PCR仪产生弥散（smear）条带原因分析
*在PCR反应体系中第一链产物的含量过高 *减少引物的用量 *优化PCR反应条件/减少PCR的循环次数 *在用DNase处理被DNA污染的RNA样品时，其产生的寡核苷酸片段会产生非特异性扩增，一般会显示为弥散背景。......阅读全文
PCR仪产生弥散（smear）条带原因分析
*在PCR反应体系中第一链产物的含量过高 *减少引物的用量 *优化PCR反应条件/减少PCR的循环次数 *在用DNase处理被DNA污染的RNA样品时，其产生的寡核苷酸片段会产生非特异性扩增，一般会显示为弥散背景。
PCR仪产生大分子量的弥散条带原因分析
*大多数情况下是由于退火温度过低而导致的非特异性的起始及延伸产生的 *对于长片段的PCR，建议将反应体系中cDNA的浓度稀释至1:10（或1:100-1:200）
PCR仪产生非特异性条带浅原因分析
*用RT阴性对照检测是否被基因组DNA污染。如果RT阴性对照的PCR结果也显示同样条带，则需要用DNase I重新处理样品。 *在PCR反应中，非特异的起始扩增将导致产生非特异性结果。在低于引物Tm 2至5℃的温度下进行退火，降低镁离子或是目的DNA的量将减少非特异性结果的产生。 *由于mR
PCR跑出来的条带比较弥散,主要有哪些原因
1、PCR体系中存在污染2、电泳槽中电泳缓冲液不净3、电压不稳定4、如果PCR的模板是经过酒精提取的质粒等相关DNA,则酒精没有除净5、退火时间过长或过短,延伸时间过短等以上是条带与你所要的目的基因的大小相等的情况下的部分原因
PCR跑出来的条带比较弥散,主要有哪些原因
1、PCR体系中存在污染2、电泳槽中电泳缓冲液不净3、电压不稳定4、如果PCR的模板是经过酒精提取的质粒等相关DNA,则酒精没有除净5、退火时间过长或过短,延伸时间过短等以上是条带与你所要的目的基因的大小相等的情况下的部分原因
PCR假阳性产生原因分析
假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。产生的原因有：①引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行 PCR 扩增时，扩增出的 PCR 产物为非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有：操作轻柔，防止
PCR电泳无条带原因
可能的原因及对应的解决方案如下：酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA 聚合酶因保存或运输不当而失活，往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸，造成 DNA 脱嘌呤而影响 PCR 的结果。变性温度是否准确：PCR 仪指示温度与实际
进口PCR仪的常见问题详细解答
1. 进口PCR仪cDNA产量的很低 可能的原因： *RNA模板质量低 *对mRNA浓度估计过高 *反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足 *同位素磷32过期 *反应体积过大，不应超过50μl 2. 进口PCR仪扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅 *zui常见的原因在于
进口PCR仪的常见问题详细解答
1. 进口PCR仪cDNA产量的很低 可能的原因： *RNA模板质量低 *对mRNA浓度估计过高 *反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足 *同位素磷32过期 *反应体积过大，不应超过50μl 2. 进口PCR仪扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅 *zui常见的原因在于
PCR仪扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅原因分析
*最常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应体系 *与反应起始时RNA的总量及纯度有关 *建议在试验中加入对照RNA *第一链的反应啊产物在进行PCR扩增时，在总的反应体系中的含量不要超过1/10 *建议用Oligo(dT)或随机引物代替基因特异性引物（GSP
pcr阳性对照不出条带的原因
阳性对照不出的原因很多，主要考虑试剂系统。包括Taq酶活性、引物设计、Mg离子含量、dNTP浓度。还可考虑模板DNA的提取方法，甚至你的引物是否正确稀释。
PCR实验操作常见问题及解决方法
1. cDNA产量的很低可能的原因：*RNA模板质量低*对mRNA浓度估计过高*反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足*同位素磷32过期*反应体积过大，不应超过50μl2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅*最常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应体系*与
PCR反应假阴性，不出现扩增条带的原因分析
PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板:①模板中含有杂蛋白质,②模板中含有Taq酶抑制剂,③模板中蛋白质没有消 化除净,特别是染色体中的组蛋白,④在提取制备模板时丢失过多,或吸入酚。⑤模 板核酸变性
PCR产物在凝胶上呈Smear状态的原因及处理办法
原因： 1、模板不纯 2、Buffer不合适 3、退火温度偏低 4、酶量过多 5、dNTP、Mg 2+浓度偏高对策： 1、纯化模板 2、更换Buffer 3、适当提高退火温度 4、适量用酶 5、适当降低dNTP和镁离子的浓度 6、减少
PCR电泳时maker条带很暗的原因
这样的话除了Maker加的量少的话，还有可能就是你的样品浓度较高，适当稀释一下样品看看。
PCR跑不出条带是什么原因
先解决阳性对照再考虑你的目的基因。阳性对照都没有的可能性有两种，阳性对照模板有问题，pcr体系的问题（包括引物的问题）。看你的内参下面没有引物二聚体，那后面泳道里最下面的那一道就是引物二聚体了。pcr失败的原因太多了，试剂有问题，或者条件有问题，第一次用一个引物，建议做梯度
PCR条带微弱原因及解决方法
CDNA：0.5微升primer：1微升dNTP：2微升10*buffer：2微升TAG酶：0.25微升D.W.：14.25微升PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+)1、预变性（Initialdenaturation）．模板DNA完全变
PCR跑不出条带是什么原因
先解决阳性对照再考虑你的目的基因。阳性对照都没有的可能性有两种，阳性对照模板有问题，pcr体系的问题（包括引物的问题）。看你的内参下面没有引物二聚体，那后面泳道里最下面的那一道就是引物二聚体了。pcr失败的原因太多了，试剂有问题，或者条件有问题，第一次用一个引物，建议做梯度
PCR跑不出条带是什么原因
先解决阳性对照再考虑你的目的基因。阳性对照都没有的可能性有两种，阳性对照模板有问题，pcr体系的问题（包括引物的问题）。看你的内参下面没有引物二聚体，那后面泳道里最下面的那一道就是引物二聚体了。pcr失败的原因太多了，试剂有问题，或者条件有问题，第一次用一个引物，建议做梯度
PCR条带微弱原因及解决方法
CDNA：0.5微升primer：1微升dNTP：2微升10*buffer：2微升TAG酶：0.25微升D.W.：14.25微升PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+)1、预变性（Initialdenaturation）．模板DNA完全变
PCR反应出现假阴性结果无扩增条带原因分析
PCR 反应的关键环节有 ： ① 模板核酸的制备; ② 引物的质量与特异性; ③ 酶的质量; ④ PCR循环条件; 寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究 ， 可能出现的原因有以下几点： 1 ) 模板： ① 模板中含有杂蛋白质; ② 模板中含有Taq酶抑制剂; ③
PCR常见问题及回答
PCR常见问题及回答 1. cDNA产量的很低 可能的原因：*RNA模板质量低*对mRNA浓度估计过高*反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足*同位素磷32过期*反应体积过大，不应超过50μl 2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅 *zui常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系
传代细胞－PCR常见问题及回答
1. cDNA产量的很低 可能的原因：*RNA模板质量低*对mRNA浓度估计过高*反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足*同位素磷32过期*反应体积过大，不应超过50μl 2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅 *zui常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应
PCR实验操作常见问题及解决方法（一）
cDNA产量的很低可能的原因：*RNA模板质量低*对mRNA浓度估计过高*反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足*同位素磷32过期*反应体积过大，不应超过50μl2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅*最常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应体系*与反应起始
PCR仪常见问题及回答
聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行比对
小分子电泳条带弥散，怎么解决
小分子电泳条带弥散，怎么解决你是做什么电泳，如果是普通电泳，RNA污染量不大的话可能看不到，如果比较大的话会成弥散的条带，因为在电泳过程中会降解，如果提取的RNA质量较好，电泳过程没有降解掉的话，可能会有一条比较清晰的条带在目的条带的下方，因为RNA电泳比DNA跑的快正常操作实验中提取质粒应该出现2
小分子电泳条带弥散，怎么解决
小分子电泳条带弥散，怎么解决你是做什么电泳，如果是普通电泳，RNA污染量不大的话可能看不到，如果比较大的话会成弥散的条带，因为在电泳过程中会降解，如果提取的RNA质量较好，电泳过程没有降解掉的话，可能会有一条比较清晰的条带在目的条带的下方，因为RNA电泳比DNA跑的快正常操作实验中提取质粒应该出现2
怎么解决小分子电泳条带弥散
如果是普通电泳，RNA污染量不大的话可能看不到，如果比较大的话会成弥散的条带，因为在电泳过程中会降解，如果提取的RNA质量较好，电泳过程没有降解掉的话，可能会有一条比较清晰的条带在目的条带的下方，因为RNA电泳比DNA跑的快正常操作实验中提取质粒应该出现2条条带，由于空间结构的差异，从上至下第一条为
小分子电泳条带弥散，怎么解决
小分子电泳条带弥散，怎么解决你是做什么电泳，如果是普通电泳，RNA污染量不大的话可能看不到，如果比较大的话会成弥散的条带，因为在电泳过程中会降解，如果提取的RNA质量较好，电泳过程没有降解掉的话，可能会有一条比较清晰的条带在目的条带的下方，因为RNA电泳比DNA跑的快正常操作实验中提取质粒应该出现2
RTPCR常见问题分析及其解决方案
常见问题可能原因建议解决方案少量或没有RT-PCR产物RNA被降解分离无污染，高质量的RNA；提取RNA的材料要尽量新鲜，防止RNA降解；RT反应前，在变性胶上分析RNA的完整性；RNA提取后，应储存在100％甲酰胺中， 如果使用RNase抑制剂，加热时小于45℃；pH小于8.0，否则抑制剂会释放所