Hoechst33258与Hoechst33342都能染核,二者区别是什么?
Hoechst 33342,也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式为C27H28N6O·3HCl·3H2O,分子量为615.99。Hoechst 33258,也称bisBenzimide H 33258或HOE 33258。分子式为C25H24N6O·3HCl,分子量为533.88。两种染料都是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。但是hoechst 33342对细胞的毒性作用更小一些,33258穿透能力较33342弱,染活细胞时容易被"泵出",也就是拒染。所以一般来说hoechst 33258用于细胞固定后再染色,而hoechst33342则可以对活细胞直接进行染色。......阅读全文
脂肪干细胞的Hoechst/PI-死活染色介绍
弃掉旧培养基,用D-Hanks 冲洗除去残留培养基然后向每个Transwell 孔中加入质量浓度为1 mg/mL 的Hoechst 33342 大约10 μL,使其终质量浓度为10 μg/mL,37℃下避光反应10 min。待Hoechst 染色完成后,用D-Hanks 冲洗除净残余的Hoech
自动细胞成像系统进行细胞表型的多参数评估
简介自动细胞成像是一种分析化合物对包括细胞形态,活力和标志物表达在内的细胞表型的影响的有效方法。这里,我们将展示ImageXpress® Pico自动细胞成像系统和CellReporterXpress 自动成像分析软件如何应用于化合物影响的表型分析。成像和分析方法可提供工具来鉴定细胞活力,细
贴壁/悬浮细胞及组织切片进行Hoechst染色的方法步骤
Hoechst染色方法1.贴壁细胞1) 取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍,再用细胞培养液洗涤一遍。将盖玻片置于六孔板内,种入细胞培养过夜,使约为50%-80%满。2) 刺激细胞发生凋亡后,吸尽培养液,加入0
侧群干细胞(sp细胞)的分离与分选
准备工作: DF12 加入0.1%BSA,100ml,取10ml冰浴,40ml放入孵箱;其余的放入4度; DNase I 100*; PI:50ug/ml; Hoechst33342: 1000ug/ml(all from Sigma) 计数板,冰盒;各种离心管,无菌流式管(BD),400滤网(BD
细胞死亡的检验方式
细胞发生凋亡时具有固有的形态特征,如细胞核表现缩小、染色质边缘化、凝集,凋亡晚期还会出现由核碎片与胞质内的部分细胞器混合在一起,且被细胞膜包裹形成的凋亡小体。DNA特异性染料(如Hoechst33342、Hoechst33258和DAPI等)可以与DNA的A-T碱基区进行非嵌入式结合,从而使细胞核着
如何看出来细胞培养液体中有支原体
1. 观察细胞的形态和生长特征:支原体污染比较严重时可出现生长减慢,有的培养基pH明显变酸,并出现细胞病变,以此可依次对支原体污染进行检测,但有些情况下支原体污染引起的病变特征与病毒感染相似,因此不能准确诊断。2. 分离培养法:大多数支原体可出现特有的典型菌落。因而可依次尽心检测,该方法准确、可靠,
如何看出来细胞培养液体中有支原体
1. 观察细胞的形态和生长特征:支原体污染比较严重时可出现生长减慢,有的培养基pH明显变酸,并出现细胞病变,以此可依次对支原体污染进行检测,但有些情况下支原体污染引起的病变特征与病毒感染相似,因此不能准确诊断。2. 分离培养法:大多数支原体可出现特有的典型菌落。因而可依次尽心检测,该方法准确、可靠,
用流式法(FACS)分离间质SP细胞实验
利用Hoechst33342外流性质分选角膜间质干细胞用ABCG2表达特性免疫分选角膜间质干细胞实验方法原理实验材料2〜4代的间质细胞 试剂、试剂盒HBSS 2FB
用流式法(FACS)分离间质SP细胞实验
利用Hoechst33342外流性质分选角膜间质干细胞 用ABCG2表达特性免疫分选角膜间质干细胞 实验方法原理
流式细胞术在血液学中的应用(七)
细胞凋亡研究细胞凋亡是细胞在基因控制下的有序死亡,在疾病发生、发展中有重要作用,因而研究细胞凋亡有重要意义。细胞凋亡检测方法很多,应用流式细胞仪技术可根据细胞在凋亡过程中发生一系列形态、生化变化从多个角度对细胞凋亡进行定性和定量的测定。 细胞形态变化:通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化来观察细胞凋亡
细胞凋亡检测实验原理分析
本实验用1μg/ml 三尖杉酯碱HT在体外诱导培养的HL-60细胞发生凋亡,同时也有少数细胞发生坏死。用Hoechst33342和碘化丙啶(propidium iodide,PI)对细胞进行双重染色,可以区别凋亡、坏死及正常细胞。三尖杉酯碱(HT)是我国自行研制的一种对急性粒细胞白血病,急性单核白血
与做荧光染色的同学共享些经验
Hoechst 33258染色固定液 50 ml Hoechst 33258染色液 50 ml 抗荧光淬灭封片液 5 ml 说明书 1 份 保存条件: 4℃保存,Hoechst 33258染色液需4℃避光保存。本试剂盒自订购之日起六个月内有效。 注意事项: Ø 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。 Ø
用流式法(FACS)分离间质SP细胞实验1
利用Hoechst33342外流性质分选角膜间质干细胞实验材料2〜4代的间质细胞试剂、试剂盒HBSS 2FBHoechst33342染料 lmg ml水溶碘化丙啶(PI) 2mg ml水溶维拉帕米 500μg ml水溶DMEM 2FB胰蛋白酶 TrypLE:TrypLEExpress或0.25%胰蛋
CELL-CYCLE-ANALYSIS
PROPIDIUM IODIDE: The most commonly used dye for DNA content/cell cycle analysis is PROPIDIUM IODIDE (PI). It can be used to stain whole cells or isol
荧光染料在核酸检测方面的应用
核酸荧光染料对细胞核染色后定量测量细胞所发出的荧光强度,就可以确定细胞核中DNA、RNA的含量,并可以对细胞周期和细胞的增殖状况进行分析。有多种荧光染料可以对细胞中的DNA或RNA染色,常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst 33342等,RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。
Protocol-to-Count-Cell-Number-of-Preimplantation-Embryos
Protocol to Count Cell Number of Preimplantation Embryos using Nuclear Staining with Hoechst 33342 or DAPI Introduction The following is a simple pro
细胞膜完整性及膜转运功能检测实验——HoechstPI-染色法
实验步骤1. 主要试剂的配制碘化丙锭贮存液:100 μg/ml,4℃ 避光保存。Hoechst 33258 贮存液:100 μg/ml,4℃ 避光保存。2. 操作流程2.1 常规制备单细胞悬液(方法同 PI 染色法),加入 Hoechst 33258 溶液,使其终浓度为 1 μg/ml,37℃ 孵育
关于鬼笔环肽的配制内容介绍
0.1mg鬼笔环肽溶于1ml无水甲醇(也可用DMSO或无水乙醇溶解)配成贮存液,可在-20度避光的条件下长期保存,工作液的浓度为5ug/ml,由贮存液加生理盐水PBS稀释20倍即可。 一、染色程序 1、生理盐水PBS清洗细胞2次,每次10分钟; 2、3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分
荧光显微镜检测支原体
实验方法原理 检测支原体有两种不同的策略:第一种方法将在下述方案中述及,利用对 DNA 染色的荧光染料 Hoechst 33258, 它对细胞核周围(在细胞表面或胞质中)的特殊物质进行染色,可显示支原体污染;第二种方法是利用 DNA 探针
荧光显微镜检测支原体
实验方法原理 检测支原体有两种不同的策略:第一种方法将在下述方案中述及,利用对 DNA 染色的荧光染料 Hoechst 33258, 它对细胞核周围(在细胞表面或胞质中)的特殊物质进行染色,可显示支原体污染;第二种方法是利用 DNA 探针识别细胞提取物中的 DNA 支原体特异序列,进行支
荧光显微镜检测支原体
实验方法原理检测支原体有两种不同的策略:第一种方法将在下述方案中述及,利用对 DNA 染色的荧光染料 Hoechst 33258, 它对细胞核周围(在细胞表面或胞质中)的特殊物质进行染色,可显示支原体污染;第二种方法是利用 DNA 探针识别细胞提取物中的 DNA 支原体特异序列,进行支原体污染的检测
荧光显微镜检测支原体
荧光显微镜检测支原体实验方法原理检测支原体有两种不同的策略:第一种方法将在下述方案中述及,利用对 DNA 染色的荧光染料 Hoechst 33258, 它对细胞核周围(在细胞表面或胞质中)的特殊物质进行染色,可显示支原体污染;第二种方法是利用 DNA 探针识别细胞提取物中的 DNA 支原体特
【技术方案】微孔板内细胞固定和抗体染色自动化解决方案
以往,我们使用显微镜做荧光成像的时候,常常将样本放在载玻片上。但是随着样本量增加,细胞实验使用 96 孔和 384 孔微孔板逐渐成为趋势,这与高内涵(high-content analysis,HCA)分析不谋而合。高内涵分析是一种高通量识别并分析由与细胞相互作用的物质所带来的细胞表型变化的方法。这
方案22.5-姐妹染色单体交换实验
实验方法原理 用胰蛋白酶消化 BUdR 标记了的两个细胞周期并停留在分裂中期的细胞,在低张缓冲液中孵育细胞,然后固定。用 Hoechst 33258 处理细胞后制备载有细胞的载玻片,光降解染色体。用姬姆萨进行染色体染色,在光学显微镜的油镜下
姐妹染色单体交换实验
实验方法原理 用胰蛋白酶消化 BUdR 标记了的两个细胞周期并停留在分裂中期的细胞,在低张缓冲液中孵育细胞,然后固定。用 Hoechst 33258 处理细胞后制备载有细胞的载玻片,光降解染色体。用姬姆萨进行染色体染色,在光学显微镜的油镜下进行观察。试剂、试剂盒D-PBSA PE
姐妹染色单体交换实验
实验方法原理用胰蛋白酶消化 BUdR 标记了的两个细胞周期并停留在分裂中期的细胞,在低张缓冲液中孵育细胞,然后固定。用 Hoechst 33258 处理细胞后制备载有细胞的载玻片,光降解染色体。用姬姆萨进行染色体染色,在光学显微镜的油镜下进行观察。试剂、试剂盒D-PBSA PE胰蛋白酶BUdRKar
姐妹染色单体交换实验
实验方法原理 用胰蛋白酶消化 BUdR 标记了的两个细胞周期并停留在分裂中期的细胞,在低张缓冲液中孵育细胞,然后固定。用 Hoechst 33258 处理细胞后制备载有细胞的载玻片,光降解染色体。用姬姆萨进行染色体染色,在光学显微镜的油镜下进行观察。试剂、试剂盒 D-PBSA PE 胰蛋白酶 BUd
细胞凋亡检测方法简介
细胞凋亡是指细胞在生长到一定阶段及某些生理过程中,会受到多因素和机制的严格调控而进入死亡。这是一个动态的过程,会涉及一系列复杂的生化反应, 是一个需要酶参与的级联反应,同时也涉及不同基因的表达及调控、信号传导。其中有几项生理过程能被用来检测凋亡的发生,因此多参数分析法对于准确检测这一过程十分
多功能酶标仪测定荧光强度
HSC-T6、Dulbeceo’s Modafied Eagle’s Medium(DMEM, Sigma);新生小牛血清(杭州四季青公司);Hoechst33258 (Sigma);MTT、JC-1和DMSO(Sigma);次氮基三乙酸铁(Fe-NTA, Sigma);其余为国产分析纯试剂。G
检测细胞凋亡的实验方法比较3
◆ 细胞坏死与细胞凋亡细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。 一、细胞凋亡的形态学检测 根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。