核酸探针在遗传性疾病及点突变的直接分析方面的应用
DNA 分子中某个碱基的替换或核苷酸的插入、缺失及重排都可能引起遗传性疾病。一般可以根据遗传性基因产物的改变来分析遗传疾病的发生,但对那些不能用蛋白产物进行分析的遗传疾病可用 DNA 杂交技术进行分析。对于那些基因点突变引起的限制性内切酶作用部位增加或消失,或因 DNA 顺序的增加、缺失或重排,使各位点之间的 DNA 长度发生改变而引起的遗传疾病可用 DNA 探针直接分析。用 DNA 杂交技术已直接分析了动脉粥样硬化、糖尿病和生长激素缺陷等遗传病。目前化学合成的核苷酸探针也能进行点突变的直接分析,其原理是根据寡核苷酸链和给定的等位基因之间的一个碱基对的错配来鉴别基因型(这个等位基因在此条件下完全不能杂交)。这种方法已用于分析α1-抗胰蛋白酶缺陷、镰状细胞贫血。此外,人的性别鉴定和法医学上人的DNA 指纹分析,也广泛应用核酸探针诊断技术。......阅读全文
核酸探针在遗传性疾病及点突变的直接分析方面的应用
DNA 分子中某个碱基的替换或核苷酸的插入、缺失及重排都可能引起遗传性疾病。一般可以根据遗传性基因产物的改变来分析遗传疾病的发生,但对那些不能用蛋白产物进行分析的遗传疾病可用 DNA 杂交技术进行分析。对于那些基因点突变引起的限制性内切酶作用部位增加或消失,或因 DNA 顺序的增加、缺失或重排,使各
核酸探针在其他方面的应用
1、检测抗生素耐药性核酸探针可直接从标本中测出细菌的耐药基因。Perine 等用 DNA 探针查出尿路渗出液中的大多数淋球菌含有TEM 型β-内酰胺酶而对青霉素 G 耐药。2、流行病学调查核酸探针可用于研究医源性感染中爆发流行时大量的流行菌株间的同源性,结果易于分析和解释。3、恶性肿瘤最引起人们注意
核酸探针在病原微生物的检测方面的应用
在许多病原微生物的检测上,常用的分离培养方法需要的时间较长,手续也较繁杂,而且病灶和粪便等病料含杂菌较多,阻碍病原微生物的检出,不能快速做出诊断。免疫学方法也有许多不足之处,尤其是在持续性感染和感染潜伏期抗体尚未产生或不易检测出抗体的情况下,即使有抗体存在也难以判断。而应用核酸探针技术,就可以直接确
详述离子探针分析仪在各方面的应用
（1）在半导体材料方面的应用 由于半导体材料纯度要求很高，要求分析的区域最小，迫切要求做表面分析和深度分析，因此也是最适合离子探针发挥作用的领域，其中有代表性的工作有： • 表面、界面和体材料的杂质分析 • 离子注入浓度及掺杂的测定 • 在实效分析方面的应用 （2）在金属材料方面的应用
荧光染料在核酸检测方面的应用
核酸荧光染料对细胞核染色后定量测量细胞所发出的荧光强度，就可以确定细胞核中DNA、RNA的含量，并可以对细胞周期和细胞的增殖状况进行分析。有多种荧光染料可以对细胞中的DNA或RNA染色，常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst 33342等，RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。
荧光染料在免疫分析方面的应用
荧光标记的单克隆抗体技术为流式细胞仪在研究细胞膜和细胞内各种功能性抗原、肿瘤基因蛋白等领域扩展了无限的应用空间。荧光探针可以通过蛋白质交联剂共价结合在单克隆抗体上。免疫荧光标记最常用的染料有异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)、藻红蛋白（PE）以及Ale
简述核酸探针技术及其在微生物检测中的应用
随着分子生物学和分子化学的飞速发展，对病原微生物的鉴定已不再局限于对它的外部形态结构及生理特性等一般检验上，而是从分子生物学水平上研究生物大分子，特别是核酸结构及其组成部分。在此基础上建立的众多检测技术中，核酸探针（Nuclear acid probe）以其敏感、特异、简便、快速的特点成为世人瞩目的
显微CT在骨成像及定量分析方面的应用
骨质疏松研究显微CT成像对骨质疏松症的研究尤为重要，特别是疾病进展和治疗效果，因为它是少数能够提供骨矿物质含量和密度信息的成像技术之一。通过高分辨率的显微CT测量这些变化，有助于开发治疗剂并理解控制这些过程的分子机制。在骨质疏松的动物研究中，雌性鼠双侧卵巢摘除是一个较成熟的模型，可以成功建立模拟雌激
波谱分析在工业方面的应用简介
工业方面 1. 化工工业中的应用 波谱分析在精细化学品中的应用相当广。波谱在混合物中的分离提纯，样品中各个组分的定性和定量分析都是很好的工具。如对染料、颜料、涂料、食品添加剂、化学助剂的结构分析。 波谱分析是纺织工业中检测纱线质量的关键技术。通过波谱分析可以了解纱条不匀率的性质，及时找出纺
波谱分析在医药方面的应用
1. 药物分析中的应用波谱分析的发展趋势 药物波谱分析是当今发展最为迅速的前沿科学之一。波谱分析在药物分析中的重要应用可见一斑。中药的化学成分复杂，有效成分难以确定。仅单方制剂亦为一多种成分的混合物，因此要求更严格和更先进的分离、分析手段进行鉴别和含量测定。而波谱分析便是中药研究中最为广泛应用的
生物质谱仪在药物分析方面的应用
药物分析的应用：质谱在药物分析中的应用包括：合成药物组分分析，天然药物成分分析，肽和蛋白质药物(包括糖蛋白)氨基酸序列分析，药物代谢研究和中药成分分析。在检验医学中应用较多的是治疗药物监测(TDM)，以前药物检测主要使用免疫化学技术和高效液相色谱技术。虽然，免疫化学技术简单易行，但是所测定药物种类比
波谱分析在环境方面的应用介绍
环境方面 1. 有机物污染的分析 紫外光谱经常用来做物质的纯度检查、定量分析和结构鉴定。在有机物的定量、定性分析中也有其独到之处。在环境中有机污染物的分析中应用广泛，如土壤中敌敌畏、敌百虫等农药残留含量的分析。 2. 食品安全中的应用 高效液相色谱一质谱/质谱法(HPLC-MS/MS)具
十九大！看看分子病理领域，未来发展方向！
今天党的十九大召开，习近平大大指出：中国特色社会主义进入新时代，我国社会主要矛盾已经转化为人民日益增长的美好生活需要和不平衡不充分的发展之间的矛盾。想想都觉得高中政治课本过时了，而考研又多了一道大题。然而这些年，医疗领域进展可不止一点！就让我们一起看看这些年，分子病理领域的发展！ 其实相对于其
分子病理诊断的现状与思考
分子病理诊断，是指应用分子生物学技术，从基因水平上检测细胞和组织的分子遗传学变化，以协助病理诊断和分型、指导靶向治疗、预测治疗反应及判断预后的一种病理诊断技术，是分子生物学、分子遗传学和表观遗传学的理论在临床病理中的应用，属转化医学的范畴。分子病理诊断又称分子病理检查、分子病理检测、分子病理技术，称
核酸探针标记及原位杂交
一、核酸探针标记核酸探针分子杂交是指具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下（适宜的温度及离子强度等）可按碱基互补原则形成双链，此杂交过程是高度特异的。杂交的双方是待测核酸及探针。核酸探针根据核酸的性质，可分为DNA和RNA探针；根据标记物不同，可分为放射性标记探针和非放射性标记探针两大类；根据是否
核酸探针标记及原位杂交
一、核酸探针标记 核酸探针分子杂交是指具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下（适宜的温度及离子强度等）可按碱基互补原则形成双链，此杂交过程是高度特异的。杂交的双方是待测核酸及探针。 核酸探针根据核酸的性质，可分为DNA和RNA探针；根据标记物不同，可分为放射性标记探针和非放射性标记探针两大
核酸探针的分类
核酸探针根据核酸的性质，可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物的与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。
核酸探针标记
实验概要核酸探针根据核酸的性质，可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。实验原理分子生物研究中，最常用的探针即为双链DNA探针，它广泛应用于转基因
苯甲酸在食品及医药方面的应用
（1）防腐剂 苯甲酸和苯甲酸钠有杀菌和抑制细菌生长的作用，且低毒无味，因而它们广泛地用作防腐剂。在微酸性介质中，仅0.1%浓度的苯甲酸可抑制细菌生长。改变pH值对苯甲酸盐的杀菌作用和抑菌作用影响很大，在碱性介质中其效果明显降低，pH值在2.5~4.5时效果最佳。 在食品工业中，苯甲酸，苯甲酸
核酸探针标记及原位杂交2
（二）随机引物合成法 随机引物合成双链探针是使寡核苷酸引物与DNA模板结合，在Klenow酶的作用下，合成DNA探针。合成产物的大小、产量、比活性依赖于反应中模板、引物、dNTP和酶的量。通常，产物平均长度为400～600个，可以获得大量的有效探针。反应时对模板的要求不严格，用微量制备的质
核酸探针标记及原位杂交3
3.注意事项（1）避光下准备反应体系：由于光敏生物素醋酸盐对光敏感，应避免光照。在分装试剂及核酸与光敏生物素混合时应在暗室安全灯下操作。（2）核酸纯度：由于光敏生物素能与任何有机物反应，因此用做标记探针的核酸要高度纯化。用作标记探针的核酸最好不用Tris溶液溶解，Tris中所含氨基会干扰标记。（3）
核酸探针标记及原位杂交4
(三)试剂配制配制溶液过程中均需戴手套，液体配制均用超净水，所用瓶子均经160℃烘烤4h，主要目的是去除RNA酶。1.DEPC水 将DEPC按1‰浓度加入超净水中，充分混合后静置过夜，15~20min高压消毒，之后室温避尘存放。2.0.1mol PBS pH 7.4A液：0.1mol NaH2PO4
核酸探针标记及原位杂交1
一、核酸探针标记核酸探针分子杂交是指具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下（适宜的温度及离子强度等）可按碱基互补原则形成双链，此杂交过程是高度特异的。杂交的双方是待测核酸及探针。核酸探针根据核酸的性质，可分为DNA和RNA探针；根据标记物不同，可分为放射性标记探针和非放射性标记探针两大类；根据是否
蜂蜡在农业方面的应用
在农业方面，主要是将蜂蜡用于保存果蔬和用于饲料添加方面。果蔬保存陈秀芳等认为，涂于新鲜果蔬表面的可食用膜通过控制新鲜果蔬的呼吸强度，阻止果蔬组织的水分损失，从而延长果蔬的货架寿命。可食用膜，顾名思义，是一种由可食用的成分组成的膜。因为采后的果蔬仍进行着旺盛的生命活动，最典型的是它的呼吸作用。呼吸过程
摇核酸的荧光探针
DNA和RNA?摇核酸的荧光探针 用于共聚焦激光扫描显微镜的主要有Acridine Orange(吖啶橙，AO)、Propidium Iodide(碘化丙啶，PI)。两种染料既可标记DNA又可标记RNA，如为获得单独的DNA或RNA分布，染色前可用RNA酶或DNA酶处理细胞。PI不能进入完整的细胞膜
核酸探针标记的简介
核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针；根据是否使用放射性标记物的与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针；根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针；根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。下面将介绍各种类型的探针及标记方法。
核糖核酸探针
核糖核酸探针1．室温下，于1.5ml无菌微量离心管内依次加入：5μl 5×转录缓冲液1μg 模板DNA1.2μl 10 mmol/L rATP（终浓度为480μmol/L）1.2μl 10 mmo
核酸基因分子探针
从化学和生物学的意义上理解，探针是一种已知特异性的分子，它带有合适的标记物供反应后检测。探针和靶的相互反应如抗原-抗体、血凝素-碳水化合物、亲合素-生物素、受体和配体，以及核酸与其互补核酸间的杂交等反应均属此类。用核酸探针与待检标本中核酸杂交，形成杂交体，再用呈色反应显示。此方法用于疾病的诊断，称为
点突变大小鼠在体内体外临床研究的应用（一）
点突变与人类疾病基因是很多生命的蓝图，基因突变虽有对物种的多样性和演化有重要的作用，但同时也是很多疾病的根源。点突变就是突变类型中最常见的一种，是色盲症、镰刀状细胞贫血症、囊性纤维化以及很多肿瘤病变中的罪魁祸首。除了引发癌症以外，一些点突变还能提高癌细胞的药物抗性，因此针对同一靶点有时需要设计不同的
点突变大小鼠在体内体外临床研究的应用（二）
研究点突变疾病的利器——点突变模式动物依靠同源重组，可以将含有突变碱基的DNA片段整合到基因组中，但过低的重组效率以及种属局限限制了点突变的研究。随着各种核酸酶技术在2009-2013年之间井喷式的发展及以后的不断完善，尤其是Crispr/Cas9技术的发明，使得基因编辑的效率大幅提高，难度和成本也