测定酶活性浓度的固定时间法

先让酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,然后停止酶反应,加入试剂进入化学反应呈色测出底物和产物的变化。 用这类方法测酶活性浓度,必须保证酶和底物在所选定的温度下作用时间要很精确,否则将引起较大误差。 该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或产物的变化。......阅读全文

测定酶活性浓度的固定时间法

  先让酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,然后停止酶反应,加入试剂进入化学反应呈色测出底物和产物的变化。  用这类方法测酶活性浓度,必须保证酶和底物在所选定的温度下作用时间要很精确,否则将引起较大误差。  该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或产物的变化。

测定酶活性浓度测试——固定时间法

固定时间法(取样法、终点法、两点法)先让酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,然后停止酶反应,加入试剂进入化学反应呈色测出底物和产物的变化。用这类方法测酶活性浓度,必须保证酶和底物在所选定的温度下作用时间要很精确,否则将引起较大误差。该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或产物的变化。

测定酶活性浓度测试——固定时间法

  固定时间法(取样法、终点法、两点法)  先让酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,然后停止酶反应,加入试剂进入化学反应呈色测出底物和产物的变化。  用这类方法测酶活性浓度,必须保证酶和底物在所选定的温度下作用时间要很精确,否则将引起较大误差。  该法最基本的一点是停止反应后才测定底物或产物的变

连续监测法测定酶活性浓度

连续监测法具有测定准确等众多的优点,随着科学技术的发展,自动生化仪的使用,正在逐步取代“固定时间法”。实际工作中,测酶活性浓度常用酶偶联法。最简单的酶偶联反应为以下模式:A:底物B:待测酶产物(不能直接测定)C:指示酶产物(可以直接测定)Ex:待测酶Ei:指示酶如果一些酶反应找不到合适的指示酶与其直

固定化α淀粉酶及活性测定

一、实验目的和原理目的:学会交联法制备固定化酶的操作技术内容:制备固定化酶的方法很多,利用双功能试剂或多功能试剂在酶分子间,酶分子与惰性蛋白间,或酶分子与载体间进行交联反应,以共价键制备固定化酶的方法称为交联法,本实验即采用这种方法。交联剂为戊二醛,载体为甲壳素。 二、实验器材 1.恒

酶的活性浓度单位

酶活性浓度以每单位体积所含的酶活性单位数表示。近些年来,我国及世界各国的临床实验室几乎都习惯用U/L来表示体液中酶活性浓度。考虑到各级医护人员都对katal不太熟悉,如使用katal/L报告酶活性浓度结果时,最好同时注明相应的U/L.在对酶活性浓度单位计算时,可根据所测定的酶所用方法的不同,利用标准

酶的活性浓度单位

酶活性浓度以每单位体积所含的酶活性单位数表示。近些年来,我国及世界各国的临床实验室几乎都习惯用U/L来表示体液中酶活性浓度。考虑到各级医护人员都对katal不太熟悉,如使用katal/L报告酶活性浓度结果时,最好同时注明相应的U/L.在对酶活性浓度单位计算时,可根据所测定的酶所用方法的不同,利用标准

酶的活性及浓度的调节方式

调节酶的浓度酶浓度的调节主要有两种方式,一种是诱导或抑制剂的合成;一种是调节酶的降解。调节酶的活性激素通过与细胞膜或细胞内受体相结合而引起一系列生物学效应,以此来调节酶活性。反馈抑制调节许多小分子物质的合成是由一连串的反应组成的,催化此物质生成的第一步的酶,往往被它们的终端产物抑制。这种抑制叫反馈抑

连续监测法中酶活性浓度的计算有哪些注意事项?

在酶反应过程中,用仪器监测某一反应产物或底物浓度随时间的变化所发生的改变,通过计算求出酶反应初速度的方法。连续监测法优点之一是计算方便,不需作标准曲线或标准管,用分光光度计监测酶反应过程时,很容易求出反应体系中每分钟吸光度变化,根据摩尔吸光系数可求出△A(相当测定物质变化的微摩尔数)。计算中要考虑标

酶活性的测定方法

一般采用测定酶促反应初速度的方法来测定活力,因为此时干扰因素较少,速度保持恒定。反应速度的单位是浓度/单位时间,可用底物减少或产物增加的量来表示。因为产物浓度从无到有,变化较大,而底物往往过量,其变化不易测准,所以多用产物来测定

酶活性的测定实验

酶活性的测定可应用于:(1)酶动力学的研究;(2)酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度,取决于指定的条件。SI单位是katal,1 katal = 1 mol /s,更实际

酶活性的测定实验

连续性检测             实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量

酶活性测定的方式

  酶促反应速度的测定可采用两种方式:  一、测定完成一定量反应所需的时间;  二、测定单位时间内的酶促反应量。前者称为终点法,后者称为动力学法。  终点法  该方式是在特定条件下,将样品中要检知的酶作用一定量的底物,然后根据反应进行到某一程度(即达到某一指标)所需要的时间长短来估计酶的活力。  其

酶活性测定实验

实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.

酶活性测定实验

实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.

固定污染源废气低浓度颗粒物的测定重量法

固定污染源废气低浓度颗粒物的测定重量法是一种常用的颗粒物检测方法,利用滤膜重量差来计算颗粒物质量浓度。该方法操作简便、准确度高,适用于固定污染源废气中低浓度颗粒物的监测和控制。固定污染源废气低浓度颗粒物的测定重量法是一种常用的颗粒物检测方法,主要原理是将废气通过滤纸或滤膜,收集颗粒物后再测量滤膜的重

酶固定化技术固定化方法吸附法

吸附法是利用物理吸附法,将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式。显著特点是:工艺简便及条件温和,包括无机、有机高分子材料,吸附过程可同时达到纯化和固定化;酶失活后可重新活化,载体也可再生。但要求载体的比表面积要求较大,有活泼的表面。

酶固定化技术固定化方法吸附法

吸附法是利用物理吸附法,将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式。显著特点是:工艺简便及条件温和,包括无机、有机高分子材料,吸附过程可同时达到纯化和固定化;酶失活后可重新活化,载体也可再生。但要求载体的比表面积要求较大,有活泼的表面。

酶固定化技术固定化方法包埋法

包埋固定化法是把酶固定聚合物材料的格子结构或微囊结构等多空载体中,而底物仍能渗入格子或微囊内与酶相接触。这个方法比较简便,酶分子仅仅是被包埋起来,生物活性被破坏的程度低,但此法对大分子底物不适用。1) 网格型将酶或包埋在凝胶细微网格中,制成一定形状的固定化酶,称为网格型包埋法。也称为凝胶包埋法。2)

酶固定化技术固定化方法交联法

交联法是用多功能试剂进行酶蛋白之间的交联,使酶分子和多功能试剂之间形成共价键,得到三向的交联网架结构,除了酶分子之间发生交联外,还存在着一定的分子内交联。多功能试剂制备固定化酶方法可分为:( 1) 单独与酶作用;( 2) 酶吸附在载体表面上再经受交联;( 3) 多功能团试剂与载体反应得到有功能团的载

多酚氧化酶活性的测定(氧电极法)

  原理   多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化生成醌。多酚氧化酶活性可以用氧电极测量反应耗氧的速度,或用比色法测量产物的形成,常用的底物如儿茶酚(邻苯二酚)和多巴(3,4-二羟苯丙氨酸)。     仪器药品     测氧仪        

单胺氧化酶活性测定_同位素法

实验材料大鼠试剂、试剂盒磷酸钠缓冲液蒸馏水盐酸苯乙胺甲苯5-羟色胺双草酸盐β-乙基-苯乙胺盐酸盐苯-醋酸乙酯闪烁液仪器、耗材制冰机水浴锅试管试管架计数瓶离心机离心管移液枪漩涡振荡仪单胺氧化酶(monoamine oxidase )为催化单胺氧化脱氨反应的酶。缩写MAO,也有称为含黄素胺氧化酶的。EC

关于部分凝血活酶活性时间的简介

  血液凝固机制分为内、外凝血系统,活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)是在体外模拟体内内源性凝血(括因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ、Ⅹ、Ⅴ、凝血酶原和纤维蛋白原)的全部条件,测定血浆凝固所需的时间,用以反映内源凝血因子是否异常,是最常用筛

脂肪酶的活性测定

方法:⒈粗酶液的制备用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g, 用蒸馏水溶解并定容至100 mL, 配成浓度分别为0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。⒉实验设计本实验以10 mL色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定选定其水解的最

脂肪酶的活性测定

方法:⒈粗酶液的制备用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g, 用蒸馏水溶解并定容至100 mL, 配成浓度分别为0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。⒉实验设计本实验以10 mL色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定选定其水解的最

淀粉酶活性的测定

一、原理 淀粉酶(amylase)包括几种催化特点不同的成员,其中α-淀粉酶随机地作用于淀粉的非还原端,生成麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉浆的粘度下降,因此又称为液化酶;β-淀粉酶每次从淀粉的非还端切下一分子麦芽糖,又被称为糖化酶;葡萄糖淀粉酶则从淀粉的非还原端每次切下一个葡萄糖。

单胺氧化酶活性测定_高效液相色谱法

实验材料大鼠试剂、试剂盒苯胺β-苯乙胺优降宁过氯酸苯甲醛磷酸钠缓冲液甲醇仪器、耗材HPLC紫外检测器制冰机水浴锅离心机离心管移液枪试管试管架比色皿酶标仪微量注射器单胺氧化酶(monoamine oxidase )为催化单胺氧化脱氨反应的酶。缩写MAO,也有称为含黄素胺氧化酶的。EC1.4.3.4。作

NK细胞活性测定实验——乳酸脱氢酶释放法

实验方法原理乳酸脱氢酶(LDH)存在于细胞内,正常情况下,不能透过细胞膜。当细胞受到损伤时,由于细胞膜通透性改变,LDH可从细胞内释放至培养液中。释放出来的LDH再催化乳酸的过程中,使氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)变成还原型辅酶(NADH2),后者再通过递氢体-吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化氮唑

酶活性测定方法对比

  1.按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的

酶活性测定方法对比

1.按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的影响