实验室分析方法高效色谱法的基本概念
一、基本概念和术语1、色谱图和峰参数色谱图(chromatogram):样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elution profile)。基线(base line):经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。噪声(noise):基线信号的波动。通常由电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。漂移(drift):基线随时间的缓缓变化。主要由操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起,柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。色谱峰(peak):组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线(高斯曲线)。不对称色谱峰有两种:前延峰(leading peak)和拖尾峰(tailing peak)。前者少见。拖尾因子(tailing factor,T):用以衡量色谱峰......阅读全文
实验室分析方法高效色谱法的基本概念
一、基本概念和术语1、色谱图和峰参数色谱图(chromatogram):样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elution profile)。基线(base line):经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。噪声(nois
实验室分析方法高效液相色谱法概念介绍
高效液相色谱法 (HPLC, high performance liquid chromatography)具有高分离效能的柱液相色谱法。
实验室分析方法高效液相色谱法的固定相的分类
(1)按固定相承受压力分:刚性固体:以二氧化硅为基质,可承受较高压力,表面可键合各种功能官能团---键合固定相,是目前应用最广泛的固定相。硬胶:主要用于离子交换色谱法和凝胶色谱法中,由聚苯乙烯与二乙烯基苯交联而成,可承受的压力较低。(2)按孔隙深度分:表面多孔型:基体是球形玻璃珠,在玻璃表面涂覆一层
实验室分析方法高效液相色谱法对流动相的要求
流动相不与色谱柱发生不可逆化学变化,以保持柱效或柱子的保留性质较长时间不变;对待测样品有足够的溶解能力;与所用检测器相匹配;粘度尽可能小,以获得较高的柱效;流动相纯度要高,价格便宜,毒性小。
实验室分析方法色谱法高效液相色谱柱的正确使用方法
1.加装保护柱 保护柱的作用是过滤掉来自流动相和样品的化学“拉圾”同时也可以有效除去流动相和样品中的不溶物。尽管现在的色谱仪在流动相吸入口、进样阀后部以及在色谱柱的两端都装有1、2μm等不同孔径的滤器,但滤器只能除去不溶性颗粒而不能除去化学污然,因此,加装保护柱是必要的,特别是在分析中药、中成
实验室分析仪器高效液相色谱法的特点
1、高压液相色谱法以液体作为流动相(称为载液),液体流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了迅速通过色谱柱,必须对载液施加高压。在现代液相色谱法中供液压力和进样压力都很高,一般可达到15~35MPa。2、高速高效液相色谱法所需的分析时间较经典液相色谱法少得多,一般都小于1h,例如,分离苯的羟基化合物七个组
高效液相色谱法的计算方法
高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入供试品,由流动相带入柱内,在柱内各成分被分离后,依次进入检测器,色谱信号由记录仪或积分仪记录。1.对仪器的一般要求 所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料和流动相的组分应
高效液相色谱法的计算方法
楼主,您好。 高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入供试品,由流动相带入柱内,在柱内各成分被分离后,依次进入检测器,色谱信号由记录仪或积分仪记录。 1.对仪器的一般要求 所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料
有效的分离方法─高效液相色谱法
王俊玲的高效液相色谱仪分离方法有传统的蒸馏、结晶、萃取、萃取等。随着生命科学的兴起,出现了离心电泳离子交换膜技术和高效液相色谱仪技术等新的分离技术。近年来,高效液相色谱仪的发展引起了人们的特别关注。色谱法可以追溯到1906年。当俄罗斯的Zhiwuxuejiaci维持植物色素的分离时,他首先应用色谱法
高效液相色谱法的计算方法
2(t-t) R= ──W+W 式中 t为相邻两峰中后一峰的保留时间; t为相邻两峰中前一峰的保留时间; W及W为此相邻两峰的峰宽。 除另外有规定外,分离度应大于1.5。 (3) 拖尾因子 为保证测量精度,特别当采用峰高法测量时,应检查待测峰的拖尾因子(T)是否符合各品种项下的规定,
实验室分析方法色谱法的概念
色谱法是一种分离分析方法。它利用样品中各组分与流动相和固定相的作用力不同(吸附、分配、交换等性能上的差异),先将它们分离,后按一定顺序检测各组分及其含量的方法。
—高效液相色谱法测定腺苷的方法计算
方法名称灵芝子珍珠口服液—腺苷的测定—高效液相色谱法应用范围本方法采用高效液相色谱法测定灵芝子珍珠口服液中腺苷的含量。本方法适用于灵芝子珍珠口服液。方法原理取供试品加甲醇,超声处理,放置待沉淀完全,滤过,取许滤液蒸干,残渣加水溶解,以水饱和的正丁醇提取,正丁醇提取液蒸干,残渣加50%甲醇溶解并定容,
实验室分析方法色谱法色谱柱的保存方法
如果色谱柱不使用,又该如何进行保存呢?下列方法可供参考: 在柱二端包起来,放到盒子里室温避光保存。毛细管柱可以用废旧的隔垫裁成二块,分别插在毛细管二段。填充柱用小塑料袋套住,再用细金属丝扎起来。因为分析室有许多化学试剂,特别在橱内会有些气味,这样能较好保管色谱柱。放置时也要有序放置,毛细管柱还
实验室分析方法液相色谱法概述
色谱学作为最强的现代分离分析手段,已经走过百年历史。尤其是近30年来,不仅原有的气相色谱、液相色谱、薄层色谱、凝胶渗透色谱和纸色谱等色谱学分支得到了较大的发展,而且毛细管电泳、毛细管电色谱、逆流色谱等新型色谱分离模式也不断问世,标志着这一古老又新型的学科有着强大生命力和重要的应用价值。色谱法的发展得
实验室分析方法液相色谱法分类
液相色谱法分类按固定相形态分类按作用原理分类按物理特征分类固定相名称原理名称特征名称液体液-液色谱分配液-液分配色谱平面固定相平面色谱固体液-固色谱吸附液-固吸附色谱纸固定相纸色谱分子大小体积排阻色谱薄层固定相薄层色谱离子交换能力离子交换色谱颗粒固定相填充填充色谱亲和力亲和色谱色谱柱中空空心柱色谱
实验室分析方法凝胶色谱法原理
凝胶色谱法的固定相为多孔性凝胶类物质,流动相为水溶液或有机溶剂,它是根据不同组分分子体积的大小进行分离的。小分子可以扩散到凝胶空隙,由其中通过,出峰最慢;中等分子只能通过部分凝胶空隙,中速通过;而大分子被排斥在外,出峰最快;溶剂分子小,故在最后出峰。全部在死体积前出峰;可对相对分子质量在100-10
实验室分析方法高效色谱柱原理
高效液相色谱理论1、塔板理论①塔板理论介绍:塔板理论是 Martin 和 Synger 首先提出的色谱热力学平衡理论。它把色谱柱看作分馏塔,把组分在色谱柱内的分离过程看成在分馏塔中的分馏过程,即组分在塔板间隔内的分配平衡过程。这个理论假设:色谱柱内存在许多塔板,组分在塔板间隔(即塔板高度)内完全服从
反相高效液相层析的基本概念
中文名称反相高效液相层析英文名称reversed-phase high-performance liquid chromatography;RP-HPLC定 义固定相颗粒表面为非极性材料(如含C18链),流动相为极性的一种高效层析。通过这类反相层析柱的分子按其极性大小移动,极性越大移动越快。应用学
高效液相色谱所用基本概念
保留值等色谱分析有关术语,以及分配系数、分配比、塔板高度、分离度、选择性等方面均与气相色谱相一致;高效液相色谱所用基本理论:塔板理论与速率理论也与气相色谱一致。因液相色谱以液体代替气相色谱中的气体作流动相,则速率议程H=A+B/?+C?。式中:纵向扩散项(分子扩散项)B/?对板高的影响与气相色谱不同
实验室分析方法差示扫描量热法基本概念
差示扫描量热法简称DSC,是六十年代以后研制出的一种热分析方法。它是在程序温度控制下测量物质与参比物之间单位时间的能量差(或功率差)随温度变化的一种技术。这项技术被广泛应用于一系列应用,它既是一种例行的质量测试和作为一个研究工具。在1977年国际热分析协会(ICTA)的命名委员会的第四次报告中,把D
如何建立高效液相色谱法测定含量的方法
1 色谱条件的确定专属性是色谱条件建立的关键通常是采用在被测物对照品(或供试品)中加入适量的杂质或辅料以验证所选色谱条件能否将各杂质与被测物分离检出[2]。应按1(w/w)被测物浓度的各杂质量添加至被测物中模拟被测物中可能存在杂质的状态即有少量(约1)杂质存在时能否与被测物达到完全分离(
高效液相色谱法的定量分析方法
高效液相色谱法(HPLC)是一种常用的分离和分析方法,常用于有机物、生物大分子、离子、蛋白质、糖类等物质的分离和测定。在HPLC分析中,常用的定量分析方法有外标法、内标法和归一法。外标法:此方法是通过比较样液与标准溶液中目标物质的峰面积来确定样液中目标物质的含量。内标法:此方法是在样液中加入一种内标
高效液相色谱法测定叶黄素的方法介绍
高效液相色谱法是一种灵敏性强、高效、快速的分离方法,能精确检测各种组分在其样品中的含量,是使用的最广泛的对叶黄素进行定量分析的检测方法。该方法具有较高的精确性、稳定性好,能够高效、快速的检测样品中叶黄素的成分含量 。
高效液相色谱法常用的定量方法内标法
内标法 按品种正文项下的规定,精密称(量)取对照品和内标物质,分别配成溶液,各精密量取适量,混合配成校正因子测定用的对照溶液。取一定量进样,记录色谱图。测量对照品和内标物质的峰面积或峰高,按下式计算校正因子: 式中 AS为内标物质的峰面积或峰高; AR为对照品的峰面积或峰高; cs为内标
实验室分析方法正相液相色谱法方法发展
正相液相色谱方法建立的一般模式与反相液相色谱类似。正相液相色谱的色谱柱选择范围较宽,氰基柱通常是首选;与氰基柱相比,硅胶柱可获得更大的值,适合于异构体和疏水性溶质的分离,但分析时必须严格控制流动相中水含量,也不适于梯度分离:二醇基柱和氨基柱稳定性较差,仅在其他类型正相色谱柱无法完成分离时采用;氧化铝
实验室分析方法气相色谱法(GC)方法介绍
是以气体为流动相的色谱分析法。
实验室分析方法迎头色谱法概念介绍
迎头色谱法(frontal chromatography)又称前沿法。将试样连续地通过色谱柱,吸附或溶解最弱的组分首先以纯物质状态流出色谱柱然后顺次流出的是次弱组分和第一流出组分的混合物,依此类推,从而实现混合物分离的色谱法。常用于色谱溶剂的提纯或液体中痕量组分的富集。
实验室分析方法循环色谱法概念介绍
循环色谱法(recycle chromatography)采用程序控制的切换方法,使混合物多次循环地通过色谱柱系统,用不太长的柱就可以得到长柱分离效果的色谱法。分离效率随循环次数增加有提高,但循环次数不宜过多。
实验室分析方法亲和色谱法概念介绍
亲和色谱法(affinity chromatography)用连接在基体上的配位体作为固定相,使与蛋白质或其他大分子发生可逆的高选择性的相互作用,利用不同亲和力进行分离的液相色谱法。
实验室分析方法催化色谱法概念介绍
催化色谱法(catalytic chromatography)将催化剂和固定相结合起来的一种色谱法。催化反应直接在柱内进行,同时进行分离。可用于研究催化反应过程及反应力学等有关问题。