什么是Westernblot法?

Westernblot法即是一种将电泳与KIJSA结合起来的技术,可分为电泳、转印、酶免疫测定3个阶段。Westernblot法结合了电泳的高分辨率和酶免疫测定的高敏感性和特异性,是一种能用于分析样本组分的免疫学测定方法。......阅读全文

什么是Westernblot法?

Westernblot法即是一种将电泳与KIJSA结合起来的技术,可分为电泳、转印、酶免疫测定3个阶段。Westernblot法结合了电泳的高分辨率和酶免疫测定的高敏感性和特异性,是一种能用于分析样本组分的免疫学测定方法。

Westernblot法的应用

Westernblot法应用分子生物学、生物化学和免疫遗传学中时常会用到的一种实验方法,并且是一种能对蛋白进行定性和半定量的分析方法。是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色,并且通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息。蛋白质分析中应用的

Westernblot法实验所需仪器

伯乐生命bio-rad-Trans-Blot 转印槽是一种多功能仪器,适用于多种Westernblot法应用。功能和优点:能进行多胶转印多组参数灵活可设,可调节的电压设置(从30V的过夜转印到到 200 V的1 小时快速实验)。电极间距设置为8cm可用于标准转印,设置为4cm用于高强度转印。采用特级

Westernblot法的起源和发展

生物大分子印迹法实际上是凝胶电泳技术、固定化技术及分子亲和技术三者融为一体的综合性技术,其核心在于把凝胶电泳已分离的区带转移并印迹于固定化纸上。生物大分子印迹法始创于1975年,内苏格兰爱丁堡大学E.M.Southern首先提出。他将限制酶切后的DNA片段先进行琼脂糖凝胶电泳,把一张硝酸纤维素纸放在

Westernblot

实验概要免疫印迹是一个用于蛋白质分析的常规技术,在电场的作用下将电泳分离的蛋白从凝胶转移至一种固相支持物,然后利用抗原—抗体的特异性反应,从蛋白混合物中检测出目标蛋白,从而定量或定性地确定正常或实验条件下细胞或组织中目标蛋白的表达情况。Western blot还可用于蛋白—蛋白、蛋白—DNA

WesternBlot胶片是一片空白是怎么回事?

如果能够排除下面的几个问题那么问题多半出现在一抗和抗原制备上。1)二抗的HRP 活性太强,将底物消耗光;2)ECL底物中H2O2不稳定,失活;3) ECL底物没覆盖到相应位置;4)一抗选择不当;5)二抗失活。

什么是层析法

层析法又称纸色谱法。以纸为载体的色谱法。固定相一般为纸纤维上吸附的水分,流动相为不与水相溶的有机溶剂;也可使纸吸留其他物质作为固定相,如缓冲液,甲酰胺等。将试样点在纸条的一端,然后在密闭的槽中用适宜溶剂进行展开。当组分移动一定距离后,各组分移动距离不同,最后形成互相分离的斑点。将纸取出,待溶剂挥发后

什么是极差法

极差法就是指使用该组数据中的最大值减去最小值。在计算一组数据的离散度时,最简便的方法就是使用这组数据中的最大值减去这组数据的最小值,目的就是为了观测变量的最大观测值与最小观测值之间的区间跨度。

什么是极差法

极差法就是指使用该组数据中的最大值减去最小值。在计算一组数据的离散度时,最简便的方法就是使用这组数据中的最大值减去这组数据的最小值,目的就是为了观测变量的最大观测值与最小观测值之间的区间跨度。

什么是内标法

内标法在色谱分析中是一种常用的定量分析法。它尤其广泛的应用于高压液相色谱中。这种方法可以抵消仪器和过程带来的误差。 将一定量的某种纯物质,作为内标物加入到已知重量的样品中,进行色谱分析,内标物在色谱图上得到分离的峰。根据已知含量的内标物的峰面积和样品的峰面积,计算组分的百分含量。只要主要组分能被分离

什么是超滤法?

超滤法 超滤是利用半透膜的微孔结构,以一定的外界压力(0.1~0.5 MPa)为推动力,实现对物质的选择性分离、回收的膜分离方法。在污水处理中主要用于分离分子量大于500、直径为0.005~10μm的大分子和胶体,如酶、蛋白质、病毒等中低浓度的高分子溶解态及胶体态污染物的分离与回收。超滤技术由于操作

什么是内标法?

内标法在色谱分析中是一种常用的定量分析法。它尤其广泛的应用于高压液相色谱中。这种方法可以抵消仪器和过程带来的误差。 将一定量的某种纯物质,作为内标物加入到已知重量的样品中,进行色谱分析,内标物在色谱图上得到分离的峰。根据已知含量的内标物的峰面积和样品的峰面积,计算组分的百分含量。只要主要组分能被分离

什么是包埋法?

包埋法是制备固定化酶或固定化细胞的一种方法,是将酶或细胞包埋在能固化的载体中。如将酶包裹在聚丙烯酰胺凝胶等高分子凝胶中,或包裹在硝酸纤维素等半透性高分子膜中,前者包埋成格子型,后者包埋成微胶囊型。包埋法常用于微生物、动物和植物细胞的固定化,凝胶包埋法是应用最广泛的细胞固定化方法。

什么是电泳法?

  【电泳法】是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其含量(%)的方法。    【分类】   ● 1.纸电泳法 

什么是电泳法?

  电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其含量(%)的方法。

什么是MTT法?

MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲臜,用酶联免疫检测仪在570nm波长处测定其光吸收值,可间接反映

什么是GCMS法

GCMS是GC与MS一体化的装置,检测化合物是什么(定性)和多少(定量)的精密分析仪器。GC通过将气化的样品进入到色谱柱内进行分离,分离之后的化合物进入MS内进行检测

什么是重铬酸钾法

重铬酸钾法的原理是在强酸性溶液中,一定量的重铬酸钾氧化水样中还原性物质,过量的重铬酸钾以试亚铁灵作指示剂、用硫酸亚铁铵溶液回滴。根据用量算出水样中还原性物质消耗的氧。酸性重铬酸钾氧化性很强,可氧化大部分有机物,加入硫酸银作催化剂时,直链脂肪族化合物可完全被氧化,而芳香族有机物却不易被氧化,吡啶不被氧

什么是表面铺展法?

中文名称表面铺展法英文名称surface-spread method定  义使切片铺展于玻片或载网上的操作技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

什么是比浊法?

比浊法又称浊度测定法。为测量透过悬浮质点介质的光强度来确定悬浮物质浓度的方法,这是一种光散射测量技术。是利用透射光强度(I)与入射光强度(Io)的比值I/Io,或用 散射光强度(Is)与入射光强度(Io)的比值 Is/Io,测定悬浊物质含量的方法。

什么是布ELISA法?

(C-ELISA) C-ELISA(Cloth-ELISA)是加拿大学者Blais,B. W.等于1989年建立的一种新型免疫检测技术。该方法是以疏水性聚脂布(Hydrophobic Polyester Cloth)即涤纶布为固相载体,这种大孔径的的疏水布具有吸附样品量大,可为免疫反应提供较大的表面

什么是标准曲线法

标准曲线法也称外标法或直接比较法,是一种简便、快速的定量方法.与分光光度分析中的标准曲线法相似,首先用欲测组分的标准样品绘制标准曲线.具体方法是:用标准样品配制成不同浓度的标准系列,在与待测组分相同的色谱条件下,等体积准确进样,测量各峰的峰面积或峰高,用峰面积或峰高对样品浓度绘制标准曲线,此标准曲线

什么是酶标法?

  酶联免疫吸附试验方法简称酶标法,是标记技术中的一种,是从荧光抗体技术,同位素免疫技术发展而来的一种敏感,特异,快速并且能自动化的现代技术。  酶标法的基本原理是将抗原或抗体与酶用胶联剂结合为酶标抗原或抗体,此酶标抗原或抗体可与固相载体上或组织内相应抗原或抗体发生特异反应,并牢固地结合形成仍保持活

什么是切口平移法?

双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 利用微量的DNA酶Ⅰ使待标记的双链DNA分子产生若干切口,然后利用DNA聚合酶Ⅰ的5'→3'外切酶活性从从切口的5'端除去核苷酸;同时DNA聚合酶Ⅰ还有5

什么是原子吸收法

原子吸收法是基于空心阴极灯发射出的待测元素的特征谱线,通过试样蒸气,被蒸气中待测元素的摹态原子所吸收。由特征谱线被减弱的程度,来测定试样中待测元素含量的方法。

什么是减压干燥法?

减压干燥法是指在减压下干燥的方法。在减压条件下,可降低干燥温度和缩短干燥时间,故适用于熔点低,受热不稳定及水分难赶除的药物。有的药物熔点低,或对热不稳定不能加热,可在减压干燥器中采用减压下干燥剂干燥的方法。如布洛芬熔点为74.5~77.5℃,规定在五氧化二磷干燥器中减压干燥至恒重。肾上腺素规定在五氧

什么是外标法

这是色谱定量分析中较早使用的一种方法,应用比较广泛。此方法的中心内容是需要用预测组分的标准物(或称对照样品)作出峰高或峰面积对含量(重量或浓度)的校正曲线。校正曲线通常是线性的,并且外推通过原点。绘制校正曲线,可将标准物配成数分不同浓度的溶液,然后取不同的量分别进行定量分析(每次分析都在完全相同的条

什么是溶胶凝胶法?

  溶胶-凝胶法就是用含高化学活性组分的化合物作前驱体,在液相下将这些原料均匀混合,并进行水解、缩合化学反应,在溶液中形成稳定的透明溶胶体系,溶胶经陈化胶粒间缓慢聚合,形成三维网络结构的凝胶,凝胶网络间充满了失去流动性的溶剂,形成凝胶。凝胶经过干燥、烧结固化制备出分子乃至纳米亚结构的材料。

什么是色谱法

色谱法是一种利用各组分在两相中性能上的差异,使混合物中各组分分离的技术。它是分离、纯化有机物或无机物的一种重要方法,对于复杂混合物、相似化合物的异构体或同系物等的分离非常有效。将色谱法与适当的监测器结合,就构成了色谱分析法。其一般原理是当混合物随流动相流经色谱柱时,会与柱中固定相发生作用(溶解、吸附

什么是原子吸收法

  原子吸收分光光度法的测量对象是呈原子状态的金属元素和部分非金属元素,是由待测元素灯发出的特征谱线通过供试品经原子化产生的原子蒸气时,被蒸气中待测元素的基态原子所吸收,通过测定辐射光强度减弱的程度,求出供试品中待测元素的含量。  原子吸收分光光度法的测量对象是呈原子状态的金属元素和部分非金属元素,