免活化的伯胺特异性交联试剂及其应用

蛋白质等生物分子的化学修饰是研究和调节其功能的重要手段,发展高效、方便且可靠的生物分子修饰方案则具有重要意义。赖氨酸作为被广泛用于蛋白质修饰研究的氨基酸之一,具有特征性的伯胺残基。作为经典的重要修饰方法,NHS活化酯应用范围较广,且取得极大的成功,但存在水解稳定性及化学选择性等方面的普遍性问题;一些新的修饰方法如金属催化 (Buchwald, Angew. Chem. Int. Ed., 2017, 56, 3177-3181) 也存在下游纯化和金属催化剂残留的问题。阿扎菲酮 (azaphilone) 是一类真菌聚酮类次生代谢产物,亿万年的自然界进化形成了独一无二的独特化学结构和化学反应特性。南京大学的姚祝军教授课题组早期针对天然产物chlorofusin的合成化学及反应机理研究的系列工作 (Wei, W.-G., Yao, Z.-J., J. Org. Chem., 2005, 70, 4585-4590; Qian, W......阅读全文

免活化的伯胺特异性交联试剂及其应用

  蛋白质等生物分子的化学修饰是研究和调节其功能的重要手段,发展高效、方便且可靠的生物分子修饰方案则具有重要意义。赖氨酸作为被广泛用于蛋白质修饰研究的氨基酸之一,具有特征性的伯胺残基。作为经典的重要修饰方法,NHS活化酯应用范围较广,且取得极大的成功,但存在水解稳定性及化学选择性等方面的普遍性问题;

NHS与胺反应的交联剂化学特性

NHS 酯反应化学NHS 酯是通过羧酸盐分子的碳二亚胺活化形成的反应基团(参阅碳二亚胺交联剂化学)。NHS 酯活化的交联剂和标记化合物在生理至弱碱性条件下(pH 7.2 至 9)与伯胺反应,形成稳定的酰胺键。反应释放出 N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)。化学偶联伯胺的 NHS 酯反应方案。R 代表具有

辣根过氧化物酶(HRP)标记试剂盒的应用

活化的过氧化物酶是辣根过氧化物酶(HRP),其天然碳水化合物(糖)已被高碘酸盐轻度氧化以产生胺反应性醛基。 活性过氧化物酶的这些羰基自发地、有效地与抗体或其它蛋白质上的伯胺交联。该方法比其它胺反应性化学试剂,如戊二醛偶联更有效,戊二醛偶联常常导致聚合反应和更高程度的偶联失活。 预活化的酶消除

概述交联聚乙烯的应用

  交联聚乙烯由于具有优异的性能,被用作火箭、导弹、电机、变压器等所需要的耐高压、高周波、耐热的绝缘材料和电线电缆包覆物.制造热收缩管、热收缩膜、各种耐热管材、泡沫塑料、耐腐蚀的化学设备衬里、部件及容器,制造阻燃建材等。目前用量最大的领域主要是电线电缆、管材和泡沫塑料等。

伯胺和醛缩合反应机理

伯胺和醛缩合反应是一种重要的有机合成反应,也被称为Mannich反应。其机理如下:1. 酸性条件下,醛发生质子化,生成醛的带正电荷的中间体。2. 中间体与伯胺中的氮原子上的孤对电子发生亲核加成反应,形成一个新的中间体。3. 新中间体失去一个质子,生成最终产物,即Mannich加合物。整个反应过程中,

牛血清白蛋白的特点

牛的牛血清白蛋白是一种常用的载体蛋白,将其交联于半抗原和其他弱抗原可以使它们在抗体生产中具有更强的免疫原性。与大多数高丰度的血浆蛋白质一样,它非常稳定且溶解度高。此外,67kDa的蛋白质对于充分的产生免疫性已足够的大和复杂。Thermo Scientific Imject BSA在水相缓冲液

Buccutite™全新一代的蛋白交联技术的原理与运用(一)

       Buccutite™交联技术提供了一种将蛋白质与另一种大分子(例如抗体或酶)偶联的有效方法。与常用的SMCC交联技术相比,Buccutite™交联技术更结实,产率更高,它利用两个独特的排他性的接头:Buccutite™MTA 和Buccutite™ FOL,每个基团末端都具

亲和层析实验:常规方法(四)

2.配基吸附对于多肽、蛋白质或核酸,通常采用的共价吸附是, 通过胺反应将配基上的氨基吸附在树脂表面。溴化氰活化表面与伯胺发生反应形成亚胺碳酸盐是最常见的胺反应吸附。最典型的伯胺是赖氨酸侧链(Hermanson,1992;PorathetaU1%7)(详见第 28 章)。这种活化形式的优点在于可以使用

影响酶免ELISA试剂盒操作的因素

一、酶免ELISA试剂盒特异性因素 1、固相载体的选择.ELISA中常用的固相载体有微量滴定板、小珠和小试管三种,以微量滴定板最为常见.它具有良好的吸附性能,孔底透明度高,空白值低,各板之间、同一板各孔之间性能相近.聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工艺的差别,各产品的质量差异很大.因此,在选

酶免蛋白(及酶)—小分子半抗原结合物的制备

在临床实验室中,我们常常会遇到有关小分子物质如激素、治疗药物和毒品等的测定问题,而这些小分子通常分子量小于1 000,只是半抗原,仅有反应原性,没有免疫原性,如像蛋白大分子一样,将其直接免疫动物,不能得到小分子的抗体,只有将其先与载体蛋白相连接,组成完全抗原免疫动物,才能得到特异的抗小分子抗体,

“一种特异性重组酶系统及其应用”获发明ZL

  此前,中国科学院华南植物园研究员区永祥带领的团队建立了一套由重组酶介导的基因定点叠加系统以提高多基因分子育种的效率(Hou et al., 2014 Molecular plant 7: 1756 -1765)。在这套系统中,Cre重组酶扮演着重要的角色——在每一轮的基因叠加后,删除不再需要的外

试剂及其取用方法

 根据化学试剂的纯度,按杂质含量的多少,国内将化学试剂分为四级:一级试剂(优级纯试剂)通常用G.R表示。二级试剂(分析纯试剂)通常用A.R表示。三级试剂(化学纯)通常用C.P表示。四级试剂(实验或工业试剂)通常用L.R表示。此外,根据特殊的工作目的,还有一些特殊的纯度标准。例如光谱纯、萤光纯、半导体

危险试剂及其保存

  危险性试剂或化学危险品,具有能燃烧、爆炸、毒害、腐蚀或放射性等危险性质。在受到摩擦、震动、撞击、接触火源、遇水或受潮、强光照射、高温、跟其他物质接触等外界因素影响时,能引起强烈的燃烧、爆炸、中毒、灼伤、致命等灾害性事故。在采购、保管和使用各种化学危险品的过程中,必须严格遵照国家的有关规定和产品说

关于紫外交联仪的参数和应用

现在紫外交联仪分为3种波长的:254nm;312(302)nm;365nm;一长寿命滤光片,312 nm和365 nm下可终身使用,254 nm下,寿命为3000小时。对于312nm波长的紫外交联仪,312nm紫外光是目前EB/DNA复合凝胶电泳荧光显色的最佳光源,因为它灵敏度高且能产生了最

光活化的核苷酸类似物介导的RNA蛋白的交联实验

            实验方法原理 光化学交联技术是研究核搪核蛋内复合物中 RNA 与蛋白的相互作用的有效手段。 其基本原理是未经任何化学修饰的 RNA -蛋白天然复合物在短波长紫外线(254 nm ) 照射时,RNA 中的核苷酸和蛋白质中的氨基酸会产生光

光活化的核苷酸类似物介导的RNA蛋白的交联实验

光化学交联技术是研究核搪核蛋内复合物中 RNA 与蛋白的相互作用的有效手段。 其基本原理是未经任何化学修饰的 RNA -蛋白天然复合物在短波长紫外线(254 nm ) 照射时,RNA 中的核苷酸和蛋白质中的氨基酸会产生光化学反应,转变为活性状态,进而形成分子间共价交联。本实验来源「RNA 实验指导手

光活化的核苷酸类似物介导的RNA蛋白的交联实验

实验方法原理 光化学交联技术是研究核搪核蛋内复合物中 RNA 与蛋白的相互作用的有效手段。 其基本原理是未经任何化学修饰的 RNA -蛋白天然复合物在短波长紫外线(254 nm ) 照射时,RNA 中的核苷酸和蛋白质中的氨基酸会产生光化学反应,转变为活性状态,进而形成分子间共价交联。实验材料

关于交联聚乙烯的交联原理介绍

  聚乙烯([CH2-CH2]n,n-重复单元数)是含有碳氢两种元素的高分子化合物,具有线型或支链式分子结构大分子链,常温条件下呈固态形式,在固态形式的聚乙烯中呈晶相和无定型相共存形式。聚乙烯的相对分子量在6千-30万之间。 [5]  聚乙烯的电气绝缘性能优良,但因其耐热性能不佳而影响了其用于电缆绝

交联聚乙烯的物理交联方法介绍

  辐射交联:将聚乙烯制品,如包覆在导线上的聚乙烯护套、薄膜、薄壁管等产品用γ-射线、高能射线进行照射进行交联(引发聚乙烯大分子产生自由基,形成C-C交联链)。交联度受辐射剂量及温度的影响,交联点随辐射剂量的增加而增加,因此通过控制辐射条件,可以获得具有一定交联度的交联聚乙烯制品。   用辐射交联法

异硫氰酸荧光素FITC偶联试剂盒​的原理和应用

异硫氰酸荧光素(FITC)是荧光素的衍生物,广泛应用于流式细胞术。 FITC是用异硫氰酸酯反应性基团(-N = C = S)官能化的原始荧光素分子,取代结构底部的氢原子。 该衍生物对包括蛋白质上的胺和巯基的亲核试剂具有反应性。 FITC的荧光为:Ex/Em=492nm/520nm (绿色)。

沙丁胺醇试剂

  一、概要   沙丁胺醇(Salbutamol ,SAL) 属于β-2兴奋剂的一种。β-2兴奋剂中最常作为促生长剂使用的是克伦特罗(Clenbuterol ,CL),但随着对CL 检测力度的加大,非法使用者开始转向其他替代品。由于SAL与CL 的促生长作用相差不大,其在动物体内的消除时间比克伦特

方案7-位点特异性蛋白质DNA-光交联法实验

实验材料DNA 聚合酶 I Klenow 片段限制性内切酶A 和 B单链 DNA 结合蛋白单链 DNA 模板T4 DNA 连接酶T4 DNA 聚合酶T4 多聚核苷酸激酶T7 DNA 聚合酶上游引物试剂、试剂盒10 X 退火缓冲液ATP对叠氮化苯甲酰甲溴生物素-11-dATP生物素-11-dCTP生物

交联聚乙烯化学交联法的概述

  化学交联则是采用化学交联剂使聚合物产生交联,由线性结构转变为网状结构。  交联剂的选择应视聚合物品种,加工工艺和制品性能而定,理想的交联剂除满足一些具体的要求外,还应具有如下基本要求:交联率高,交联结构稳定;加工安全性大,使用方便,加入树脂后的有效期适中,无过早或过晚交联之弊;不影响制品的加工性

交联聚乙烯管材料的相关应用介绍

  (1)建筑用冷、热水供应系统以及管道饮水系统;  (2) 建筑用空调冷水系统;  (3)民用住宅供暖系统;  (4)地面采暖系统;  (5)家用热水器系统配管;  (6)食品工业中饮料、酒类、牛奶等流体的输送管线;  (7)化工、石油工业流体输送管线;  (8)制冷系统及水处理系统管线。

活化分析的应用介绍

由于高分辨半导体γ射线探测器的使用,电子计算机在核分析技术上的应用,以及在此基础上建立的各种高效的γ能谱分析及数据处理系统,可以快速、自动地对复杂的γ谱形进行解析、计算和同位素识别,促进了活化分析技术的迅速发展,并可以使分析过程完全自动化。活化分析技术已成为现代先进痕量分析技术之一,不仅在高纯材料研

活化分析的应用前景

学科领域交叉活化分析发展的特点之一是学科领域交叉,这主要是指生命科学、地学和环境科学,这三门学科约占活化分析工作总数的80%以上。分析方法交叉是指活化分析法和其他核分析法(如质子激发X射线荧光法、质子散射法等)及非核分析法(如气相色谱法、激光光谱法等)的交叉配合使用和相互验证。  新活化机理为了满足

蓄电池活化仪的应用

  众所周知,活化仪是蓄电池维修维护设备,在经过检测挑选出落后的电池之后我们还有一件重要的事情要做,那就是尽可能多地将落后的电池恢复其容量。所以才有了活化仪的舞台,一般在通讯单位的电池故障大部分是因为极板结晶导致容量下降(通常化学故障比较常见,而物理故障少,所以活化仪还是有一定的维修作用),用活化仪

人Ⅰ型胶原吡啶交联终肽(ICTP)ELISA试剂盒

人Ⅰ型胶原吡啶交联终肽(ICTP)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 ICTP 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 ICTP与单抗结合,加入生物素化的抗人ICTP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记

生化实验讲义(理论部分)——层析技术(九)

3.4.3 亲和吸附剂选择并制备合适的亲和吸附剂是亲和层析的关键步骤之一。它包括基质和配体的选择、基质的活化、配体与基质的偶联等等。这里主要介绍一些基本的原理,关于活化、偶联等过程的具体实验操作可以参阅本书后面的实验部分或相应的参考书。基质⑴ 基质的性质基质构成固定相的骨架,亲和层析的基质应该具有以

关于交联聚乙烯化学交联的分类介绍

  (1)过氧化物交联及交联剂  过氧化物交联,一般采用有机过氧化物为交联剂,在热的作用下,分解而生成活性的游离基,这些游离基使聚合物碳链上生成活性点,并产生碳一碳交联,形成网状结构。该技术需要高压挤出设备,使交联反应在机筒内进行,然后使用快速加热方式对制品加热,从而产生交联制品。所以采用过氧化物交