SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法的操作过程和所需仪器
SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白分子量,是根据大多数蛋白都能与阳离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)按重量比结合成复合物,使蛋白分子所带的负电荷远远超过天然蛋白分子的负电荷,消除了不同蛋白分子的电荷效应,使蛋白分子相对迁移率(R''<[m]>)的大小完全取决于分子量的高低,因此可从已知分子量的标准蛋白的对数和相对迁移率所作的标准曲线中求出供试品的分子量。1.仪器装置除另有规定外,同聚丙烯酰胺凝胶电泳。2.试剂(1)丙烯酰胺液溶称取丙烯酰胺 22.2g与双丙烯酰胺0.6g, 溶于100ml水中,贮于褐色瓶中低温保存。(2) 凝胶缓冲液称取磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)8.82g 、 磷酸氢二 钠(Na2HPO4 ·12H2O)51.55g与十二烷基硫酸钠2.0g,加水**1000ml(若有沉淀析出,可加温** 37℃溶解)。(3)电泳缓冲液将凝胶缓冲液稀释 1倍。(4)染色液称取 25mg考......阅读全文
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法的操作过程和所需仪器
SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白分子量,是根据大多数蛋白都能与阳离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)按重量比结合成复合物,使蛋白分子所带的负电荷远远超过天然蛋白分子的负电荷,消除了不同蛋白分子的电荷效应,使蛋白分子相对迁移率(R'')的大小完全取决于分子量的高低,因此可从已知分子
纸电泳法的操作过程和所需仪器
1.仪器装置 包括电泳室及直流电源两部分。 常用的水平式电泳室装置如图,包括两个电泳槽 A和一个可以密封的玻璃(或相应材料)盖B;两侧的电泳槽均用有机玻璃(或相应材料)板 C分成两部分;外格装有铂电极(直径0.5~0.8cm)D;里格为可放滤纸 E的有机玻璃电泳槽架F,此架可从槽中取出;两侧电泳槽A
聚丙烯酰胺凝胶电泳法的操作过程和所需仪器
1.仪器装置通常由稳流电泳仪和圆盘或平板电泳槽组成。其电泳室有上、下两槽,每个槽中都有固定的铂电极,铂电极经隔离电线接于电泳仪稳流挡上。2.试剂(1)溶液 A取三羟甲基氨基甲烷 36.6g,四甲基乙二胺0.23ml,加0.1mol/L盐酸溶液48ml,再加水溶解并稀释** 100ml,置棕色瓶内,在
琼脂糖凝胶电泳法的操作过程和所需仪器
1.仪器装置 电泳室及直流电源同纸电泳。2.试剂(1) 醋酸-锂盐缓冲液(pH3.0)取冰醋酸 50ml,加水800ml混合后,用氢氧化锂调节pH**3.0,再加水**1000ml。(2) 甲苯胺蓝溶液取甲苯胺蓝 0.1g,加水100ml使溶解。3.操作方法(1)制胶取琼脂糖约 0.2g,加水10m
醋酸纤维素薄膜电泳法的操作过程和所需仪器
1.仪器装置电泳室及直流电源同纸电泳。2.试剂(1) 巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥 2.76g,巴比妥钠15.45g,加水溶解使成1000ml。(2) 氨基黑染色液取 0.5g的氨基黑10B,溶于甲醇50ml、冰醋酸10ml及水40ml的混合液中。(3) 漂洗液取乙醇 45ml、冰醋酸5ml及
SDS-PAGE电泳所需仪器及步骤介绍
1、清洗玻璃板一只手扣紧玻璃板,另一只手蘸点洗衣粉轻轻擦洗。两面都擦洗过后用自来水冲,再用蒸馏水冲洗干净后立在筐里晾干。2、灌胶与上样(1)玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶(操作时要使两玻璃对齐,以免漏胶)。(2) 按前面方法配10%分离胶,加入TEMED后立即摇匀即可灌胶。灌胶
硫酸铵纯化法所需仪器和试剂
1.组织培养上清液、血清样品或腹水等 2. 硫酸铵( NH 4 ) SO 4 3. 饱和硫酸铵溶液( SAS ) 4. 蒸馏水 5. PBS( 含 0.2g /L 叠氮钠 ) 6. 透析袋 7. 超速离心机 8. pH 计 9. 磁力搅拌器
电极法测电导率所需仪器和试剂
仪器①容量瓶:1000ml。②烧杯:50ml。③电导仪。④恒温水浴器。试剂标准氯化钾溶液C(KCl)=0.01000mol/L:称取0.7455g氯化钾,溶解于重蒸蒸馏水中(重蒸蒸馏水必须煮沸以除去水中溶解的CO2,放冷后使用),移入1000ml容量瓶,用水稀释至标线。
Westernblot法实验所需仪器
伯乐生命bio-rad-Trans-Blot 转印槽是一种多功能仪器,适用于多种Westernblot法应用。功能和优点:能进行多胶转印多组参数灵活可设,可调节的电压设置(从30V的过夜转印到到 200 V的1 小时快速实验)。电极间距设置为8cm可用于标准转印,设置为4cm用于高强度转印。采用特级
DNA印迹法所需仪器试剂
仪器1电热真空干燥箱 2硝酸纤维素滤膜或尼龙膜 3大方瓷盘、带盖方盘、玻璃板 4滤纸、吸水纸、保鲜膜、蜡膜Parafilm、一次性手套等 5刀片、刻度吸管、镊子、剪刀、lkg重物 材料电泳分离DNA的琼脂糖凝胶试剂1 酸变性液:0.25mol/L HCl, 用分析纯的盐酸12Mol/L稀释 2碱变性
速测卡法(纸片法)测定农药残留所需的仪器和试剂
试剂①速测卡:固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片(广州天河绿洲生物化学研究中心)②pH7.5缓冲溶液:分别取15.0g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)与1.59g无水磷酸二氢钾(KH2PO4),用500mL蒸馏水溶解。仪器 常量天平,有条件时配备37℃±2℃恒温装置。
片剂质量差异检查法所需仪器和装置
(1)分析天平 感量0.1mg(适用于平均片重0.30g以下的片剂)或感量1mg(适用于平均片重0.30g或0.30g以上的片剂)。(2)扁形称量瓶。(3)弯头或平头手术镊。
崩解时限检查法所需仪器
仪器与用具(1)升降式崩解仪 主要结构为一个能升降的金属支架与下端镶有筛网的吊篮,并附有挡板。升降的金属支架上下移动距离为(55±2)mm,往返频率为30~32次/min[详见《中国药典》(2010版)二部附录X A的仪器装置]。①吊篮(含滴丸剂专用吊篮):玻璃管6根,管长(77.5±2.5)
凯氏定氮法所需仪器
定氮蒸馏装置:1.安全管2.导管3.汽水分离管4.样品入口5.塞子6.直型冷凝管7.吸收瓶8.隔热液套9.反应管10.蒸汽发生瓶
DNA印迹法所需的仪器试剂介绍
1电热真空干燥箱 2硝酸纤维素滤膜或尼龙膜 3大方瓷盘、带盖方盘、玻璃板 4滤纸、吸水纸、保鲜膜、蜡膜Parafilm、一次性手套等5刀片、刻度吸管、镊子、剪刀、lkg重物 二、材料 电泳分离DNA的琼脂糖凝胶
碘量法检测水中溶解氧所需仪器和试剂
碘量法需要准备250~300ml溶解氧瓶、25~50ml酸式滴定管、量筒、搅拌器和虹吸管、250ml锥形瓶、移液管等仪器。 试剂 (1)硫酸锰溶液:称取480 gAnSO·4H2O或364 gAnSO,·H2O溶于水,稀释至100ml。此溶液加至酸化过的碘化钾溶液中,遇淀粉不得产生蓝色。
气相色谱法检测氯乙烯所需仪器和试剂
仪器①具塞刻度管:5ml。②容量瓶:10ml。③气相色谱仪:其火焰离子化检测器。色谱柱:长3m、内径2mm玻璃柱,柱内填充GDX-502(80~100目)。④活性炭吸附采样管:可以购买或自己制作。试剂①二硫化碳:分析纯。②氯乙烯标准气:99.99%。
融变时限检查法所需仪器
仪器与用具(1)融变时限仪 由透明的套筒与金属架组成[详见《中国药典》(2010版)二部附录X B仪器装置]。①透明套筒:为玻璃或适宜的塑料材料制成,高为60mm,内径为52mm,及适当的壁厚。②金属架:由两片不锈钢的金属圆板及3个金属挂钩焊接而成。每个圆板直径为50mm,具39个孔径为4mm
关于电泳法—SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法的操作介绍
(1)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法— 制胶 用30%丙烯酰胺溶液-分离胶缓冲液-20%十二烷基硫酸钠溶液-10%过硫酸铵溶液(新鲜配制)-四甲基乙二胺-水(5.0∶1.5∶0.08∶0.1∶0.01∶5.3)制成分离胶液,灌入模具内至一定高度(剩余体积留作制备浓缩胶用),用水封顶,聚合完毕,倾去
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法的操作介绍
(1)制胶 用30%丙烯酰胺溶液-分离胶缓冲液-20%十二烷基硫酸钠溶液-10%过硫酸铵溶液(新鲜配制)-四甲基乙二胺-水(5.0∶1.5∶0.08∶0.1∶0.01∶5.3)制成分离胶液,灌入模具内至一定高度(剩余体积留作制备浓缩胶用),用水封顶,聚合完毕,倾去水层。再用30%丙烯酰胺溶液-浓
蛋白质的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理、仪器试剂和操作...
原理]蛋白质在十二烷基硫酸钠(SDS)和巯基乙醇的作用下,分子中的二硫键还原,氢键等打开,形成按1.4gSDS/1g蛋白质比例的SDS-蛋白质多肽复合物,该复合物带负电,故可在聚丙烯酰胺凝胶电泳中向正极迁移,且主要由于凝胶的分子筛作用,迁移速率与蛋白质的分子量大小有关,因此可以浓缩和分离蛋白质多肽。
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)实验原理和操作步骤
实验原理:SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其折叠结构,并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样品介质和凝胶
简述SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法的基本操作
(1)制胶 用30%丙烯酰胺溶液-分离胶缓冲液-20%十二烷基硫酸钠溶液-10%过硫酸铵溶液(新鲜配制)-四甲基乙二胺-水(5.0∶1.5∶0.08∶0.1∶0.01∶5.3)制成分离胶液,灌入模具内至一定高度(剩余体积留作制备浓缩胶用),用水封顶,聚合完毕,倾去水层。再用30%丙烯酰胺溶液-浓
重量差异检查法所需仪器装置
①电子天平 感量0.1mg(适用于平均片重0.3g以下的片剂);或感量1mg(适用于平均片重0.3g或0.3g以上的片剂)。②扁形称量瓶、平头手术镊。
装量差异检查法所需仪器装置
仪器装置①分析天平(感量0.1mg)②扁形称量瓶、小毛刷、剪刀、手术镊。
直接法测抗原的所需仪器和试剂
磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,pH7.4荧光标记的抗体溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PBS进行稀释缓冲甘油:分析纯无荧光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸盐缓冲液1份配制搪瓷桶三只(内有0.01mol/L,pH7.4的PBS 1500ml)有盖搪瓷盒一只(内铺一层浸湿的
氧化还原电位测定所需的仪器和试剂
仪器①毫伏计或通用pH计;②铂电极;③饱和甘汞电极或银-氯化银电极;④温度计;⑤1000 ml棕色广口瓶。试剂①纯水:本方法所用去离子水电导率要求小于2 μS/cm。在配制标准溶液前,应将去离子水煮沸数分钟,以驱除水中的二氧化碳,密塞冷却;②硫酸亚铁铵-硫酸高铁铵标准溶液;③硝酸溶液:(1+1);④
过滤所需实验仪器和操作步骤
实验仪器漏斗、烧杯、玻璃棒、铁架台(含铁圈)、滤纸。操作要领过滤布袋要做到“一贴、二低、三靠”。(见图)一贴即使滤纸润湿,紧贴漏斗内壁,不残留气泡。(防止气泡减慢过滤速度。)二低1.滤纸边缘略低于漏斗边缘。2.液面低于滤纸边缘。(防止液体过滤不净。)三靠1.倾倒时烧杯杯口要紧靠玻璃棒上。过滤海绵2.
分光光度计法(抑制率法)测定农药残留所需仪器和试剂
试剂①pH8.0缓冲溶液:分别取11.9g无水磷酸氢二钾与3.2g磷酸二氢钾,用1000mL蒸馏水溶解。②显色剂:分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)和15.6mg碳酸氢钠、用20mL缓冲溶液溶解,4℃冰箱中保存。③底物:取25.0mg硫代乙酰胆碱,加3.0m蒸馏水溶解,摇匀后置4℃冰箱中
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
试剂、试剂盒 丙烯酰胺单体贮液磷酸缓冲液贮液咪唑缓冲液贮液过硫酸铵 浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液SDSTEMED实验步骤 SDS 电泳的制胶方法与 “垂直平板电泳的制胶” 和 “水平平板电泳的制胶” 所述的常规聚丙烯酰胺凝胶的灌注方法基本相同,只是在 SDS 电泳制胶时单体贮液不需要抽气