细胞培养原代培养的基本过程

原代培养的基本过程包括取材、培养材料的制备、接种、加培养液、置培养条件下培养等步骤,在所有的操作过程中,都必须保持培养物及生长环境的无菌。......阅读全文

浅谈原代细胞培养那些事(二)

四、原代细胞培养流程(例:乳鼠肺组织)1.取材:将1-3天新生乳鼠尾巴提起,整个身体浸入装有75%酒精的烧杯中3秒左右(默数5下),取出放置到灭菌的培养皿中,移入工作台内。小鼠仰位固定在泡沫塑料板上,大头针分别固定头、尾和四肢。用碘酒、75%酒精消毒胸廓部位皮肤。在胸廓正中线中位处,用两把眼科弯镊夹

原代胚胎成纤维细胞培养

实验方法原理细胞培养是模拟机体内生理条件,将细胞从机体内取出,在人工条件下培养,使细胞生存、生长、繁殖和传代,从而可以进行细胞生命过程、细胞癌变等问题的研究。由体内直接取出组织或细胞进行细胞培养叫做原代细胞培养,也有的把第1代细胞与传10代以内的细胞培养统称为原代细胞培养。一般来说,用幼嫩状态的组织

浅谈原代细胞培养的那些事(一)

一、何谓原代培养?原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养,即组织直接从机体获取后,通过组织块长出单层细胞,或者用酶消化或机械方法将组织分散成单个细胞开始培养,在*传代前的培养可认为是原代培养。原代培养的过程指动物的组织或器官从机体取出后,经机械法或各种酶类(常用胰蛋白酶)和螯合剂(常用

肿瘤组织源性的原代细胞培养

一、肿瘤细胞培养的概述        肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用肿瘤原代细胞培养基础培养基、5~10%血清浓度、细胞培养添加剂、抗生素等等即可。或在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物,或原患者血清(1~2%)以利细胞生长。用细胞生长因子如胰岛素、氢化可的松、

细胞培养的培养过程简介

  将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养,则直接将组织块接入培养器皿底部,几个小时后组织块可贴牢在底部,再加入培养基。如系细胞培养,一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数,按要求以一定的量(以每毫升细胞数表示)接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后,立即放入培养

细胞培养的原代培养的一般流程

原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养,也称初代培养。严格地说即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段,但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。一般持续1一4周。此期细胞呈活跃的移动,可见细胞分裂,但不旺盛。原代培养细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大

细胞培养细胞培养的一般过程

一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。二、取材在无菌

原代培养的基本介绍

原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的首次培养,也叫初代培养。原代培养离体时间短,遗传性状和体内细胞相似,适于做细胞形态、功能和分化等研究。较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细

原代培养的基本介绍

  细胞培养是生物学和医学研究最常用的手段之一,可分为原代培养和传代培养两种。  原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养,也称初代培养。严格地说即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段,但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。一般持续1一4周。此期细胞呈活跃的移

常用原代动物细胞培养:肝星状细胞培养材料和方法

材料 相差显微镜,荧光显微镜,手术器械,雄性SD大鼠,体重250-450 g,戊巴比妥钠,200目尼龙网,小牛血清(或胎牛血清,则更好),DMEM,胰酶消化液(以HBSS配),Nycodenz(以GBSS配),D- Hanks'(KCl 0.4 g/L,KH2PO4 0.06 g

IPS细胞培养过程

诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPS cells)最初是日本人山中申弥(Shinya Yamanaka)于2006年利用病毒载体将四个转录因子(Oct4, Sox2, Klf4 和c-Myc)的组合转入分化的体细胞中,使其重编程而得到的类似胚

原代心肌细胞培养方法探讨

摘要 探讨培养Wister新生大鼠心肌细胞的可靠方法。采用心肌组织块差别消化结合化学纯化的培养方法,通过倒置显微镜、HE染色、透射电镜、台盼篮、免疫细胞化学,鉴定心肌细胞生长情况及纯度。结果细胞生长迅速、自行搏动,细胞形态完整,细胞内肌丝、线粒体清晰;细胞成活率达94.6%;肌动蛋白(HHF35)经

原代细胞培养之——细胞分离技术(一)

原代细胞的分离和制作人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密,不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖,即使采用1mm3的组织块,也只有少量处于周边的细胞可能生存和生长,若需获取大量细胞,必须将现有的组织块充分散开,使细胞解离出来,常采用的方法如下: 一、悬浮细胞的分离方法 组织材料若来自血液、羊水

原代细胞培养实验注意事项详解

  (1)原代培养材料的选择,尽量选取繁殖能力较强的组织,如胚胎、幼小的生物体或者肿瘤组织等。  (2)要注意无菌操作。其操作要求应高于外科手术  (3)整个取材操作要迅速,尤其孕鼠浸泡乙醇时间1min左右,不能过长,以确保胚胎细胞活性。  (4)运用消化法时胰酶温度应低于37℃,浓度只需平时消化细

原代细胞培养之——细胞分离技术(二)

(2) 胶原酶(Collagenase)消化法  胶原酶是一种从细菌中提取出来的酶,对胶原有很强的消化作用。适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织,它对细胞间质有较好的消化作用,对细胞本身影响不大,可使细胞与胶原成分脱离而不受伤害。该酶分离效果好,即使有钙、镁离子存在仍有活性,故可用PBS和含血清的

原代细胞培养之分离注意事项

  1、组织块培养法  1)组织块接种后的前3天,在观察和移动的过程中,注意不要引起液体的振荡。要避免经常翻动和振动,否则组织块不易附着于瓶壁上或附着后也会脱落飘起。  2)加入的培养液不宜过多,避免浸泡的组织块受轻微的波动而脱落下来。  3)当细胞向外迁徙出来后要注意记录并去除漂浮的组织块和残留的

正常小鼠原代脑星形胶质细胞培养

一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液

小鼠神经元原代细胞培养步骤

  小鼠大脑皮层神经元原代培养步骤:  1、 于无菌条件下切取鼠头并以75%酒精浸泡1min,解剖出完整鼠脑;  2、 预冷解剖液中分离去除软膜、血管、取大脑皮质漂洗,用眼科剪将皮质反复剪切成碎块;  3、 移入培养皿中,吸除解剖液加入0.25%胰蛋白酶2m1,37℃培养箱中消化30min;  4、

正常小鼠原代骨骼肌细胞培养

PriCells –正常小鼠原代骨骼肌细胞培养 一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS

原代细胞培养中的6个常见错误

当培养原代细胞时,重要的是要记住,他们不是细胞系,不能同等对待。因为ScienCell在原代细胞培养方面的广泛工作,我们非常熟悉研究人员在培养原代细胞时遇到的常见问题。这里有六个在原代细胞培养中的常见错误,以及如何纠正这些错误。错误1:一小管原代细胞在水浴中解冻一段时间纠正#1:原代细胞对解冻过程非

原代细胞培养的技巧,看完这篇都懂了!

原代细胞培养的应用1、为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段;2、为传代培养创造条件;3、服务于临床实践,用于药物筛选等。原代细胞培养之分离注意事项1、组织块培养法1)组织块接种后的前3天,在观察和移动的过程中,注意不要引起液体的振荡。要避免经常翻动和振动,否则组织块不易附着于瓶壁上或附着

关于细胞培养的培养过程介绍

  将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养,则直接将组织块接入培养器皿底部,几个小时后组织块可贴牢在底部,再加入培养基。如系细胞培养,一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数,按要求以一定的量(以每毫升细胞数表示)接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后,立即放入培养

组织源性原代细胞培养实验室组建的基本要求

一、实验室设计1、细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。2、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。3、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,为

常规细胞培养方法(原代培养和传代培养)

原理将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。仪器、材料及试剂仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术器械、血

原代培养的常用方法和过程

细胞培养是生物学和医学研究最常用的手段之一,可分为原代培养和传代培养两种。原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养,也称初代培养。严格地说即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段,但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。一般持续1一4周。此期细胞呈活跃的移动,可见

原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化

 原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化  PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化  原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。  在体外培养原代细胞时,为了保

原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化

PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。在体外培养原代细胞时,为了保证实验结果的可靠性、一致性、稳定性、和可重复性,要求采用

原代培养的基本分类

最常用的原代培养有组织块培养和分散细胞培养。组织块培养是将剪碎的组织块直接移植在培养瓶壁上,加入培养基后进行培养。分散细胞培养则是将组织块用机械法或化学法使细胞分散。如欲从胎儿或新生儿的组织分离到活性最好的游离细胞,经典的方法是用蛋白水解酶(如胰蛋白酶和胶原酶)消化细胞间的结合物,或用金属离子螯合剂

正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养

实验材料: 1.人胎盘; 2.A/GA:含抗生素的A(庆大霉素,50μg/ml;两性霉素B,1.25μg/ml;链霉素100μg/ml;青霉素100U/ml); 3.丙三醇; 4.含50%丙三醇的DMEM; 5.胰蛋白酶/EDTA; 6.Millicell微孔膜组织培养插片;

正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养

PriCells: 正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养实验材料:1. 人胎盘;2. PBSA/GASP:含抗生素的PBSA(庆大霉素,50μg/ml;两性霉素B,1.25μg/ml;链霉素100μg/ml;青霉素100U/ml);3. 丙三醇;4. 含50%丙三醇的DMEM;5. 胰蛋白酶/EDT