多重PCR在遗传病诊断方面的应用抗性基因检测

抗生素的广泛使用导致具有耐药性微生物的增多,比如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌( methi-cillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)、万古霉素抗性肠球菌( vancomycin resistant enterococcl)和多重耐药结核分枝杆菌( multidrug resistant Mycobacterium tuberculosis)等。这些病原的快速检测及对应的抗生素抗性快速检测对于隔离病人和阻止疾病的进一步蔓延是很重要的。多重PCR方法能够对这些抗生素抗性基因进行同时检测,节省时间,具有较高的敏感性和特异性。 Strohmenger等应用多重PCR方法同时检测金黄色葡萄球菌的9种耐药基因,包括mecA、aacA~anhD、tetK、tetM、emA、emC、wtA、wtB和wC,并且在反应中加入另外对引物,扩增金黄色葡......阅读全文

多重PCR在遗传病诊断方面的应用抗性基因检测

抗生素的广泛使用导致具有耐药性微生物的增多,比如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(  methi-cillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)、万古霉素抗性肠球菌(  vancomycin resistant enterococcl)和多重耐药结核分枝杆菌( mu

多重PCR在遗传病诊断方面的应用基因重排

免疫球蛋白(  immunoglobulin,Ig)和T细胞受体( T cell  receptor,TCR)位点包含很多不同的V、D、J基因片段,参与早期白细胞分化的重排过程。VDJ片段重排由重组酶复合体介导,其中RAG1和RAG2蛋白通过识别、切割DNA重组信号序列(  recombinatio

多重PCR在遗传病诊断方面的应用用于遗传病的检测

  用于其它遗传病的检测  Pici等人对囊性纤维化( cystic fibrosis,CF)基因突变进行了筛选研究,用4对外显子引物进行多重PCR扩增,然后用限制性内切酶消化PCR产物,再进行垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳,检查15例发现有3例发生了基因突变。Pior等设计了8对引物同时检测DMD/BMD

多重PCR在遗传病诊断方面的应用DMD和BMD的检测

Duchenne型肌营养不良症( Duchenne muscular dystrophy,DMI)是一种很常见的人类遗传病,为X性染色体隐性遗传性肌肉变性疾病,50%的病例由基因缺失引起,大约每3500个男婴就有一个发病,1/3的病例由新的突变所致,肌营养不良基因长200kb,至少有70个外显子,被

多重PCR在遗传病诊断方面的应用遗传修饰生物中的应用

在遗传修饰生物( genetically modified organisms,GMO)中的应用近年来可见应用多重PCR技术在转基因成分定性和定量检测的报道。陈文炳等用多重PCR方法在反应体系中加入13对引物同时检测转基因矮牵牛与阳性对照质粒中的1~3个外源基因,包括花榔菜花叶病毒(  caulif

多重PCR在遗传病诊断方面的应用着床前胚胎遗传学诊断

  着床前胚胎遗传学诊断( preimplantation genetic diagnosis,PGD)  PGD产生于10多年前,主要目的是识别基因突变或染色体错误引起的遗传性疾病。临床上最早是用来检测夫妻X隐形连锁疾病,随后应用于不同的患者来达到优生优育的目的,主要包括:单基因病携带者,无论显性

PCR技术应用四:遗传病诊断

 自从1985年PCR技术首次应用于遗传病基因诊断以来,已有近百种遗传病可用PCR 技术进行诊断和产前诊断,利用PCR技术诊断遗传病的途径有五个,①基因突变位点 的直接检出②筛查与遗传病③④有关的点突变③遗传多态性标记连锁分析间接诊断④ 利用cmRNA逆转录为cDNA进行分析或直接分析cmRNA. 

PCR技术遗传病诊断上的应用

自从1985年PCR技术首次应用于遗传病基因诊断以来,已有近百种遗传病可用PCR 技术进行诊断和产前诊断,利用 PCR技术诊断遗传病的途径有五个,①基因突变位点 的直接检出②筛查与遗传病③有关的点突变④遗传多态性标记连锁分析间接诊断⑤ 利用cmRNA逆转录为cDNA进行分析或直接分析cmRN

PCR技术应用于遗传病的诊断

PCR技术首次临床应用就是从检测镰状细胞和β-地中海贫血的基因突变开始的。基因的突变和缺失均会引起各种珠蛋白的表达不平衡,用FQ-PCR检测各种珠蛋白基因表达差异,是地中海贫血诊断的有效手段。

细胞检测技术在疾病诊断方面的应用

感染性疾病:检测病原体感染的细胞,如细菌、病毒、寄生虫等在细胞内的存在和增殖情况。自身免疫性疾病:分析免疫细胞的异常激活和自身抗体的产生。遗传疾病:通过细胞染色体分析诊断染色体异常导致的疾病,如唐氏综合征。

多重PCR核酸检测

2020年3月11日,世卫组织总干事谭德赛在日内瓦召开的新闻发布会上宣布,新冠肺炎(COVID-19)疫情已经构成全球性大流行(pandemic)。截止到目前,中国的疫情在国内联防联控机制下已基本得到控制,而国外的情况却不容乐观。新冠肺炎疫情爆发于呼吸道疾病高发的季节,有各类呼吸道病原体单一感染或合

多重PCR基因芯片检测新研究

  来自中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病诊断室的研究人员建立并初步评价了一种针对重要肠道病原菌的多重PCR基因芯片检测方法,这一方法具有较高的特异性,并且混合PCR可以分别按照种属内和种属间的引物组合方案用于多病原的筛检。   感染性腹泻在我国发病率居各类传染病之首,长期以来严重危害人民

多重PCR基因芯片检测新研究

来自疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病诊断室的研究人员建立并初步评价了一种针对重要肠道病原菌的多重PCR基因芯片方法,这一方法具有较高的特异性,并且混合PCR可以分别按照种属内和种属间的引物组合方案用于多病原的筛检。 感染性腹泻在我国发病率居各类传染病之首,长期以来严重危害人民健康。其中绝大

PCR技术在突变基因检测中的应用

基因突变(gene mutation)是遗传病和肿瘤发生的根本原因,检测与遗传病及恶 性肿瘤发生有关的突变基因(mutant gene)是分子生物学,医学遗传学及肿瘤学研究 的热点,它对阐明遗传病和肿瘤发生的分子生物学基础及其诊断和早期诊断具有重要 \意义,分子生物学技术的发展,尤其是PCR技术的出

多重PCR法检测STEC

产志贺毒素大肠杆菌(STEC)具有很强的致病性,全球范围内由其引发的食物中毒和其他公共卫生事件呈逐年升高之势,严重威胁人类的健康。开发快速可靠的检测手段对其引发的食源性疾病的监测、控制和预防意义重大。本文结合对STEC分子生物学特征的研究,着重介绍了多重PCR检测技术在检测食品中STEC方面的

PCR技术直接诊断遗传病

自从1985年PCR技术首次应用于遗传病基因诊断以来,已有近百种遗传病可用PCR 技术进行诊断和产前诊断,利用PCR技术诊断遗传病的途径有五个,①基因突变位点 的直接检出②筛查与遗传病③④有关的点突变③遗传多态性标记连锁分析间接诊断④ 利用cmRNA逆转录为cDNA进行分析或直接分析cmRN

酶在疾病诊断方面的应用

随着对酶的深入研究和越来越多的认识,富含高浓SOD的复合酶,对疾病的调理上发挥了越来越显著的作用。正常人体内酶活性较稳定,当人体某些器官和组织受损或发生疾病后,某些酶被释放入血、尿或体液内。如急性胰腺炎时,血清和尿中淀粉酶活性显著升高;肝炎和其它原因肝脏受损,肝细胞坏死或通透性增强,大量转氨酶释放入

应用多重PCR方法鉴定RHD基因型的研究

作者:徐华1,叶世辉1,王宝燕2,刘孟黎1,吴大洲1,贺晨1     作者单位:(1. 陕西省血液中心血型研究室,陕西西安710061;2. 西安交通大学医学院第一附属医院输血科,陕西西安710061)  【摘要】  目的建立一种可靠的PCR方法,用于RHD血型基因型的研究。方法根据RHD血型基因的

遗传病的基因诊断

根据出生缺陷监测和残疾儿调查结果显示,我国是出生缺陷高发国家,每年有近100万出生缺陷儿发生,30%在出生前后死亡,40%造成终生残疾,只有30%可以治愈或纠正。在这些出生缺陷儿中,80%是由于遗传因素造成的。如果能对这些患儿进行症状前诊断或产前诊断,给予及时而适当的治疗和预防,其经济和社会效益是不

数字PCR在-药物基因组检测的应用

  能够通过PCR技术实现药物基因组的检测,提高合理用药水平,具有通量较高,操作简单,仪器设备易普及等优点。    数字PCR冷知识:胎儿性别不是只有B超可以看出来,一只精通数字PCR的科研狗,也可以测出来。

PCR技术的应用医学应用遗传病和传染病的诊断

1、遗传病的基因诊断到目前为止已发现4000多种遗传病。以地中海贫血为例,其主要病因是由于基因的缺失,单个或少数核苷酸的缺失、插入或置换而造成基因的不表达或表达水平低下,或导致 RNA 加工、成熟和翻译异常或无功能mRNA,或合成不稳定的珠蛋白。用 PCR 进行诊断,由于其成本低、快速和对样品质量和

抗性基因的应用介绍

抗性基因是选择基因的一种,所以属于标记基因。基因工程中用于选择的抗性基因一般在载体上。以四环素抗性插入失活为例,如果在Tetr上插入外源DNA,导致四环素抗性基因失活,可用四环素加环丝氨酸平板培养基选择重组克隆。因为Tetr失活的菌生长被四环素抑制,不被环丝氨酸杀死,保留下来,Tetr不失活的菌抗四

什么是多重PCR核酸检测

 一般的PCR反应仅应用一对引物,通过PCR扩增对单个基因序列进行复制,主要用于单一靶标的检测。多重PCR (Multiplex PCR),是在同一PCR反应体系里加上两对或以上的引物,同时进行多个基因的扩增检测。    多重PCR反应最常见的类型是双重反应。在一定情况下,为了能够同时检测多个靶标基

多重分子检测技术特点及其在病原体诊断中的应用

近年来分子检测在病原学诊断上的发展非常迅速,特别是对病毒和非典型病原体的检出效率和准确性大幅提升,成为临床和实验室共同关注的热点。此次新冠疫情后,无论临床还是实验室都意识到分子检测在病原学诊断中具有不可或缺的地位。感染性疾病是大家关注的公共卫生问题。在2016年世界卫生组织公布的数据,全球5690万

运用多重-PCR-检测营养不良基因缺失实验

            实验材料 反应混合物A、B 和 C 试剂、试剂盒 Taq DNA 聚合酶 DNA 模板 石蜡油

运用多重-PCR-检测营养不良基因缺失实验

本单元所讲的是用来诊断营养不良基因缺失的一种多重 PCR 方法。许多缺失末端能被确定,依据翻译可读框的结果来预测疾病(如 DMD 与 BMD) 的严重程度。实验材料反应混合物A、B 和 C试剂、试剂盒Taq DNA 聚合酶DNA 模板石蜡油溴化乙锭的微型琼脂糖胶电泳缓冲液10 X 胶用载样缓冲液仪器

超多重PCR技术及其在临床病原微生物检测的应用(一)

一超多重PCR技术简介1.1 PCR及多重PCR技术1.1.1 PCR技术聚合酶链式反应(PCR)是一种在体外是用已知寡核苷酸引物引导未知片段中微量待测基因片段进行扩增的技术。PCR反应体系主要包括待扩增样品模版、特异性引物、DNA聚合酶(polymerase)、扩增底物dNTPs以及含有Mg2+的

超多重PCR技术及其在临床病原微生物检测的应用(二)

1.3 靶向-NGS(tNGS)技术的应用超多重PCR兼具PCR对于特定微量DNA模板的特异性扩增性能以及多个片段同步扩增的能力,配合NGS测序,会拥有比普通宏基因组,全外显子组测序更为灵敏的特定基因检出率,此外前期建库流程更加简便易行并具有相当大的成本优势。目前tNGS技术的应用范围至少包括遗传疾

超多重PCR技术及其在临床病原微生物检测的应用(三)

2.2.2 基于分子的病原体检测技术2.2.2.1蛋白检测目前针对病原体蛋白的直接检测使用质谱技术,基于已建立的微生物胞膜蛋白质、脂多糖、核酸等的数据库对微生物进行精准鉴定和分析。质谱方法针对培养后浓度较高、品种较为单一的待测样品,通过获得其蛋白质图谱,再与已知微生物构建的数据库的参考图谱进行比对,

多重PCR技术在多种病原体检测应用中具有三大特点:

①高效性:同一PCR反应管中可同时检测多个病原体基②系统性:对引起相同或类似症状疾病的不同病原微生物或具有相同感染途径的多种病原体等进行检测或鉴别。例如引起呼吸道疾病的病原体;通过血液传播的感染性病原体;导致脑炎脑膜炎症候群相关病原体等,都可使用多重PCR技术进行组合检测与鉴别。③经济性:相较于多个