青岛能源所实现细胞内蛋白质静电相互作用的直接测量

静电相互作用在酶催化、蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质-DNA/RNA相互作用和H+的转移等生物反应过程中起到重要作用,但绝大多数蛋白质都是在细胞中执行其功能,复杂细胞环境可以扰动蛋白质的静电相互作用。 近日,中国科学院青岛生物能源与过程研究所蛋白质设计研究组研究员姚礼山团队在细胞内原位定量测量蛋白质静电相互作用研究中取得进展,应用核磁共振技术和双突变循环(double mutational cycle,DMC)方法,测量了细胞内IgG结合蛋白质GB3中的8对电荷相互作用,并与在胞外条件测量的结果进行比较。研究表明,蛋白质GB3中5对电荷的静电相互作用没有明显变化,另外3对电荷的静电相互作用减弱了70%以上。进一步研究表明,细胞内蛋白质静电相互作用强弱与蛋白质折叠转移自由能有关,折叠态和解折叠态的转移自由能都影响细胞内蛋白质静电相互作用,尽管后者通常比前者的影响更大。研究结果凸显了在细胞内直接研究蛋白质相互作用和蛋白质功能的......阅读全文

利用-BIAcore-分析相互作用的蛋白质

            实验方法原理 Biacore是基于表面等离子体共振(SPR)技术来实时跟踪在天然状态下生物分子间的相互作用,无需任何标记物。表面等离子体共振(surface plasmonresonance,SPR)是一种光学现象,在传感芯片发生全反

质谱研究蛋白质相互作用(一)

  质谱技术已经成为了蛋白质组学研究的主力。这种技术方法能精确的检测多肽,从而帮助研究人员识别并测序多肽分子,分析它们的特征,了解它们如何进行化学修饰的。  但大多数蛋白质并不是单独行动的,一些关键的生物学过程,如DNA 复制、转录、翻译、细胞分裂和能量生成都依赖于大型蛋白复合物的行为,这些蛋白复合

蛋白质间相互作用研究方法3:BIAcore

快速分析过去已确定的相互作用l      利用BIAcore通过表面胞质基因共振光谱学分析相互作用的蛋白质RAMc通过伯氨基与CM-5传感芯片表面的结合1.将CM-5传感芯片模块嵌入BIAcore仪器。2.全部采用过滤并除气的HEPES缓冲盐溶液。3.将分别含有NHS、EDC、乙醇胺和RAM Fc以

预测蛋白质相互作用的计算方法

  蛋白质相互作用研究能够从分子水平上揭示蛋白质的功能,帮助揭示生长发育、新陈代谢、分化和凋亡等细胞活动的规律。在全基因组范围内识别蛋白质相互作用对是解释细胞调控机制的重要一步。随着蛋白质相互作用实验技术的发展,人们能够获得大量的蛋白质相互作用数据,甚至能够在全基因组范围内对蛋白质相互作用进行分析。

蛋白质相互作用研究:从整体到局部

随着越来越多的物种基因组测序完成,对全蛋白质组与相互作用组的解释已经成为近期研究的热点。虽然蛋白质组研究阐述了表达蛋白质的所有组成成分,但是相互作用组包括了生物体内存在或者可能存在的成对蛋白质-蛋白质相互作用,因此,形成了庞大且稀疏的网状结构。伦敦帝国理工学院生物信息学中心的WP Ke

P53与蛋白质的相互作用

一些蛋白质能与P53蛋白作用,导致其正常生物学功能的丧失,DNA肿瘤病毒如 HPV16、18、SV40和腺病毒编码癌蛋白,引起宿主细胞的恶性病变,这些癌蛋白如 SV40T抗原、腺病毒ELa、ELb、HPVE6能与Rb,P53结合。Scheffner证实,HPVE6结合 P53后,启动细胞内蛋白酶降解

蛋白质相互作用(protein-interaction)实验方法

免疫共沉淀和亲和层析共分离:免疫共沉淀是证明蛋白质-蛋白质相互作用的最直接最经典和最有效的方法,如蛋白A能与B相互作用结合成异源二聚体,无论用抗A或抗B的抗体或与A或 B的亲和物偶联的agarose小珠都能把A和B沉淀下来。因此广泛用于蛋白质相互作用研究。常用的小珠:GST-Agarose(不需要抗

研究蛋白质RNA相互作用的新工具

  近日,赛默飞世尔科技全新推出了一款Pierce Magnetic RNA-Protein Pull-Down Kit,让研究人员能够以末端标记的RNA作为诱饵,轻松富集蛋白质-RNA的相互作用。与抗体捕获相比,这种方法的优势在于脱硫生物素化的目标RNA能够直接富集RBP(或复合物)。  蛋白

米粒子与蛋白质之间的相互作用

      蛋白质是生命中比较重要的物质组成部分,它们在体内是有着很多的特殊功能的,像一些催化功能,能量的转运以及保护等。但是我们都了解到蛋白质的能量高度都是和疾病联系在一起的,经常还会有一些疾病的信号发生。我们需要通过粗蛋白测定仪来检测,再通过我们现在比较实用的纳米技术来不断的增加疾病的发生率。随

静电过滤器

静电过滤器,一种空气过滤器,利用高压静电场使微粒荷电,然后被集尘板捕集的空气过滤器。外文名:electrostatic filter寿 命:重复永久使用简 介:空气净化设备原 理:高压静电场组 成:由两级组成简介编辑静电过滤器是在工业静电除尘器的基础上发展起来的室内空气净化设备,现已被大量应用于各种

什么是静电纺丝

静电纺丝就是高分子流体静电雾化的特殊形式,此时雾化分裂出的物质不是微小液滴,而是聚合物带电微小射流,在电场力的作用下可以运行相当长的距离,最终在接收装置上固化成纤维。

静电纺丝的原理

静电纺丝是一种特殊的纤维制造工艺,聚合物溶液或熔体在强电场中进行喷射纺丝。在电场作用下,针头处的液滴会由球形变为圆锥形(即“泰勒锥”),并从圆锥尖端延展得到纤维细丝。这种方式可以生产出纳米级直径的聚合物细丝。

蛋白质蛋白质相互作用理论预测和药物设计新法获进展

  11月29日,《美国国家科学院院刊》(PNAS)在线发表了中国科学院上海药物研究所蒋华良课题组和美国莱斯大学(Rice University)José N. Onuchic 课题组合作的论文Elucidating the druggable interface of protein-protei

蛋白质间相互作用研究方法:免疫共沉淀

相互作用在生理上的证实和探索l      通过免疫共沉淀确定结合蛋白1.用磷酸盐缓冲液洗30块10 cm培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到1 ml冰冷的EBC裂解缓冲液中。2.将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中,在微量离心机上4℃以最大速度离心15 min。3.收集上清(约30 ml)并加入3

大规模蛋白质相互作用研究方法进展(二)

这一经典的蛋白相互作用研究方法接近于体内环境,那些瞬时、不稳定的两两相互作用也可以被检测到,并且与内源蛋白的表达无关[6]。鉴于这些优点并结合简便高效的Gateway表达载体构建方法[7],在大规模的蛋白质-蛋白质相互作用研究中酵母双杂交系统得到了最为广泛的应用。Rain 等[8]用该法绘制了人类胃

大规模蛋白质相互作用研究方法进展(四)

表1 蛋白质相互作用分析相关数据库及网站  网站 资源类型 网址  DIP  蛋白质相互作用http: //dip.doe-mbi.uda.edu  INTERACT  蛋白质相互作用http: //bioinf.man.ac.uk/interactpr.htm  ProNet  蛋白质相互作用ht

大规模蛋白质相互作用研究方法进展(三)

           图1 TAP亲和层析纯化原理[14]  注:A:标签中的ProteinA 与固化的IgG 结合缓冲液淋洗去除不能结合的杂蛋白,TEV 酶切分离ProteinA   和靶蛋白;B:利用CBP(Calmodulin binding peptide)-Calmodulin   的相互

大规模蛋白质相互作用研究方法进展(一)

 来源:生命科学 关 薇, 王 建, 贺福初*(军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京 100850)  摘 要:随着2000 年酵母大规模蛋白质相互作用网络图谱的成功描绘,蛋白质相互作用特别是大规模蛋白质相互作用研究成为生命科学领域的又一个研究热点。酵母、果蝇、线虫以及人类蛋白的大规模相

研究蛋白质之间相互作用的实验方法

白质与蛋白质之间相互作用构成了细胞生化反应网络的一个主要组成部分,蛋白-蛋白互作网络与转录调控网络对调控细胞及其信号有重要意义。把原来spaces空间上的一篇蛋白质与蛋白质间相互作用研究方法转来,算是实验技巧分类目录的首篇。一、酵母双杂交系统酵母双杂交系统是当前广泛用于蛋白质相互作用组学研究的一种重

研究蛋白质与DNA相互作用的主要方法

  一、引言   在许多的细胞生命活动中,例如DNA复制、mRNA转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到DNA与蛋白质之间的相互作用的问题。   重组DNA技术的发展,人们已分离到了许多重要的基因。现在的关键问题是需要揭示环境因子及发育信号究竟是如何控制基因的转录活性。为此需要:   a、鉴定分析

Cell重磅:人类病毒蛋白质相互作用图谱面世

图片来源:《寄生虫》海报  近日,一部豆瓣评分9.2的韩国电影《寄生虫》广受大家的好评。故事也正如片名一样,讲述了一个贫困家庭“寄生”于富人家庭的故事。说到寄生,其实人体内的寄生事件更是数不胜数,最常见的便是病毒的感染。  病毒是一种比真菌和细菌小得多的感染性微生物,要想生存,它就必须找到合适的活体

简述P53与蛋白质的相互作用

  一些蛋白质能与P53蛋白作用,导致其正常生物学功能的丧失,DNA肿瘤病毒如 HPV16、18、SV40和腺病毒编码癌蛋白,引起宿主细胞的恶性病变,这些癌蛋白如 SV40T抗原、腺病毒ELa、ELb、HPVE6能与Rb,P53结合。Scheffner证实,HPVE6结合 P53后,启动细胞内蛋白酶

研究蛋白质与DNA相互作用的主要方法

一、引言在许多的细胞生命活动中,例如DNA复制、mRNA转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到DNA与蛋白质之间的相互作用的问题。重组DNA技术的发展,人们已分离到了许多重要的基因。现在的关键问题是需要揭示环境因子及发育信号究竟是如何控制基因的转录活性。为此需要:a、鉴定分析参与基因表达调控的DNA元件

方案9-用-GFP-嵌合体监控蛋白质蛋白质相互作用实验

实验材料纯化的目标蛋白纯化的 S65T GFP 嵌合体试剂、试剂盒非变性聚丙稀醜胺凝胶Tris-HCl 缓冲液仪器、耗材荧光成像系统垂直胶板电泳系统实验步骤方法 1 荧光凝胶阻滞分析法方法 2 荧光极性分析法展开

ESD防静电门禁系统/防静电检测门禁系统介绍

ESD防静电门禁系统的特点:1,每个人(卡片)可以设置不同的测试权限(手,双脚,全测,免验証,手+左脚,手+右脚,左脚,右脚),方便权宜性管理(EX:员工临时脚部受伤可只测手+单脚或只测单脚)2,静电测试仪左右脚踏板独立分离设计;左右脚金属踏板间电阻值大于10的12次方Ω;人体综合测试仪,可仅按一钮

洁净室静电测试

   茂默科学以客户为本、合作共赢的理念,致力于帮忙客户提供整体实验方案。力求解决行业内客户对科学仪器选型难、维护难的处境。通过不断优化公司运作和提升服务质量,目前已赢得业内人士和广大客户广泛认可,拥有广泛而稳固的合作伙伴和客户群体。现介绍一些水质分析常用分析指标,欲购买相关仪器,欢迎咨询~   

静电危害及防治办法

静电危害防治方法可分为接地、增加湿度、限治速度、抗静电材料、与静电消除器等五种。工业治造过程中,因作业环境、程序及材料的不同,所实施的静电危害防治方法亦会有所不同。选用时必须考量现场治程环境、条件与限治,甚至经费、管理系统与人力素质等因素。(一)、静电危害防治方法中,接地是zui有效且经济的方法。治

静电测试仪简介

  静电场测试仪是一非接触式手提静电场测试仪。可测范围在+/-20KV(工作距离为1英寸,25mm)配置有2个LED灯确保测量时离被测物体保持25mm纤维、纱线、织物、地毯、装饰织物)的静电性能,也可用来测定其它片、板状材料如纸张、橡胶、塑料、复合板材等的静电性能。仪器主机由电晕放电装置、探头和检测

静电放电实验桌材质

目前实验台常用的就是 钢木和全钢两种。要说材质优劣,倒也分不出伯仲,使用年限也都很久。简单给你总结一下其特点不同。 1、材质及结构钢木实验台:基本是钢架结合全木柜体,实验台的支架是经酸洗磷化处理后环氧树脂喷涂而成,箱体一般采用三聚氰胺板纤板制作。全钢实验台:都是冷扎钢板折弯、喷涂、组装而成。其中

静电测试仪特点

  1:电池(4档)效能显示  2:条型图显示电场极性及强弱  3:自控量程数字显示  4:多功能报警提示  5:闲置5分钟后自动关机  6:可配离子平衡测量板  7:附有LED照明,也可在暗处读数据。  8:传感器故障时,Err表示。  9:配有聚乙烯包装盒,接地扣,电池。