Hoechst33258与Hoechst33342都能染核,二者区别是什么?

Hoechst 33342,也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式为C27H28N6O·3HCl·3H2O,分子量为615.99。Hoechst 33258,也称bisBenzimide H 33258或HOE 33258。分子式为C25H24N6O·3HCl,分子量为533.88。两种染料都是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。但是hoechst 33342对细胞的毒性作用更小一些,33258穿透能力较33342弱,染活细胞时容易被"泵出",也就是拒染。所以一般来说hoechst 33258用于细胞固定后再染色,而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色。......阅读全文

细胞凋亡检测方法简介

细胞凋亡是指细胞在生长到一定阶段及某些生理过程中,会受到多因素和机制的严格调控而进入死亡。这是一个动态的过程,会涉及一系列复杂的生化反应, 是一个需要酶参与的级联反应,同时也涉及不同基因的表达及调控、信号传导。其中有几项生理过程能被用来检测凋亡的发生,因此多参数分析法对于准确检测这一过程十分

多功能酶标仪测定荧光强度

  HSC-T6、Dulbeceo’s Modafied Eagle’s Medium(DMEM, Sigma);新生小牛血清(杭州四季青公司);Hoechst33258 (Sigma);MTT、JC-1和DMSO(Sigma);次氮基三乙酸铁(Fe-NTA, Sigma);其余为国产分析纯试剂。G

检测细胞凋亡的实验方法比较3

◆ 细胞坏死与细胞凋亡细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。 一、细胞凋亡的形态学检测   根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。

人淋巴细胞姐妹染色体区分染色

实验概要人淋巴细胞姐妹染色体区分染色实验原理姐妹染色体在正常情况下化学组成及结构都是一致的,因此不能用单纯染色方法将之区别开来。      1973年Latt发现让细胞在含Brdu的培养基中培养了2个细胞周期,再以Hoechst33258染色后,两条姐妹染色单体就出现了色差,这就是姐妹染色但提到区分

用流式法(FACS)分离间质SP细胞实验

实验方法原理 实验材料 2〜4代的间质细胞试剂、试剂盒 HBSS 2FBHoechst33342染料 lmg ml水溶碘化丙啶(PI) 2mg ml水溶维拉帕米 500μg ml水溶DMEM 2FB胰蛋白酶 TrypLE:TrypLEExpress或0.25%胰蛋白酶 溶于CMF-SalineG仪器

UVB致皮肤角质形成细胞的损伤模型的制作方法

材料和方法1 试剂:胎牛血清(北京军医兽医防治中心) ,DMEM培养液(GIBCO ,美国) ,碘化丙啶PI(Sigma) ,Triton2X100 (BDH) ,Hoechst33342(Sigma) ,RNase (Sigma) 。2 细胞及实验分组:人角质形成细胞株Colol6 (由北京师范大

细胞凋亡检测方法介绍

细胞凋亡是指细胞在生长到一定阶段及某些生理过程中,会受到多因素和机制的严格调控而进入死亡。这是一个动态的过程,会涉及一系列复杂的生化反应, 是一个需要酶参与的级联反应,同时也涉及不同基因的表达及调控、信号传导。其中有几项生理过程能被用来检测凋亡的发生,因此多参数分析法对于准确检测这一过程十分

Optimized-Method-for-the-Preparation-of-Rodent-Testicular-Cells2

Flow Cytometric AnalysisPrior to flow cytometric analysis, the vital dye Hoechst 33342 (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) was added to cell suspensio

Yale-Immunofluorescence-Protocol

实验概要We provide a protocol for fixation, immunostaining, and imaging in 384-well Plates.主要试剂Reagents1. 384-well view plates (Aurora)2. HUVEC (pooled, L

细胞凋亡检测实验

荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V法) TUNEL法 Caspase-3活性检测法

细胞凋亡检测实验——荧光探针双标记法

实验方法原理本实验用1μg/ml 三尖杉酯碱HT在体外诱导培养的HL-60细胞发生凋亡,同时也有少数细胞发生坏死。用Hoechst33342和碘化丙啶(propidium iodide,PI)对细胞进行双重染色,可以区别凋亡、坏死及正常细胞。三尖杉酯碱(HT)是我国自行研制的一种对急性粒细胞白血病,

细胞凋亡检测实验

荧光探针双标记法 形态学检测法 DNA ladder法 Annexin V/PI双染色法 磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V法) TUNEL法 Caspase-3活性检测法

什么情况查支原体标本易被污染

一般根据支原体种类不同,采取不同的方法进行检测。目前常用的检测方法有:1. 试剂盒检测法:目前已有专门做支原体检测的试剂盒,可以用细胞滴片进行检测。2. 观察细胞的形态和生长特征:支原体污染比较严重时可出现生长减慢,有的培养基pH明显变酸,并出现细胞病变,以此可依次对支原体污染进行检测,但有些情况下

核转位筛选实验(一)

优点· 可重复性表型检测· 既高通量又不牺牲质量的图像获取· 应用交互式预览,大大减少分析设置时间· 统一的统计方法使结果更准确  躁郁症(BD)是一种高度遗传性的心理疾病,它影响到全球大概1%的人口。1949 年锂被第一次应用于躁郁症,到目前为止锂仍是治疗BD 的主要药物。然而在一半的病例中,锂并

荧光检测支原体

实验方法原理在无抗生素情况下,至少将细胞培养一周,将培养上清转移至处于对数生长早期的指示细胞中,孵育 3~5d ,将细胞固定和染色,寻找细胞核之外的荧光。实验材料来自于7天单层培养的无抗生素的细胞培养上清液或经离心后的上清液                                      

荧光检测支原体

实验方法原理在无抗生素情况下,至少将细胞培养一周,将培养上清转移至处于对数生长早期的指示细胞中,孵育 3~5d ,将细胞固定和染色,寻找细胞核之外的荧光。实验材料来自于7天单层培养的无抗生素的细胞培养上清液或经离心后的上清液指示细胞试剂、试剂盒Hoechst 33258 染料BSS-PRD-PBSA

细胞凋亡实验步骤及注意事项

一、实验目的1、掌屋凋亡细胞的形态特征 2、学会用荧光探针对细胞进行双标记来检测正常活细胞、凋亡细胞和坏死细胞的方法二、实验原理 细胞死亡根据其性质、起源及生物学意义区分为凋亡和坏死两种不同类型。凋亡普遍存在于生命界,在生物个体和生存中起着非常重要的作用。它是细胞在一定生理条件下一系列顺序发生事件的

细胞凋亡实验操作细则

一、实验目的: 1、掌屋凋亡细胞的形态特征 2、学会用荧光探针对细胞进行双标记来检测正常活细胞、凋亡细胞和坏死细胞的方法二、实验原理 细胞死亡根据其性质、起源及生物学意义区分为凋亡和坏死两种不同类型。凋亡普遍存在于生命界,在生物个体和生存中起着非常重要的作用。它是细胞在一定生理条件下一系列顺序发生事

流式细胞仪技术概述

流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数

流式细胞仪技术概述

流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数

流式细胞仪技术概述

  流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进

细胞凋亡检测(AnnexinVFITC-单染法)2

2 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。常用的DNA 特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三种染料与 DNA 的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA 的A

细胞死亡的形态学评价实验_光学及荧光显微术

实验材料细胞悬液试剂、试剂盒LenkostatHoechst 33258吖啶橙 溴化乙锭仪器、耗材光学显微镜荧光显微镜实验步骤一、旋转细胞制备的 Lenkostat 染色1. 在转瓶小室中加入 100 μl 细胞悬液,500 r/min 离心 2 分钟。载玻片风干至少 5 分钟。2. 在 Lenko

如何识别造血干细胞

造血干细胞没有明确的形态学特征,都表现为淋巴细胞俗人单个核母细胞。因此根据多能干细胞的增殖和分化潜力,其生理特征就成为鉴定干细胞的依据。现在多用细胞分化标记CD34和CD38抗原,辅助染料Rhodamine123或Hoechst33342来区分和识别造血干细胞地。最初用于用于检测干细胞的小鼠脾集落形

Simultaneous-analysis-of-DNA-content

Simultaneous analysis of DNA content and surface immunophenotype using gentle ethanol fixation techniques.  William Telford. Louis E. King and Pamela

通过流式细胞仪研究斑马鱼胚胎中细胞周期分析

[精华提要]结合绿色荧光蛋白表达的细胞周期分析广泛的用于研究绿色荧光蛋白标记的细胞的细胞周期分布。这个方案是一种用绿色荧光蛋白标记的斑马鱼胚胎来分析细胞周期的方法。材料与试剂1.        PBS(Invitrogen公司14040)2.        胎牛血清3.        乙醇4.   

H33342释放法检测单核巨噬细胞的胞毒作用

实验概要本实验利用H33342释放法检测了单核-巨噬细胞的胞毒作用。H33342(Hoechst33342)为DNA的特异性荧光染料,可用其标记肿瘤细胞以检测单核细胞对肿瘤细胞的杀伤效应。被损伤的靶细胞DNA断裂后,H33342释放到上清液中,采用微量荧光仪可定量测定上清液中的荧光强度。效应细胞的杀

利用自动细胞成像系统分析细胞凋亡

简介细胞凋亡是一种发生在多细胞生物体内的程序性细胞死亡过程!生化反应导致细胞形态和特征变化及细胞死亡。形态变化包括细胞收缩、核分裂、染色质凝缩、染色 DNA 分裂及 mRNA 衰减。细胞凋亡是一种高度调控的过程,通过内在途经对各种压力源做出响应,包括饥饿、感染、缺氧和氧化应激反应等。线粒体损

六种染色后光镜观察法检测肝癌细胞凋亡

作者:杨连君,司晓辉,王文亮,王文勇,赵一岭,方正清[摘  要] 目的:探讨简便易行的在光镜下通过形态学观察检测细胞凋亡的方法,并对其进行比较。方法:首先用6%的乙醇作用6 h诱导人肝细胞癌细胞系HCC9204细胞凋亡,然后进行未固定细胞的台盼蓝染色、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染色,细胞固定后

细胞免疫荧光染色实验

实验原理利用抗原抗体反应,鉴定细胞是否表达某种蛋白。细胞经固定后,用特异性抗体(一抗)识别目的蛋白,再用一抗的抗体(二抗)识别一抗,二抗一般耦联荧光基团或化学反应基团,通过荧光或化学发光显示目的蛋白。主要试剂防淬灭剂、DPBS、指甲油、4% PFA、10 μg/mL PI、10 μg/mL Hoec