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数字PCR在临床和预后融合基因检测的应用

众所周知,融合基因检测对临床诊断及预后指导都具有十分重要的意义。那么究竟什么是融合基因呢?融合基因的发现始于上个世纪60年代,它是指染色体断裂后又重新拼接。如果恰巧拼接时发生了错误,使两个不同基因互相融合,大多数情况下,它会造成某些序列或功能异常的蛋白表达,亦或者是某些基因表达失调,从而促进肿瘤的发生。传统的数字PCR检测融合基因的方法主要有显微观察,原位杂交等;新一点的方法有高通量测序等,但多因为发生基因融合原因的多样性,融合基因的表达量较低等因素而达不到精确的测定。目前,新的定量技术-数字PCR方法的发展使得精确检测融合基因变成了可能。如一篇文章中报道所示毛细胞星形细胞瘤(Pilocytic astrocytomas)是年轻患者中最常见的神经胶质瘤亚型,占所有神经胶质瘤的5.4%。KIAA1549基因和BRAF基因融合是毛细胞星形细胞瘤的标志,能够精确检测到二者的融合对于诊断至关重要。此外,由于KIAA1549-BRAF融合......阅读全文

数字PCR市场年增长近12% 国内企业数已反超进口

数字PCR作为第三代PCR技术,它是将分子生物学与现代微机电、微纳制造等工程技术相结合的典范。数字PCR以聚合酶链式反应的理论和技术体系为基础,结合现代微机电和光学检测技术,实现单分子水平的核酸精确定量检测。数字PCR的核心思想是将核酸样品平行划分为大规模单分子水平的微反应单元,然后对众

转基因植物产品数字PCR检测方法

转基因植物产品数字PCR检测方法 前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC 387)提出并归口 。本标准主要起草单位 : 中国检验检疫科学研究院、广西出入境检验检疫局检验检疫技术中心 、中国农业大学 、中国农业科学院油菜作物

转基因植物产品数字PCR检测方法

转基因植物产品数字PCR检测方法 前言       本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。       本标准由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC 387)提出并归口 。  &n

转基因植物产品数字PCR检测方法

前言       本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。       本标准由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC 387)提出并归口 。       本标准主

数字PCR技术的发展与应用简介

数字PCR技术的原理数字PCR(Digital PCR-dPCR)技术是一种新的核酸检测和定量方法,与传统定量PCR(qPCR)技术不同,数字PCR采用绝对定量的方式,不依赖于标准曲线和参照样本,直接检测目标序列的拷贝数。由于这种检测方式具有比传统qPCR更加出色的灵敏度和特异性、精确性,dPCR迅

多重数字PCR技术介绍

什么是数字PCR?数字PCR是一种新的绝对定量PCR,通过对PCR反应物进行有限稀释,随后在不同的反应腔室里进行PCR扩增,最后根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例得出靶分子的起始拷贝数或浓度的技术。什么是多重PCR?多重PCR又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上两对以上

dPCR推动精准医疗迅速发展

  数字PCR简介  数字PCR(Digtal PCR)是一种核酸定量精密检测的新兴技术手段,于20世纪由Vogelstein等提出。它是将稀释后的核酸模板分配到大量不同的反应单元中,使每个反应单元中有一个或没有核酸。利用PCR扩增的同时,加入可检测荧光。待扩增结束时,使用统计学方法采集每个反应单元

多重数字PCR技术介绍(一)

什么是数字PCR?数字PCR是一种新的绝对定量PCR,通过对PCR反应物进行有限稀释,随后在不同的反应腔室里进行PCR扩增,最后根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例得出靶分子的起始拷贝数或浓度的技术。什么是多重PCR?多重PCR又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上两对以上

数字PCR的前生今世

  近年来,数字PCR已取得了很大的进展,这在很大程度上要归因于商业化系统的开发,如QX200。这些技术进步似乎预示着一个转折点,更多的研究人员很快将能使用这种技术。这将推动新应用的开发,挖掘出数字PCR的全部潜能,并让科学家转向更强大的生物标志物研究,甚至单细胞分析。   2月底,Bi

NaicaTM crystal 微滴芯片式数字PCR系统

   导语:数字PCR技术是基于PCR技术发展起来的核酸检测和定量的最新技术,在众多应用中,在精准医疗方面的应用尤为突出。法国Stilla Technologies公司专注于开发新一代核酸绝对定量技术,其旗下品牌Naica TM Crystal全自动微滴芯片数字PCR仪系

数字PCR助力新型冠状病毒药物临床试验及治疗监测

  2019新型冠状病毒,即“2019-nCoV”,2020年1月12日被世界卫生组织命名。冠状病毒是一个大型病毒家族,其中SARS-CoV、MERS-CoV和2019-nCoV均属于β属冠状病毒。  截止最新的确诊病例信息显示,新型冠状病毒的传播能力比SARS更强,导致疫情传播速度较快,给疾病防控

数字PCR,LunaProbesTM和MAAB相结合可以检测到低于0.01%的...

数字PCR,LunaProbesTM和MAAB相结合可以检测到低于0.01%的等位基因的突变数字PCR,LunaProbesTM和MAAB相结合可以检测到低于0.01%的等位基因的突变Matt Poulson, Jason McKinneyIdaho Technology, Inc. Salt La

数字PCR的前世今生:特点、优势和局限性

数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR,数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。数字PCR是近年来迅速发展起来的一种定量分析技术。该技术结果判定不依赖于扩增曲线的循环阈值(Ct),不受扩增效率的影响,具有很好的准确度

领航基因获首张完全自主知识产权液滴数字PCR仪注册证

  2019年1月7日,浙江省药品监督管理局正式批准领航基因科技(杭州)有限公司的生物芯片阅读仪iScanner 5(浙械注准20192220007)上市。该产品是领航基因继2018年6月获批国内首款拥有完全独立自主知识产权的固态芯片式数字PCR仪iScanner24之后,推出的全新五色荧光液滴数字

西安交大最新综述:第三代PCR技术

  自1985年 Mullis 发明了体外多聚酶链反应(PCR)至今, PCR在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用.今天的第三代PCR技术, 即绝对定量的数字化 PCR也备受关注。来自西安交通大学生命科学与技术学院等处的研究人员近期发表综述,介绍了 PCR 技术的发展

Nacia数字PCR在基因表达分析中的应用

华盛顿大学医学院儿科和加利福尼亚大学圣地亚哥分校医学院儿科的研究人员建立了一个稳定可靠的基于RNA磁珠提取和数字PCR的方法,可从粪便样本中检测与EE(热带肠病)关联的人mRNA,灵敏度可达20拷贝GAPDH mRNA/200mg粪便样本。已有报道表明病人粪便中存在人mRNA,可作为反应病人消化道病

数字PCR技术的发展和原理

数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR,数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。在定量PCR时,我们常常纠结一个问题,究竟是相对定量还是绝对定量呢?如今,你无需纠结了,因为数字PCR(digital PCR)来了。尽

神通广大的数字PCR,到底有多厉害?

   什么是数字PCR?  提起PCR,在生物及其相关行业内可谓无人不知无人不晓,半个世纪以来分子诊断的高速发展离不开分子生物学技术特别是PCR技术日新月异的进步。1983年由美国Mullis首先提出设想,1985年发明了聚合酶链反应,即简易DNA扩增法,标志着PCR技术的真正诞生。1999 年,美

大脑无创性检测: 数字PCR技术诊断和追踪脑肿瘤

  脑肿瘤诊断往往涉及侵袭性神经外科手术,对于临床医生而言能够在不需要活体组织检测的条件下监视脑肿瘤是一个福音,这让他们能追踪和尽早治疗恶性脑肿瘤。   美国马萨诸塞州总医院(MGH)研究人员研发出基于数字PCR的、检测脑肿瘤相关IDH1突变体的分子诊断方法。该公司的Xandra B

第二代数字PCR——管内芯片式数字PCR仪特点及优势简介

管子里面有芯片?!第二代数字PCR?! 如果你熟悉数字PCR,你肯定知道微滴式、芯片式。在精准医疗风靡全球的时代主题下,我们对于检测精准度、灵敏度也越来越高。PCR作为分子生物学一个重要工具、主要手段,被赋予的使命也越来越多;研究者们对这个工具的要求也越来越高。数字PCR的问世,正是为了解决这些要求

如何鉴定转基因成分?

  转基因生物(Genetically Modified Organism,简称 GMO),是利用现代分子生物学技术改变基因组构成的生物,而非传统的选择育种,一般包括转基因植物、 动物和微生物。转基因食品就是利用上述的转基因生物(包括植物、动物和微生物)加工而成的食品或食品添加剂。目前最受关注的绝大

Analyst:数字PCR数据的准确、可靠、非监督自动分类新方法

  清华大学医学院生物医学工程系郭永实验室在《分析学家》(Analyst)在线以封底(back cover)发表题为《一种双荧光四分类微液滴数字PCR数据的准确、可靠和自动分类方法——密度分水岭算法》(A density-watershed algorithm (DWA) method for ro

Talanta:高灵敏和防污染的“准共聚焦”微液滴数字PCR阅读仪

  清华大学医学院生物医学工程系郭永实验室在《分析学家》(Analyst)在线以封底(back cover)发表题为《一种双荧光四分类微液滴数字PCR数据的准确、可靠和自动分类方法——密度分水岭算法》(A density-watershed algorithm (DWA) method for ro

Digital PCR 技术的发展与应用(二)

液滴数字PCR数字PCR源于乳液PCR(emulsion PCR)技术 ,利用微滴发生器可以一次生成数万乃至数百万个纳升甚至皮升级别的单个油包水微滴,作为数字PCR的样品分散载体,PCR反应结束后检测每个微滴的荧光信号。目前Bio-Rad公司的QX100系统、 QX200系统均为采用液滴技术

基于微流控的多重荧光数字PCR可用于乳腺癌的靶向治疗

数字PCR是一种用于基因检测的绝对定量方法,具有前所未有的准确度和精确度,正成为撬动精准医学发展的新支点。它是继实时定量PCR技术之后的第三代PCR基因检测技术,在液体活检、肿瘤伴随诊断、无创产前筛查、病原体载量监测等方面具有重要应用前景。遗憾的是,目前在数字PCR市场,主流产品还是被欧美跨国公司的

Digital PCR 技术的发展与应用(一)

dPCR发展历史1992年,Sykes等从非淋巴细胞和正常体细胞背景中鉴定突变的白血病细胞,检测了复杂背景下低丰度的IgH重链突变基因。该研究中提出了三个重要的原则:有限稀释、终点信号的有或无及对数据泊松分布的统计处理,为以后dPCR的发展奠定了基础。1997年,有研究利用玻璃毛细管作为载体进行PC

NACIA数字PCR引物探针设计——Gene-π课堂

NACIA数字PCR用引物与普通PCR引物设计要求不同:普通PCR的目的是获得目的基因,对非特异性反应和引物二聚体要求不严格;而数字PCR引物跟real-time PCR引物一样对非特异性反应和引物二聚体要求严格。NACIA数字PCR引物及探针设计的总体原则v 先选择好探针,然后设计引物使

解读《肿瘤个体化治疗检测技术指南》:9大检测技术

  肿瘤的个体化治疗基因检测已在临床广泛应用,实现肿瘤个体化用药基因检测标准化和规范化,是一项意义重大的紧迫任务。  为进一步提高肿瘤个体化用药基因检测技术的规范化水平,7月31日,国家卫生计生委个体化医学检测技术专家委员会,在广泛征求意见的基础上,制订了《肿瘤个体化治疗检测技术指南(试行)》。  

你想要知道的数字PCR应用及前景

 一. PCR的发展历史  PCR技术自问世以来,在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。第一代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。  随着生物分子荧光技术的发展,1992年实时荧光定量PCR(Quantitative

数字PCR应用及前景

 剖析|你想要知道的数字PCR应用及前景 一. PCR的发展历史 PCR技术自问世以来,在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。 随着生物分子荧光技术的发展,1992年实时荧光定量P