转染时细胞融合度汇合度为什么要那么高
汇合度(我称之为铺满度)本身就不是一个很精确的指标。它用来衡量细胞在培养皿中的总的生长情况。其意义在于sub-confluence,就是不要铺满以免密度抑制,为我们试验的时间选择和培养的传代时间提供一个粗略的参考。我看国外的文献都是说about70%(一个范围,因为在一定的范围内细胞的状态是可以被认为相同的)的confluence。引用自丁香园战友erythrocyte2005 ;在Gibco细胞培养基本知识手册中有提到汇合状态一词,其原句如下:原代培养是指将 细胞从组织中分离后,使其在合适的条件下增殖直到占据所有可用基质(即:达到汇合状态)的培养阶段。一般的转染试剂比如Lipofectamine™2000是具有细胞毒性的,汇合度高一点也就是细胞密度大一点会对转染试剂具有耐受性,但是细胞密度过大又会影响后续的实验,所以要根据所养细胞类型及状态与后续实验目的安排,合理选择细胞汇合度,汇合度的判断一般可以凭借经验粗略判断。......阅读全文
转染时细胞融合度汇合度为什么要那么高
汇合度(我称之为铺满度)本身就不是一个很精确的指标。它用来衡量细胞在培养皿中的总的生长情况。其意义在于sub-confluence,就是不要铺满以免密度抑制,为我们试验的时间选择和培养的传代时间提供一个粗略的参考。我看国外的文献都是说about70%(一个范围,因为在一定的范围内细胞的状态是可以被认
转染时细胞融合度汇合度为什么要那么高
汇合度(我称之为铺满度)本身就不是一个很精确的指标。它用来衡量细胞在培养皿中的总的生长情况。其意义在于sub-confluence,就是不要铺满以免密度抑制,为我们试验的时间选择和培养的传代时间提供一个粗略的参考。我看国外的文献都是说about70%(一个范围,因为在一定的范围内细胞的状态是可以被认
萃取时为什么要震荡
震荡是为了萃取更完全...至于放气....貌似没这样的情况,因为萃取不是化学反应..是不是题目有出入?
细胞转染为什么要换无双抗培养基
影响细胞状态吧,抗生素这种东西,即使是平时培养细胞的时候,能不加也最好不加,尤其是细胞转染的时候,细胞更容易死,所以不要用双抗。
萃取时振荡后为什么要放气
一般在分离实验时都会发生化学或是物理上的反应,如果震荡后不打开瓶塞放气的话,在萃取分离时容器内会产生压力,导致流速过快而无法控制分离,从而实验也会失败;另一方面也是因为如果瓶内溶液间产生气体,而不及时放气,则会导致容器内气体的增加,压力也随之增大,有爆炸的可能;所以做这些实验时需格外留心,按照实验步
做液相色谱时为什么要进预液调节灵敏度
不论做什么色谱样品都需要调节灵敏度。这个和样品的浓度有关系。否则有可能谱图会出现平头峰。或者痕量物质检测不到。
浅析纸张为什么要测试挺度
机械挺度仪纸张挺度是纸的一项重要的指标,但也不是所以企业都会自己测试,主要是造纸厂、印刷厂、以及一些大型的高质量企业才会进行测试。因为测试挺度重要的是用到纸张挺度仪,一般企业工厂是很少用的,除非是国外市场必须的。 下面为大家讲解一下纸张为什么要测试挺度。电子挺度仪 1、纸张印刷使用 在纸张印刷
测旋光度时为什么要进行校正
旋光仪是用来测定光学活性物质旋光能力大小和方向的仪器。光学活性物质可以旋转偏振光平面,其大小和方向除了与该物质结构有关外,还与测定时的温度、所用光的波长、溶液的浓度和溶剂、旋光管的长度等有关。一般单色光源用钠光灯,波长为589nm,以D表示。规定以每毫升溶液所含溶质的克数作为质量浓度的单位。由旋光仪
薄层色谱点样时为什么要少量多次
如果点样量多而分散,在展开时会将斑点跑偏,而影响旁边的点的展开,Rf值也会受到影响
怀疑肾病时为什么要首先检查尿液?
尿液是人体重要的排泄物之一,机体的代谢废物、毒物及多余的水分,大部分都要通过尿液排出体外,而肾脏是生成尿液、排泄尿液、排泄毒素的专职器官,整个尿排泄的过程都要由肾脏来完成。当肾脏发生病变时,尿液首先发生变化,尿量不是多就是少,尿的成分也会出现异常改变,当尿中出现蛋白、红细胞、白细胞、管型时,就说明肾
为什么高频时要考虑电容的影响
电容的特性之一就是,对高频阻抗(容抗)较小,对低频阻抗较大。当频率很高时,看不见的“分布电容”会对电路产生的影响,严重时会发生自激振荡(后级的信号会通过分散电容反馈到前级,循环放大);距离相近的不同回路之间会产生影响。频率较低时,“分布电容”对电路影响可以忽略。
电泳涂装时,为什么要实行分段电压
电泳时,在通电的一瞬间冲击电流很高,一般12-15A/平米,因此为避免高冲击电流对整流柜的损害,一般都采用低压段、高压段两段电压。
菌种保藏时为什么要进行分离纯化?
分离纯化后才能获得单一菌株,单一菌株进行菌种保藏才有意义,防止菌种交叉污染和变异,这也是菌种保存的基本原则。
铺板不到24h细胞90%融合度可以转染吗
可以的。不过转染效率会低一些。你的细胞要是长得很快,你可以细胞贴下去就转染,不需要等一天的。
原子吸收检测锂时为什么要加钾盐
原子吸收检测锂时不需要加钾盐。我以前做锂提取时,用原子吸收直接测氯化锂溶液,不用加其它盐类的。配溶液时需要浓度高一点,检测结果才精确。不然检测数值一直不太稳定,跳跃性太大,误差比较大。
使用高效液相色谱时为什么要脱气
HPLC所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。(噪声增大,基线不稳,突然跳动)。此外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化,对分离或分析结果
使用高效液相色谱时为什么要脱气
HPLC所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。(噪声增大,基线不稳,突然跳动)。此外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化,对分离或分析结果
为什么测定烟尘浓度时要采用等速采样
详解烟气烟尘自动化测试仪的工作原理很多时候客户在询问锅炉烟气余热回收设备的时候,会需要到烟气的含尘量以及烟气量等等工况数值,但是部分客户未能测量。该测试仪可有效实现烟气烟尘的全自动化测试,给出具体的工况。全自动烟尘烟气测试仪是基于新版《空气与废气监测分析方法》及JJG 680-2007《烟尘采样器检
使用高效液相色谱时为什么要脱气
HPLC所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。(噪声增大,基线不稳,突然跳动)。此外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化,对分离或分析结果
为什么要质粒转染
转染(transfection):指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染(永久转染)两大类。转染目的:研究你的目的片段到细胞内的表达。转染一般是将目的基因构建到某个载体,将构建好的重组质粒导入细胞中,这样就能表达你所要的目的蛋白用于后续实验。
PNAS:戒烟为什么那么难?
近日,科研人员发现了大脑的一组神经元可能通过在戒烟期间增加对尼古丁的响应从而破坏戒烟的努力。 此前的研究已经证明了尼古丁与大脑中的尼古丁乙酰胆碱受体(nAChRs)结合,随着时间的推移,持续的结合可能改变神经回路从而促进成瘾。尼古丁乙酰胆碱受体(nAChRs)的α3、β4和α5亚单位在重尼
转染时质粒怎么定量
质粒是先用分光光度计定浓度的,然后根据你转染的方法,转染细胞的多少确定要转多少质粒,然后就可以算加入的体积了.
血液中提取DNA时为什么要分离白细胞
提的是白细胞的,提之前会先把红细胞全部破碎洗掉才加酶消化呢
细胞培养时为什么要加入胎牛血清?
许多临床和做科研的小伙伴们都要涉及到细胞培养,在细胞培养实验中,血清无疑成为影响实验成功与否的重要因素,而在众多血清之中,牛血清是最为常用的。牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,其中含有丰富的细胞生长所必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。牛血清是一种成分复杂的混合物,而
制备硫酸亚铁时,为什么要保持铁过量
因为制备硫酸亚铁是用硫酸和铁反应。那么我们用离子反应来表示可以看作是硫酸和铁先生成三价铁离子,然后三价铁再和铁反应生成二价铁离子。所以铁必须过量,而且二价铁易被氧化,而过量的铁可以抑止二价铁的氧化。硫酸亚铁是一种无机物,化学式为FeSO4,外观为白色粉末无气味。其结晶水合物为在常温下为七水合物,俗称
为什么欧姆表换挡时要调零电阻?
欧姆表是多用表的一个单元,用来测量电阻的阻值。 1.原理 将电池组、电流表和变阻器相串联构成欧姆表的内电路。 1)测量态 给欧姆表的两表笔之间接上待测电阻,则电池组、电流表和变阻器及待测电阻构成闭合电路,电路中的电流随被测电阻的变化而变化,将电表的电流刻度值改为
测定馏程时为什么要严格控制加热速度
测定馏程要严格控制加热速度,因为石油产品馏程的测定时条件试验。根据蒸馏油品馏分轻重不同,所规定的加热速度也不同。规定从开始加热到初馏点的时间,车用汽油、航空汽油、喷气燃料为5-10min,轻柴油为5-15min;重油为5-20min;初馏点到5%回收体积的时间车用汽油、航空汽油为60-75s;此后
测定吸光度时,为什么要选择参比溶液
参比溶液是为了消除其除了本身的物质以外的外在影响因素;原则也就是除了需要测定的物质,其余的都要相同。参比液中应不含被测物及不含影响被测元素吸收单色光有干扰的物质,一般可以用蒸馏水做参比,有的实验需要扣除空白,这时的参比是和试样一样的处理方法,除了不含被测物质之外。如果仅有显色剂与被测组分反应的产物有
为什么在菌种保存时,要上下颠倒?为什么不能旋摇?
上下颠倒,可使菌悬液充分混匀,菌株充分、均匀地吸附到小瓷珠上。旋摇不利于菌悬液充分混匀,反而会使菌株全部沉淀于管底。
细胞转染率低-转染试剂要全背锅吗?
细胞转染低都是PCR试剂的问题吗?PCR纯度不够确实会有这样的问题,所以选择PCR试剂很重要 主要还是以下几点影响:1. 其他微生物污染您觉得您养的细胞 ,不,不,不 ,可能您只知道您养的是细胞,你不知道的是您的细胞可能背着您养了一群小三,比如支原体,病毒,黑胶虫等等,特别是支原体它可以更改细胞的特