多重PCR在遗传病诊断方面的应用抗性基因检测
抗生素的广泛使用导致具有耐药性微生物的增多,比如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌( methi-cillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)、万古霉素抗性肠球菌( vancomycin resistant enterococcl)和多重耐药结核分枝杆菌( multidrug resistant Mycobacterium tuberculosis)等。这些病原的快速检测及对应的抗生素抗性快速检测对于隔离病人和阻止疾病的进一步蔓延是很重要的。多重PCR方法能够对这些抗生素抗性基因进行同时检测,节省时间,具有较高的敏感性和特异性。 Strohmenger等应用多重PCR方法同时检测金黄色葡萄球菌的9种耐药基因,包括mecA、aacA~anhD、tetK、tetM、emA、emC、wtA、wtB和wC,并且在反应中加入另外对引物,扩增金黄色葡......阅读全文
PCR对于癌变基因的诊断应用
癌基因的表达增加和突变,在许多肿瘤早期和良性的阶段就可出现。PCR技术不但能有效的检测基因的突变,而且能准确检测癌基因的表达量,可据此进行肿瘤早期诊断、分型、分期和预后判断。几乎所有慢性骨髓性白血病患者都可检测到原癌基因易位导致的BCR/ABL融合基因形成,定量PCR技术可通过检测BCR/ABL融合
应用多重PCR方法鉴定RHD基因型的研究(2)
2结果 2.1多重PCR方法的反应结果应用多重PCR方法可以鉴定不同的RHD基因型(图2)。根据扩增条带判断结果,D/d型:目标条带为3条,分别为208bp、263bp和1920bp;d/d型:目标条带为2条,分别为208bp和1920bp;D/D型:目标条带为2条,分别为208bp和263b
多重PCR(Multiplex-PCR)
一般PCR仅应用一对引物,通过PCR扩增产生一个核酸片段,主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR),又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应,其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同. 多
多重PCR(Multiplex-PCR)
一般PCR仅应用一对引物,通过PCR扩增产生一个核酸片段,主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR),又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应,其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同. 多
数字PCR在临床和预后融合基因检测的应用
众所周知,融合基因检测对临床诊断及预后指导都具有十分重要的意义。那么究竟什么是融合基因呢?融合基因的发现始于上个世纪60年代,它是指染色体断裂后又重新拼接。如果恰巧拼接时发生了错误,使两个不同基因互相融合,大多数情况下,它会造成某些序列或功能异常的蛋白表达,亦或者是某些基因表达失调,从而促进肿瘤的发
遗传病的基因诊断选择
一、直接诊断和间接诊断 基因诊断可分为两类:一类是直接检查致病基因本身的异常。它通常使用基因本身或紧邻的DNA序列作为探针,或通过PCR扩增产物,以探查基因无突变、缺失等异常及其性质,这称为直接基因诊断,它适用已知基因异常的疾病;另一类是基因间接诊断。当致病基因虽然已知但其异常尚属未知时,或致
荧光染料在核酸检测方面的应用
核酸荧光染料对细胞核染色后定量测量细胞所发出的荧光强度,就可以确定细胞核中DNA、RNA的含量,并可以对细胞周期和细胞的增殖状况进行分析。有多种荧光染料可以对细胞中的DNA或RNA染色,常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst 33342等,RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。
细胞检测技术在医学方面的应用
肿瘤学肿瘤诊断和分型:通过细胞形态、标志物表达等确定肿瘤的类型和来源。肿瘤治疗监测:评估治疗过程中肿瘤细胞的变化,如凋亡、耐药性等。心血管疾病研究血管内皮细胞功能检测:评估心血管疾病的风险和进展。心肌细胞损伤检测:诊断心肌梗死等疾病。神经科学神经细胞损伤和退行性疾病研究:检测神经细胞的死亡、变性等。
基因疗法在重塑脊髓性肌萎缩等遗传病治疗方面的新药
近日,诺华制药公司旗下AveXis宣布,美国食品和药物管理局(FDA)已批准Zolgensma(onasemnogene abeparvovecv-xioi)用于治疗2岁以下脊髓性肌萎缩症(SMA)患儿,患者存活运动神经元1 (SMN1)基因存在双等位基因突变。 Zolgensma旨在通过提供
多重PCR技术的应用一个反应中检测单个病原体多基因
多重PCR技术更多的时候用于单个病原体的检测,其中包括"内标+靶标基因"与"内标+多个靶标基因"的组合方法。试剂盒中添加内标,可使结果更加准确可靠,避免因试剂操作过程出现的假阴性。圣湘生物是"内标法"的国内率先应用者。 多家企业针对本次疫情开发的新型冠状病毒核酸检测试剂盒就属于"内标+多个靶标基因”
多重pcr和多重荧光定量pcr的区别
正常啊,定量PCR很灵敏的,体系稍微变化就会误差很大,更何况你这样反应体系都不一样。所以一般定量结果只是作为佐证,最好别太相信。你想做好,就尽量保证每个体系是一致的,最后结果趋势是一致的就行了。
利用PCR技术诊断遗传病的途径和方法
(一)PCR技术直接诊断遗传病 对于由基因缺失突变引起的遗传病可利用缺失区域还侧的DNA序列引物直接扩增 该区域,看有无特异性的扩增产物,这对缺失部位固定的片段检测非常准确简便,只 需一对引物即可完成,而对于哪些缺失部位异质的基因则可利用多对引物进行多重 PCR,然后检查缺失带.对基因的重排来说,可
PCR技术应用一:诊断单基因疾病
自1987年秋以来,PCR技术的应用开创性地推动了产前单基因缺陷者及携带者的 诊断。目前PCR还不能用于诊断所有已知缺陷疾病,但极大地扩大了实验诊断学家对 诊断方法的选择。JohnHopkins大学的研究人员表明,在诊断基因缺陷疾病方面PCR技 术具有快速、准确、操作灵活等特点。每项进展的实例
PCR技术应用八:DMS/BMD基因诊断
DMD(Duchenne Muscular Dystrophy)和BMD(Becker Muscular Dystrophy)是一种常见的X连锁隐性遗传病,主要发生于男性,其发病率为1/3500活产男婴,其发生的原因是Dystrophin(抗肌萎缩蛋)其固缺陷所致.一、DMD/BMD的临床表现
浅析流式荧光技术在白血病融合基因检测方面的应用
白血病是严重威胁人类健康的恶性疾病,既往的细胞形态学分型诊断符合率及正确率受检测者主观成分影响较大,近两年白血病分子特征的研究取得了明显进展,尤其是对染色体易位形成的融合基因,有一些已作为诊断不同类型白血病的分子生物学特异性标志和确定诊断的唯一依据。基于此,在流式荧光技术基础上推出的白血病融合基因检
数字PCR在转基因食品或成分检测中的应用
目前在确定转基因作物或成分的含量时采取定量PCR的标准曲线法,这种方法需要依赖于已知浓度的标准品(Certified Reference Materials Calibrants, CRMCs)。ddPCR绝对定量的方式可以彻底解决这些标准物质的定标工作,从而确保安全和品质。
RTPCR在基因表达(gene-expression)检测中的应用
基因表达的检测有几种方法。经典的方法(仍然重要)是根据在细胞或生物体中 所观察到的生物化学或表型的变化来决定某一特定基因是否表达。随着大分子分离技 术的进步使得特异的基因产物或蛋白分子的识别和分离成为可能。随着重组DNA技术 的运用,现在有可能检测.分析任何基因的转录产物。目前有好几种方
遗传病与肿瘤的基因诊断
从DNA水平上寻找确诊遗传病的指标或探讨遗传病和肿瘤的病因等方面,已取得很大成绩,这对产前诊断,早期确诊和突变基因携带者的检出等都有重要意义。所用的方法大体有以下几种。 一、分离基因进行结构分析 利用DNA离体转化,制备探针,制备基因文库进行筛检,最后鉴定载体中插入DNA片段的特性等一系列技术,
遗传病与肿瘤的基因诊断
从DNA水平上寻找确诊遗传病的指标或探讨遗传病和肿瘤的病因等方面,已取得很大成绩,对产前诊断,早期确诊和突变基因携带者的检出等都有重要意义。所用的方法大体有以下几种。 一、分离基因进行结构分析 利用DNA离体转化,制备探针,制备基因文库进行筛检,最后鉴定载体中插入DNA片段的特性等一系
酶标仪在禽病类检测方面的应用
禽流感H5N1抗体ELISA诊断试剂盒用于检测鸡血清中的禽流感病毒抗体。评估鸡场禽流感疫苗免疫状况等。
2014(第二届)分子诊断产业高峰论坛于8月1415日在天津召开
由易贸医药主办、上海市医疗器械行业协会体外诊断专业委员会支持的2014( 第二届) 分子诊断产业高峰论坛将于8月14-15日在天津召开。本届会议将在去年会议的基础上,就《医疗器械新条例》解读、技术平台的开发与应用、个体化医疗等热点话题,进行深度交流与思想碰撞。 我们将邀
PCR技术应用三:突变基因检测
基因突变(gene mutation)是遗传病和肿瘤发生的根本原因,检测与遗传病及恶 性肿瘤发生有关的突变基因(mutant gene)是分子生物学,医学遗传学及肿瘤学研究 的热点,它对阐明遗传病和肿瘤发生的分子生物学基础及其诊断和早期诊断具有重要 \意义,分子生物学技术的发展,尤其是PCR技
PCR技术应用三:突变基因检测
基因突变(gene mutation)是遗传病和肿瘤发生的根本原因,检测与遗传病及恶 性肿瘤发生有关的突变基因(mutant gene)是分子生物学,医学遗传学及肿瘤学研究 的热点,它对阐明遗传病和肿瘤发生的分子生物学基础及其诊断和早期诊断具有重要 \意义,分子生物学技术的发展,尤其是PCR技术
核酸纯化仪在基因组学、CDC和分子诊断方面的应用
基因组学 天隆 NP968磁珠提取纯化系统,非常适合于基因组学的研究。无论提取样本的来源是微生物、动物、植物或是病毒,结合特别针对TIANLONG NP968磁珠提取纯化系统优化的TIANLONG全血基因组DNA提取试剂盒、白细胞层全血基因组提取试剂盒、动物组织/细胞基因组DNA提取试剂盒,可
多重荧光定量pcr最多检测多少种
这个看你自己的设置。qPCR仪一般是96孔板,最多有5个通道。理论上,你用一个通道作为内标,2个孔分别做阴阳性对照。那么可以做94*4=376个。当然这只是理论上的最大值,实际操作的时候受很多限制,如多重PCR之间的交叉反应导致无法合孔,样本量不足等。具体到肿瘤相关的突变检测试剂盒,目前拿到CFDA
基因检测在肿瘤诊断中的应用实例有哪些?
基因检测在肿瘤诊断中的一些应用实例:非小细胞肺癌(NSCLC):约 50%的亚洲 NSCLC 患者存在表皮生长因子受体(EGFR)基因突变。通过基因检测确定患者是否具有 EGFR 突变,对于使用 EGFR 酪氨酸激酶抑制剂(如吉非替尼、厄洛替尼)等靶向药物治疗具有重要指导意义。乳腺癌:检测人表皮生长
PCR技术应用六:血友病A基因诊断
血友病A是常见的遗传性凝血障碍,它是由凝血因子Ⅷ的基因缺陷而致其功能异 常的致其发病率改为1/1000男性,女性患者极为少见.在临床上,血友病大都有家族 史,亦有约20~30%的患者为散发病例,为新生基因突变所致.一、血友病的遗传学 本病为X连锁隐性遗传病,其基因定痊于Xq28.因子Ⅷ(FVⅢ
测土仪在土壤养分检测方面的应用
测土仪,也被叫做土壤养分检测仪,是对土壤中有关养分进行检测分析,能够快速检测出土壤、肥料、植株中的速效氮、速效磷、有效钾、全氮、全磷、全钾、有机质、土壤酸碱度及土壤含盐量,空气温湿度露点,光合有效辐射等。该仪器除了具有存储,打印功能外,还内存了80多种农作物生长发育所需养分量配方施肥软件系统,1
检测仪器在石油化工方面的应用
化行业又称石油化学工业,指化学工业中以石油为原料生产化学品的领域,广义上也包括天然气化工。是一个新兴工业,是20世纪20年代随石油炼制工业的发展而形成,于第二次世界大战期间成长起来的,由石油生产出一系列中间体、塑料、合成纤维、合成橡胶、合成洗涤剂、溶剂、涂料、农药、染料、医药等与国计民生密切相关的重
皮肤干细胞在基因治疗方面的应用介绍
干细胞除应用于外伤性皮肤缺损以及皮肤溃疡等导致的严重皮肤缺损的移植治疗外,还可以用来研究基因的作用以及某些疾病发病的基因机制,同时也可以用来对一些遗传性皮肤病进行基因治疗,包括导入标志性基因或一个异源基因,使细胞内原有基因过度表达(增加功能),或基因打靶(失去功能)以及诱导某个基因的突变等。由于