电泳技术阴极电泳常见问题及解决方法
一、颗粒 (1)现象 在烘干后的电泳涂膜表面上有手感粗糙的、较硬的粒子,或肉眼可见的细小痱子,往往被涂物的水平面较垂直面严重,这种漆膜病态称为颗粒。 (2)产生原因 ①CED槽液PH值偏高,碱性物质混入,造成槽液不稳定,树脂析出或凝聚。 ②槽内有沉淀“死角”和裸露金属处。 ③电泳后清洗液脏、含漆量过高,过滤不良。 ④进入的被涂物面及吊具不洁,磷化后水洗不良。 ⑤在烘干过程中落上颗粒状污物。 ⑥涂装环境脏。 ⑦补给涂料或树脂溶解不良,有颗粒。 (3)防治方法 ①将CED槽液的PH值控制在下限,严禁带入碱性物质,加强过滤,加速槽液的更新。 ②消除易沉淀的“死角”和产生沉积涂膜的裸露金属件。 ③加强过滤,推荐采用精度为25μm的过滤元件,养活泡沫。 ④确保被涂面清洁,不应有磷化沉渣,防止二次污染。 ⑤清理烘干室和空气过滤器。 ⑥保持涂装环境清洁,检查并消除空气的尘埃源。 ⑦确保新补涂料溶解良好,......阅读全文
电泳技术阴极电泳常见问题及解决方法
一、颗粒 (1)现象 在烘干后的电泳涂膜表面上有手感粗糙的、较硬的粒子,或肉眼可见的细小痱子,往往被涂物的水平面较垂直面严重,这种漆膜病态称为颗粒。 (2)产生原因 ①CED槽液PH值偏高,碱性物质混入,造成槽液不稳定,树脂析出或凝聚。 ②槽内有沉淀“死角”和裸露金属处。 ③电泳后清
阴极电泳14个常见问题及解决方法
一、颗粒 (1)现象 在烘干后的电泳涂膜表面上有手感粗糙的、较硬的粒子,或肉眼可见的细小痱子,往往被涂物的水平面较垂直面严重,这种漆膜病态称为颗粒。 (2)产生原因 ①CED槽液PH值偏高,碱性物质混入,造成槽液不稳定,树脂析出或凝聚。 ②槽内有沉淀“死角
电泳常见问题及解决方法
一、颗粒 (1)现象 在烘干后的电泳涂膜表面上有手感粗糙的、较硬的粒子,或肉眼可见的细小痱子,往往被涂物的水平面较垂直面严重,这种漆膜病态称为颗粒。 (2)产生原因 ①CED槽液PH值偏高,碱性物质混入,造成槽液不稳定,树脂析出或凝聚。 ②槽内有沉淀“死角”和裸露金属处。 ③电泳后清洗液
电泳仪常见问题及解决方法
电泳仪常见问题及解决方法1、电泳仪的输出为何达不到设定值? 答:①电泳仪的输出状态遵守“欧姆定律”:电压U=电流I×(电泳槽)电阻R相对不变的情况下,U、I、P(功率P=电流I×电压U)中任意一个参数恒定,其他参数也随之恒定;而任意一个参数变化,其他参数也随之正比变化;②如果电泳仪的输出电压U达不到
电泳仪常见问题及解决方法
1、电泳仪的输出为何达不到设定值? 答: ①电泳仪的输出状态遵守“欧姆定律”:电压U=电流I×(电泳槽)电阻R相对不变的情况下,U、I、P(功率P=电流I×电压U)中任意一个参数恒定,其他参数也随之恒定;而任意一个参数变化,其他参数也随之正比变化; ②如果电泳仪的输出电压U达不到预置值,应
电泳设备及电泳技术应用范围
电泳:在直流电场中,带电荷的粒子向带符号相反的电极移动,称为电泳。电泳也是一种分离的方法和技术,就是分离和鉴定混合物中带电粒子(包括离子、高分子多电解质、胶体粒子、病毒颗粒以致活的细胞,如细菌和红细胞等)的技术。 电泳装置:由电泳仪(电源)和电泳槽(混合样品电泳时的支持物)组成。 电泳仪(电源):为
电泳设备及电泳技术应用范围
电泳:在直流电场中,带电荷的粒子向带符号相反的电极移动,称为电泳。电泳也是一种分离的方法和技术,就是分离和鉴定混合物中带电粒子(包括离子、高分子多电解质、胶体粒子、病毒颗粒以致活的细胞,如细菌和红细胞等)的技术。 电泳装置:由电泳仪(电源)和电泳槽(混合样品电泳时的支持物)组成。 电泳仪(电
电泳技术介绍及影响电泳的因素
一、基本知识和种类电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。例如蛋白质具有两性电离性质。当蛋白质溶液的pH在蛋白质等电点的碱侧时,该蛋白质带负电荷,在电场中向正极移动,相反则带正电荷,在电场中向负极移动,只有蛋白质溶液pH在蛋白质的等电点时静电荷是零,在电场中不向任何一极移动。电泳现
电泳技术介绍及影响电泳的因素
一、基本知识和种类 电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。例如蛋白质具有两性电离性质。当蛋白质溶液的pH在蛋白质等电点的碱侧时,该蛋白质带负电荷,在电场中向正极移动,相反则带正电荷,在电场中向负极移动,只有蛋白质溶液pH在蛋白质的等电点时静电荷是零,在电场中不向任何一极
电泳技术介绍及影响电泳的因素
一、基本知识和种类 电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。例如蛋白质具有两性电离性质。当蛋白质溶液的pH在蛋白质等电点的碱侧时,该蛋白质带负电荷,在电场中向正极移动,相反则带正电荷,在电场中向负极移动,只有蛋白质溶液pH在蛋白质的等电点时静电荷是零,在电场中不向任何一极
电泳技术
电泳技术简介 电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。 电泳技术的基本原理和分类
电泳技术
电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。 电泳技术的基本原理和分类 在电场中,推
电泳技术
电泳是指带粒子在电场中向与自身带相反电荷的电极移动的现象。例如蛋白质具 有两性电离性质。当蛋白质溶液的pH在蛋白质等电点的碱侧时,该蛋白质带负电荷, 在电场中向正极移动,相反则带正电荷,在电场中向负极移动,只有蛋白质溶液pH在 蛋白质的等电点时静电荷是零,在电场中不向任何一极移动。 电泳现象早在1
SDS-PAGE电泳过程的常见问题及解决方法
几乎所有蛋白质电泳分析都在聚丙烯酰胺凝胶上进行,而所有条件总要确保蛋白质解离成单个多肽亚基并进可能减少其相互间的聚集,最常用的就是SDS-PAGE电泳技术,关于大家在此过程中经常遇到的问题进行一些讨论: Q:SDS-PAGE电泳的基本原理? A:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶
电泳仪使用须知及常见问题解决方法
电泳仪的使用注意事项:1.电泳仪/电泳槽通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分,也不能到电泳槽内取放东西,如需要应先断电,以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端,以防漏电。2.仪器通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然仪器内部附设有保险丝,但短路现
电泳技术概述
电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团,它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以
电泳技术概述
电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子,如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团,它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电,在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下,由于待分离样品中各种分子带电性质以
火箭电泳技术
(一)原理抗原在含有抗体的凝胶中进行电泳,在电场作用下,抗原向一个方向移动,在移动的过程中,逐步与凝胶中的抗体结合而沉淀呈火箭状。沉淀峰面积越大,说明抗原量越多,二者呈正相关,因此可用于抗原的定量测定。此法具有敏感性高、快速等优点。(二)材料与试剂1.0.05mol/L pH8.6巴比妥缓冲液配成2
火箭电泳技术
(一)原理 抗原在含有抗体的凝胶中进行电泳,在电场作用下,抗原向一个方向移动,在移动的过程中,逐步与凝胶中的抗体结合而沉淀呈火箭状。沉淀峰面积越大,说明抗原量越多,二者呈正相关,因此可用于抗原的定量测定。此法具有敏感性高、快速等优点。 (二)材料与试剂1.0.05mol/L pH8.6巴比妥缓
电泳技术RNA电泳操作步骤
试剂: 琼脂糖(Agarose)、甲醛、甲酰胺、MOPS、EDTA、DEPC水。 步骤 一 、5 x MOPS-EDTA Buffer的配制(0.1 M MOPS pH7; 5mM EDTA; 10mM NaAc) 1. 称量20.9g的MOPS,置于1L烧杯中。 2. 加700mL
电泳仪常见问题及其解决方法介绍
一、电泳仪的输出达不到设定值 答:电泳仪的输出值状态遵“循欧姆定律”:电压U=电流I×(电泳槽)电阻R 电阻R相对不变的情况下,U、I、P(功率P=电流I×电压U)中任意1个参数恒定,其他参数也随之恒定;而任意1个参数变化,其他参数也随之正比变化。 如果电泳仪的输出电压U达不到预置值,
电泳仪常见问题及其解决方法介绍
电泳仪常见问题及其解决方法介绍 一、电泳仪的输出达不到设定值 答:电泳仪的输出值状态遵“循欧姆定律”:电压U=电流I×(电泳槽)电阻R 电阻R相对不变的情况下,U、I、P(功率P=电流I×电压U)中任意1个参数恒定,其他参数也随之恒定;而任意1个参数变化,其他参数也随之正比变化。 如果电泳仪的输出
电泳仪常见问题解决方法
一、电泳仪的输出达不到设定值答: 电泳仪的输出值状态遵“循欧姆定律”:电压U=电流I×(电泳槽)电阻R电阻R相对不变的情况下,U、I、P(功率P=电流I×电压U)中任意1个参数恒定,其他参数也随之恒定;而任意1个参数变化,其他参数也随之正比变化。如果电泳仪的输出电压U达不到预置值,应首先观察I
电泳技术原理、分类及分析方法(三)
(四)其他电泳技术⒈IEF/SDS-PAGE双向电泳法 1975年O′Farrall等人根据不同组份之间的等电点差异和分子量差异建立了 IEF/SD S-PAGE双向电泳。其中IEF电泳(管柱状)为第一向,SDS-PAGE 为第二向(平板)。在进行第一向IEF电泳时,电泳体系中应加入高浓度尿
电泳技术原理、分类及分析方法(五)
四、聚丙烯酰胺凝胶电泳法1.仪器装置通常由稳流电泳仪和圆盘或平板电泳槽组成。其电泳室有上、下两槽,每个槽中都有固定的铂电极,铂电极经隔离电线接于电泳仪稳流挡上。2.试剂(1)溶液 A取三羟甲基氨基甲烷 36.6g,四甲基乙二胺0.23ml,加0.1mol/L盐酸溶液48ml,再加水溶解并稀释至 10
电泳技术原理、分类及分析方法(六)
五、SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳法SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白分子量,是根据大多数蛋白都能与阳离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)按重量比结合成复合物,使蛋白分子所带的负电荷远远超过天然蛋白分子的负电荷,消除了不同蛋白分子的电荷效应,使蛋白分子相对迁移率(R'')的大小完全
电泳技术原理、分类及分析方法(四)
二、醋酸纤维素薄膜电泳法1.仪器装置电泳室及直流电源同纸电泳。2.试剂(1) 巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥 2.76g,巴比妥钠15.45g,加水溶解使成1000ml。(2) 氨基黑染色液取 0.5g的氨基黑10B,溶于甲醇50ml、冰醋酸10ml及水40ml的混合液中。 (3) 漂洗液取乙醇
电泳技术原理、分类及分析方法(二)
(二)凝胶电泳以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法 称为凝胶电泳。其中聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。琼脂糖凝胶孔径较大,对一般蛋白质不起分子筛作用,但适用于分离同
电泳技术原理、分类及分析方法(一)
电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。电泳技术的基本原理和分类在电场中,推动带电质点运
电泳技术简单介绍
电泳技术原理(以琼脂糖凝胶电泳为例) 1、首先介绍使用的载体--琼脂糖。 琼脂糖是线性的多聚物,基本结构是1,3连结的β-D-半乳呋喃糖和1,4连结的3,6-脱水α-L-半乳呋喃糖。琼脂果胶是由许多更小的分子组成的异质混合物。琼脂糖在水中一般加热到90℃以上溶解,温度下降到35-40℃时形