散热量比较大,周围不要堆放杂物,四周离墙壁、挡板等不

离心机的一些常见问题与解决方法

  离心分离技术也经历了数代更换,由医用离心机,低速冷冻离心机,高速离心机到高速冷冻离心机,超大容量冷冻离心机,超速离心机,超速冷冻离心机,智能高速冷冻离心机。   问题1:离心机的摆放应该注意什么?   答:离心机一般放在干燥、避免阳光直射的地方。离心机散热量比较大,周围不要堆放杂物,四周离墙壁、

离心机的一些常见问题与解决方法

离心分离技术也经历了数代更换,由医用离心机,低速冷冻离心机,高速离心机到高速冷冻离心机,超大容量冷冻离心机,超速离心机,超速冷冻离心机,智能高速冷冻离心机。  问题1:离心机的摆放应该注意什么?  答:离心机一般放在干燥、避免阳光直射的地方。离心机散热量比较大,周围不要堆放杂物,四周离墙壁、挡板等不

离心机的一些常见问题与解决方法

离心分离技术也经历了数代更换,由医用离心机,低速冷冻离心机,高速离心机到高速冷冻离心机,超大容量冷冻离心机,超速离心机,超速冷冻离心机,智能高速冷冻离心机。  问题1:离心机的摆放应该注意什么?  答:离心机一般放在干燥、避免阳光直射的地方。离心机散热量比较大,周围不要堆放杂物,四周离墙壁、挡板等不

实验中电动搅拌器常见问题及解决办法

  电动搅拌器在我们的日常实验中非常常见,但是在经过长时间的使用或通过我们日常不规范的操作保养,都多少会出现这样或那样的小毛病,有些毛病甚至直接影响我们的正常使用,下面我就来简单给大家说说在使用电动搅拌器时出现一些问题后该如何正确应对。   1)动口再动手:对于电动搅拌器出现故障时,不应急于先动手

毛细管分析常见问题的解决

  四、只有溶剂峰  1.注射器有毛病:用新注射器验证。  2.不正确的载气流速(太低):检查流速,如有必要,调整之  3.样品太稀:注入已知样品以得出良好结果。如果结果很好,就提高灵敏度或加大注入量。  4.柱箱温度过高:检查温度,并根据需要调整  5.柱不能从溶剂峰中解析出组分:将柱更换成较厚涂

毛细管分析常见问题的解决

  一、峰丢失  可能的原因及应采用的排除方法  1.注射器有毛病,用新注射器验证。  2.未接入检测器,或检测器不起作用,检查设定值  3.进样温度太低,检查温度,并根据需要调整  4.柱箱温度太低,检查温度,并根据需要调整  5.无载气流,检查压力调节器,并检查泄漏,验证柱进品流速  6.柱断裂

毛细管分析常见问题的解决

一、峰丢失可能的原因及应采用的排除方法1.注射器有毛病,用新注射器验证。2.未接入检测器,或检测器不起作用,检查设定值。3.进样温度太低,检查温度,并根据需要调整。4.柱箱温度太低,检查温度,并根据需要调整。5.无载气流,检查压力调节器,并检查泄漏,验证柱进品流速。6.柱断裂,如果柱断裂是在柱进口端

毛细管分析常见问题的解决

   一、峰丢失    可能的原因及应采用的排除方法    1.注射器有毛病,用新注射器验证。    2.未接入检测器,或检测器不起作用,检查设定值    3.进样温度太低,检查温度,并根据需要调整    4.柱箱温度太低,检查温度,并根据需要调整    5.无载气流,检查压力调节器,并

毛细管分析常见问题的解决

一、峰丢失可能的原因及应采用的排除方法:1.注射器有毛病,用新注射器验证。2.未接入检测器,或检测器不起作用,检查设定值。3.进样温度太低,检查温度,并根据需要调整。4.柱箱温度太低,检查温度,并根据需要调整。5.无载气流,检查压力调节器,并检查泄漏,验证柱进品流速。6.柱断裂,如果柱断裂是在柱进口

毛细管分析常见问题的解决

峰丢失(进样后没峰出现)   可能的原因及采用的排除方法注射器有毛病,采用新注射器验证。未接入检测器,或检测器不起作用,检查设定值。进样温度太低,检查温度,并根据需要调整。柱温温度太低,检查温度,并根据需要调整。无载气流量,检查压力调节阀,并检查泄露,验证柱样品流速。柱断裂,如果柱断裂是在柱进样口端

免疫组化常见问题的处理

   当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。   对照/标本无染色   ①确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。   ②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。   ③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗

免疫组化常见问题的处理

  当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。  对照/标本无染色  ①确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。  ②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。  ③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测

免疫组化常见问题的处理

 当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色    ① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。    ② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。    ③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以

免疫组化常见问题的处理

当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色①确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗匹配,

免疫组化常见问题的处理

当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色①      确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。②      确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③      对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体

滴定分析中的常见问题

滴定分析法,作为一种简便、快速和应用广泛的定量分析方法,在常量分析中有较高的准确度,滴定分析可算是实验室中最最常用的定量方法啦,很多人都有一个疑问,如果滴定分析结果总是超出了误差范围怎么办? 总的来说,对于任何滴定分析,都要首先了解什么样的精度要求才是有意义的并且是必须的,之后如果发现一些结果还是超

常见的一些超声波清洗机问题如何解决?

一、双频工业超声波清洗机与实验室超声波清洗机        双频工业超声波清洗机:工业级振头,频率从28KZ-40KHZ-80KHZ,功率可从600W-3600W,尺寸多选,清洗工业中不同的机械零部件等,有效进行粗洗、精洗,全苗扫除清洗盲区。         实验室超声波清洗机:实验室、化验室、科研

常见的一些超声波清洗机问题如何解决?

  一、双频工业超声波清洗机与实验室超声波清洗机   双频工业超声波清洗机--上海长肯试验设备有限公司    双频工业超声波清洗机:工业级振头,频率从28KZ-40KHZ-80KHZ,功率可从600W-3600W,尺寸多选,清洗工业中不同的机械零部件等,有效进行粗洗、精洗,全苗扫除清洗盲

流式实验常见问题及解决方法

1.无染色/弱染色 2.高背景/非特异性染色 3.染色异常情况