环介导等温扩增技术的原理与应用

环介导等温扩增(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP)技术是日本学者Notomi T于2000年发明的一种新的DNA扩增技术,该方法能够高效、特异、快速的在等温条件下完成。通过一系列的链置换扩增反应,该方法能够在1h内就可以将靶基因扩增109倍,当靶基因为RNA时,该方法还可以通过在反应体系中添加反转录酶而实现对RNA的扩增;在LAMP反应中,会有大量的DNA合成,因此会产生很多焦磷酸根离子,这些焦磷酸根离子可以结合溶液中的二价Mg2+形成不容的焦磷酸盐,便于对反应结果的观测,使扩增和检测一步就可以完成,大大提高检测效率。 1.1 LAMP反应的基本原理 该技术根据靶基因的6个区域设计出4条引物,包括两条内引物和两条外引物(如下图),其中内引物由靶序列正义链和反义链的两个特异区域组成,利用DNA链在60-65℃的恒温条件下处于解链和退火的动态平衡状态,......阅读全文

环介导等温扩增技术的原理与应用

环介导等温扩增(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP)技术是日本学者Notomi T于2000年发明的一种新的DNA扩增技术,该方法能够高效、特异、快速的在等温条件下完成。通过一系列的链置换扩增反应,该方法能够在1h内就可以将靶基因扩

环介导等温扩增技术的原理与应用

原理与应用环介导等温扩增(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP)技术是日本学者Notomi T于2000年发明的一种新的DNA扩增技术,该方法能够高效、特异、快速的在等温条件下完成。通过一系列的链置换扩增反应,该方法能够在1h内就可以将靶基因

环介导等温扩增技术原理

环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification),是一个比较公认的等温扩增方法,现如今等温扩增法很多,比如RCA,NASBA,RPA...如果可以,你可以参考这篇文献:Loop-mediated isothermal amplification inte

LAMP(环介导等温扩增)技术

PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用,其灵敏度高、特异性好,是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂,对仪器和人员要求比较高,不适合基层或现场快速诊断,因此在国内的推广速度并不是很快。2000年日本学者Notomi在Nucleic Aci

核酸扩增—环介导的等温扩增法

  2000年日本学者Notomi在Nucleic Acids Research(核酸研究)杂志上公开了一种新的适用于基因诊断的恒温核酸扩增技术,即环介导等温扩增技术,英文名称为“Loop-mediated isothermal amplification",受到了世卫组织、各国学者和相关政府部门的

环介导等温扩增反应(LAMP)-基因诊断技术及简介

PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用,其灵敏度高、特异性好,是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂,对仪器和人员要求比较高,不适合基层或现场快速诊断,因此在国内的推广速度并不是很快。2000年日本学者Notomi在Nucleic Aci

等温扩增技术的原理及应用

等温扩增技术(isothermal amplification technology,ITA)是近年来发展起来的基于恒温扩增的新型核酸扩增技术,主要包括环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)[1]、交叉引物扩增(crossing pr

环介导等温扩增反应(LAMP)-基因诊断技术及产品简介

  PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用,其灵敏度高、特异性好,是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂,对仪器和人员要求比较高,不适合基层或现场快速诊断,因此在国内的推广速度并不是很快。   2000年日本学者Notomi在Nucle

环介导等温扩增反应(LAMP)-基因诊断技术及产品简介

  PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用,其灵敏度高、特异性好,是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂,对仪器和人员要求比较高,不适合基层或现场快速诊断,因此在国内的推广速度并不是很快。   2000年日本学者Notomi在Nucle

微流控漫谈系列之环介导等温扩增(LAMP)检测技术

图解环介导等温扩增(LAMP)微流控检测技术基于微流控芯片的核酸扩增检测系统是微流控技术最具前景的应用方向之一,它简化了核酸扩增检测中繁琐的样品前处理和扩增产物检测步骤。在多种检测方法当中,环介导等温扩增技术(LAMP)与微流控检测技术结合的核酸扩增检测系统非常适合于应用于POCT(床边检测)。根据

3分钟读懂环介导等温扩增(LAMP)那些事儿

  什么是LAMP?  环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是Notomi等人于2000年提出来的一种新的核酸扩增技术。针对靶基因的6个区域设计4种特异引物,在链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)作用下,可以在

核酸等温扩增技术及其应用

据微生物学家的估计,采用培养技术,仅有约1%的细菌可以培养。在过去的一个世纪里,以聚合酶链反应(PCR)为代表的基于核酸的检测技术发展迅速,为其他病原体的精确检测诊断提供了可能。毋庸置疑,Kary Mtlllis发明的PCR技术是20世纪80年代分子生物学领域的一项革命性突破。也许他本人当时也没有想

酶促重组等温扩增技术(ERA)的反应原理

1、重组酶首先与上下游引物结合,寻找同源双链DNA,一旦定位发生链交换2、同时SSB蛋白与亲本链绑定,阻止其与其脱离的模板链发生相互作用3、DNA聚合酶从上下游引物的3”端启动合成,形成两条双链DNA,如此循环重复扩增

酶促重组等温扩增技术(ERA)的应用介绍

1、研究诊断领域:针对细胞培养中的支原体污染,提供一种快速、简单、灵敏的检测方法,只需要20分钟便能得出结果2、公共卫生领域:针对危害公众健康的呼吸道传染性病原,肠道致病病原及生殖系统病原进行快速检测3、食品安全领域:针对致病微生物、动物源性成分和转基因农产品进行快速现场检测4、农业生产领域:针对水

什么酶重组等温扩增技术?

通过模拟生物体遗传物质自身扩增复制的原理,将来源于细菌,病毒和噬菌体的特定重组酶、外切酶、聚合酶等多酶体系进行改造突变并筛选其功能,通过不同的核酸扩增反应体系进行优化组合,从而获得核心的重组等温扩增体系,建立特殊扩增反应体系,在37-42℃恒温条件下,可将微量DNA/RNA的特异性区段在数分钟内扩增

核酸等温扩增技术有什么

环介导等温扩增技术(LAMP)。依赖于核酸序列的扩增技术(NASBA)。滚环扩增技术(RCA)。单引物等温扩增技术(SPIA)。依赖于解旋酶的等温扩增技术(HAD)。链接代扩增技术(SDA)。快速等温检测放大技术(RIDA)。切刻内切酶核酸恒温扩增技术(NEMA)。核酸等温扩增技术,无论是在实际操作

核酸扩增—转录介导的扩增技术(TMA)

  TMA是一种利用RNA聚合酶和逆转录酶在约42℃等温条件下来扩增RNA或DNA的技术,其原理是带有T7 RNA聚合酶识别的启动子序列的启动子引物与模板退火经反转录形成RNA-DNA杂交分子,被反转录酶的RNase H活性水解形成单链RNA,然后与引物2退火,通过反转录合成双链DNA,在T7 RN

酶促重组等温扩增(ERA)的原理和核心技术

酶促重组等温扩增技术(ERA技术)是一种等温核酸扩增技术,它是利用抗体制药领域先进的Molecular Design、Directed Evolution、Affinity Maturation 等技术手段,将来源于细菌,病毒和噬菌体的特定工具酶进行改造突变并筛选其功能,通过不同的核酸扩增反应体系进

等温多自配引发扩增技术简介

等温多自配引发扩增(IMSA)即isothermal multiple self-matching-initiatedamplification,是对目前核酸分子检测技术手段的改进和补充,具有简单、快速、高灵敏性高特异性的优势。IMSA最大特点就是,在等温核酸扩增过程中会产生多倍数的能自我配

深圳先进院首创CRISPR等温扩增基因检测技术

  近日,中国科学院深圳先进技术研究院博士周文华等在CRISPR等温扩增基因检测技术领域取得新进展。相关工作“A CRISPR-Cas9-triggered strand displacement amplification method for ultrasensitive DNA detecti

等温扩增技术LAMP和CPA的“孪生兄弟相”

想了很久,还是决定将LAMP和CPA放在一起进行介绍。主要是因为两者的引物设计都相对比较复杂,但却有着比较相似的工作原理,有异曲同工之妙。 背景:LAMP,loop-mediatedisothermal amplification,环介导等温扩增技术LAMP是Notomi等于2000年首先提出来的一

循环介导的等温扩增早期检测苛养木杆菌等检疫性病原体

  近日,AMB Express发表的一篇文章中,研究人员开发了一种可靠、快速的诊断检测方法,用于早期检测苛养木杆菌(Xylella fastidiosa)等检疫性病原体。  近年来,自然生态系统在面对非生物和生物破坏时的脆弱性越来越明显,这主要是由于气候变化的影响增加了生态系统的环境压力。随着管理

等温扩增,存在“假阳性”的Bug?

等温扩增技术作为一种核酸分子诊断技术,从诞生之日起就不断受到研究者的青睐,但也少不了质疑,甚至摒弃。引起这种截然相反的态度的原因在于等温扩增技术自身所存在的缺陷。而最为突出的一点是,在建立方法或者实际样本检测的过程中,等温扩增技术引起假阳性结果的概率相对较高,使得其实际应用范围变窄,未能真正显示出其

总结篇:一图全面总结各种等温PCR关键要素

乘着新冠的东方,PCR被广泛关注,PCR中的等温PCR由于其系统对仪器设备需求低也备受瞩目,对于医疗设施相对较差地区,甚至可以不需要仪器,只需要一个恒温水浴锅即可。等温扩增PCR发展至今已经近30年,目前市面是的等温PCR七七八八数起来也有大约15种,其中有些工作原理相似或相同,先前也逐个进行了介绍

等温扩增到底行不行?

最近又看到一些同行写的关于等温扩增的文章。不禁想起几年前看到的RPA技术介绍。当时第一次看到这个技术的时候,简直可以用“震惊”、“惊艳”来形容。扩增速度真快啊,十几分钟就能出结果,比现在吭哧吭哧做PCR岂不是方便多了!可是几年过去了,似乎也没看到基于RPA技术的临床产品上市。说真的是有点失望的。就像

基因扩增技术的原理

PCR扩增DNA的原理是:先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链,然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物,即左右引物。此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片段,一般需20-30个碱基对,过少则难保持与DNA

基因扩增仪的技术原理

技术原理:标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中,在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实时检测与之对应的随

DNA扩增检测技术的应用

在药物的分析和研究,以及控制药物质量等方面有着广泛应用的药物分析检测技术,可以采用物理、化学等方式对药物进行系统的分析,并结合现代化学、光谱、色谱等技术对药品进行研究。DNA扩增检测技是现代生物学重大发现之一,也是现代药物分析中快速检测技术之一。作为人体生命的重要物质,核酸和蛋白的异常表达往往与癌症

物理吸附等温线滞后环

• H1型迟滞回线可在孔径分布相对较窄的介孔材料,和尺寸较均匀的球形颗粒聚集体中观察到。• H2型迟滞回线由有些固体,如某些二氧化硅凝胶给出。其中孔径分布和孔形状可能不好确定,但认为孔径分布范围比H1型回线更宽。• H3型迟滞回线由片状颗粒材料,如粘土,或由狭缝形孔隙材料给出,在较高相对压力区域没有

等温扩增时出现假阳性的应对策略

等温扩增技术作为一种核酸分子诊断技术,从诞生之日起就不断受到研究者的青睐,但也少不了质疑,甚至摒弃。引起这种截然相反的态度的原因在于等温扩增技术自身所存在的缺陷。而最为突出的一点是,在建立方法或者实际样本检测的过程中,等温扩增技术引起假阳性结果的概率相对较高,使得其实际应用范围变窄,未能真正显示出其