正常小鼠原代骨骼肌细胞培养

PriCells –正常小鼠原代骨骼肌细胞培养 一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液: 0.4% Trypan Blue5、消化液: PriCells Isolation of Primary Cell Kit6、检测试剂:鼠抗人及大鼠desmin一抗,肌球蛋白(myosin)单克隆抗体 二、实验器械1、培养皿2、培养瓶3、直剪和眼科剪4、眼科镊和止血钳5、烧杯6、15ml离心管 三、实验流程取肌肉于平皿,Hank’s洗3次↓剔除脂肪、结缔组织↓肌肉标本剪约0.1cm3小块↓移至离心管,Hank’s洗3次↓静置1min,弃去上层液及漂浮组织↓......阅读全文

正常小鼠原代骨骼肌细胞培养

PriCells –正常小鼠原代骨骼肌细胞培养 一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS

正常小鼠原代脑星形胶质细胞培养

一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液

原代细胞培养小鼠胚胎分离实验

原代细胞培养可应用于:(1)分子生物学;(2)细胞生物学;(3)遗传学;(4)免疫学;(5)肿瘤学;(6)病毒学等领域。实验方法原理原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物体内取出所需的组织(或器官),经胰酶消化,

原代细胞培养小鼠胚胎分离实验

鼠胚原代细胞培养             实验方法原理 原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物

原代细胞培养小鼠胚胎分离实验

鼠胚原代细胞培养             实验方法原理 原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物

组织源性正常小鼠原代真皮纤维原细胞培养实验方法

一、实验试剂1、培养基: Primary Cell Medium + 10% FBS + 1% P/S + Primary Cell Supplement2、冻存液: Primary Cell Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+

小鼠神经元原代细胞培养步骤

  小鼠大脑皮层神经元原代培养步骤:  1、 于无菌条件下切取鼠头并以75%酒精浸泡1min,解剖出完整鼠脑;  2、 预冷解剖液中分离去除软膜、血管、取大脑皮质漂洗,用眼科剪将皮质反复剪切成碎块;  3、 移入培养皿中,吸除解剖液加入0.25%胰蛋白酶2m1,37℃培养箱中消化30min;  4、

正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养

PriCells: 正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养实验材料:1. 人胎盘;2. PBSA/GASP:含抗生素的PBSA(庆大霉素,50μg/ml;两性霉素B,1.25μg/ml;链霉素100μg/ml;青霉素100U/ml);3. 丙三醇;4. 含50%丙三醇的DMEM;5. 胰蛋白酶/EDT

正常人羊膜细胞(HAM)原代细胞培养

实验材料: 1.人胎盘; 2.A/GA:含抗生素的A(庆大霉素,50μg/ml;两性霉素B,1.25μg/ml;链霉素100μg/ml;青霉素100U/ml); 3.丙三醇; 4.含50%丙三醇的DMEM; 5.胰蛋白酶/EDTA; 6.Millicell微孔膜组织培养插片;

正常人脐静脉原代内皮细胞培养

PriCells -  正常人脐静脉原代内皮细胞培养一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × P

骨骼肌细胞培养

  1.杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5厘米小块。  2.用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加10%小牛血清培养,为促进分化可加1%的胎汁。  3.细胞接种量为2×106/皿,接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化。明胶制备比较简单,

正常大鼠原代主动脉平滑肌细胞培养

一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液

原代细胞培养简介

  原代细胞(primary culture cell)是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的

骨骼肌细胞培养和肌细胞培养

骨骼肌细胞培养 1.杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5厘米小块。 2.用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加10%小牛血清培养,为促进分化可加1%的胎汁。 3.细胞接种量为2×106/皿,接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化

原代细胞培养之取材

  取材作为原代细胞培养过程中的第一部至关重要,以下几种取材技术,你都用过哪些方法呢?  各类组织取材,操作及注意事项:  1.皮肤和粘膜  主要取皮片,面积一般2~4平方厘米。  2.内脏和实体瘤  1)无菌环境;  2)熟悉所需组织的类型和部位;  3)要避开破溃、坏死液化部分,以防污染,尽量去

原代细胞培养的应用

  1、为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段;  2、为传代培养创造条件;  3、服务于临床实践,用于药物筛选等。

原代细胞培养技术分类

一、组织块直接培养法1、取材,用Hank's液洗涤三次,并剔除脂肪,结缔组织,血液等杂物。2、用手术剪将组织剪切成1mm3左右的小块,再用Hank's液洗三次。3、将组织块转移至培养瓶,并贴附于瓶底面。4、轻轻将培养瓶翻转,瓶底朝上,向瓶内注入适量的培养液,将培养瓶放置在37℃恒温箱

小鼠肝细胞原代培养

实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 DMEM无血清DMEM培养基胰酶PBS仪器、耗材 饭盒纱布剪子镊子烧杯平皿研磨玻片滤网离心管6孔培养板吸管移液管手套微量加样器实验

组织源性正常大鼠原代心肌细胞培养实验方法

一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1×PBS(pH 7.4)+ 1% P/S4、染色液: 0.4

原代细胞培养方法有哪些

你主要要原代培养那种细胞,不同的细胞方法肯定不同。如一般悬浮细胞,如血液细胞,就分离后,直接培养。培养组织中的细胞,就需要消化过后,进行培养。也有用组织块培养的

原代细胞培养优点与用途?

  一、优点  (1) 细胞刚离开机体,生物学性状与原体内细胞比较接近,相比之下,细胞系的一个缺点是它们往往与原始的组织有不一样的遗传和表型,而原代细胞保持了细胞在体内的许多重要标志和功能。  (2) 细胞的初代培养也是建立各种细胞株(系)的必经阶段。  二、原代细胞培养的临床应用:  (1) 细胞

原代细胞培养之——取材技术

细胞的来源多样,培养方法也各不相同,凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。原代细胞经分散接种之手段称为传代。凡能经传代方式进行再次培养的细胞称为传代细胞。若能稳定生长传至10~20代以上的细胞可确立为细胞系。若有条件能开展单细胞克隆、纯化,经大量扩增

原代细胞培养之——培养技术

原代细胞的培养也叫初代培养 是从供体取得组织细胞在体外进行的首次培养,是建立细胞系的第一步,是一项基本技术。原代细胞因刚从组织中分离开,生物学特性未发生很大变化,仍保留原来的遗传特性,也最接近和反映体内生长特性,适宜用于药物敏感性试验、细胞分化等实验研究。 原代细胞往往有多种细胞组成,比较混杂,即使

小鼠肝细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。 

小鼠肝细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。 

小鼠肝细胞原代培养实验

小鼠肝细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法胰酶消化法实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEM 无血清DMEM

小鼠腹腔巨噬细胞原代培养

实验方法原理 巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。 巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P331、S774A.1、RAW309

肌组织细胞培养实验——骨骼肌细胞培养实验

实验材料肌组织试剂、试剂盒Hanks胰蛋白酶血清胎汁仪器、耗材纱布实验步骤动物胚或幼体的大腿肌组织为最好的培养材料。取材常用生后1~2 天的乳鼠(Wistar 大鼠更好)。1.  杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5 厘米小块;2.  用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25 %胰蛋白酶消

正常小梁细胞原代培养

实验材料:1.    材料来源:人眼、兔眼或者猪眼等;2.    清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2;3.    器械:小梁剪与无齿镊等;4.    消毒液:200IU/ml的庆大霉素生理盐水;5.    培养液:基础液由DME

细胞培养原代培养的原理

将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。细胞培养是生物学和医学研究最常用的手段之一,可分为原代培养和传代培养两种。原代培养是直接从生物体获取细胞进行培养。由于