实验室分析方法体积排阻色谱法原理及发展
体积排阻色谱法(SEC)又称凝胶色谱法,通常用于分子量大于2000的样品的分离。SEC方法最广泛的用途是测定聚合物的分子量分布,对某些大分子样品如蛋白质、核酸等,也是种很有效的分离纯化手段。SEC方法能简便快速地分离样品中分子量相差较大的组分,因而适合于未知样品的初步探索性分离,无需进行复杂实验就能较为全面地了解样品组成分布的概况。SEC方法按其流动相体系通常分为两大类,即适合于分离水溶性样品的凝胶过滤色谱(GFC)和适合于分离油溶性样品的凝胶滲透色谱(GPC),两种方法的分离原理虽然相同但采用的固定相、分离对象和使用技术完全不同。一、原理与色谱柱推荐体积排阻色谱法依据固定相凝胶的孔容及孔径分布、样品分子量大小及其分布以及相互匹配情况实现样品的分离。由图1,在固定相确定的分子量范围内,洗脱顺序按照分子大小分布。当样品分子量较大,以至于被完全排除在固定相微孔之外时(全排阻),其保留体积等于色谱柱内微粒间的空隙体积;而分子量足够小的......阅读全文
实验室分析方法体积排阻色谱法原理及发展
体积排阻色谱法(SEC)又称凝胶色谱法,通常用于分子量大于2000的样品的分离。SEC方法最广泛的用途是测定聚合物的分子量分布,对某些大分子样品如蛋白质、核酸等,也是种很有效的分离纯化手段。SEC方法能简便快速地分离样品中分子量相差较大的组分,因而适合于未知样品的初步探索性分离,无需进行复杂实验就能
实验室分析方法体积排阻色谱法概念介绍
体积排阻色谱法(SEC, size exclusion chromatography)用化学惰性的多孔性物质作为固定相,试样组分按分子体积(严格来讲是流体力学体积)进行分离的液相色谱法。
排阻色谱法的原理
排阻色谱的分离机理是立体排阻,样品组分与固定相之间不存在相互作用的现象。色谱柱的填料是凝胶,它是一种表面惰性,含有许多不同尺寸的孔穴或立体网状物质。凝胶的孔穴大小与被分离的试样大小相当。仅允许直径小于孔开度的组分分子进入,这些孔对于流动相分子来说是相当大的,以致流动相分子可以自由地扩散出人。对不同大
排阻色谱法的原理
排阻色谱的分离机理是立体排阻,样品组分与固定相之间不存在相互作用的现象。色谱柱的填料是凝胶,它是一种表面惰性,含有许多不同尺寸的孔穴或立体网状物质。凝胶的孔穴大小与被分离的试样大小相当。仅允许直径小于孔开度的组分分子进入,这些孔对于流动相分子来说是相当大的,以致流动相分子可以自由地扩散出人。对不同大
排阻色谱法的原理
排阻色谱的分离机理是立体排阻,样品组分与固定相之间不存在相互作用的现象。色谱柱的填料是凝胶,它是一种表面惰性,含有许多不同尺寸的孔穴或立体网状物质。凝胶的孔穴大小与被分离的试样大小相当。仅允许直径小于孔开度的组分分子进入,这些孔对于流动相分子来说是相当大的,以致流动相分子可以自由地扩散出人。对不同大
关于体积排阻色谱的分离原理介绍
体积排阻色谱的分离原理:固体填料表面有不同尺寸的孔,它们按一定规律分布,并在制造过程中加以控制。试样中溶质的体积,即分子量,也不同,对于齐聚物,分子大小的分布也有一定规律。用一个孔来说明溶质的分离过程。这个孔的孔径为dp,如果分子的直径大于dp,则这个分子不能进人小孔,随流动相迅速馏出。如果这个
Zenix体积排阻色谱柱
Zenix体积排阻色谱柱:Zenix体积排阻色谱柱采用单分散、球形、表面键合了一层纳米厚度中性亲水性薄膜的3 µm硅胶作为填料。3μm的粒径结合大的孔体积使其成为目前国际上分辨率优良的体积排阻柱。成都摩尔科学仪器有限公司独有的表面键合技术保证了填料表面键合的很大化,使其具有高的化学稳定性及小的非特异
Zenix-体积排阻色谱柱特点
Zenix 体积排阻色谱柱特点:● 3 μm粒径● 100、150、300 Å的孔径选择● 极高的分离效率和分辨率● 高容量● 在低和高盐浓度下有高稳定性● 批间重复性● 高的蛋白回收率而不破坏生物活性● 可忽略的非特异性反应● 蛋白、核酸、寡核苷酸、多肽和病毒类生物分子能实现理想的分析和分离● 自
空间排阻色谱法的分离原理
空间排阻(Steric Exclusion Chromatography)空间排阻色谱法以凝胶(gel) 为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动
尺寸排阻色谱法的分离原理
一. 分离原理 尺寸排阻色谱法:是按分子尺寸的差异进行分离的一种液相色谱方法,也称凝胶色谱法。 排阻色谱的固定相多为凝胶。凝胶是一种由有机分子制成的分子筛 , 其表面惰性 , 含有许多不同大小孔穴或立体网状结构。凝胶的孔穴大小与被分离组分大小相当 , 对不同大小的组分分子则可分别渗到凝胶
空间排阻色谱法
空间排阻色谱法以凝胶(gel)为固定相,它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。试样进入色谱柱后,随流动相在凝胶外部间隙以及孔穴
尺寸排阻色谱法
一. 分离原理 尺寸排阻色谱法:是按分子尺寸的差异进行分离的一种液相色谱方法,也称凝胶色谱法。 排阻色谱的固定相多为凝胶。凝胶是一种由有机分子制成的分子筛 , 其表面惰性 , 含有许多不同大小孔穴或立体网状结构。凝胶的孔穴大小与被分离组分大小相当 , 对不同大小的组分分子则可分别
尺寸排阻色谱法的原理及其特点
尺寸排阻色谱法是一种根据试样分子的尺寸进行分离的色谱技术。又称为凝胶色谱法、分子排阻色谱法、尺寸排阻色谱法等,是液相色谱的一种。 尺寸排阻色谱法原理:体积大的分子不能渗透到凝胶孔穴中去而被排阻,较早的淋洗出来;中等体积的分子部分渗透;小分子可完全渗透入内,最后洗出色谱柱。样品分子基本按其分子大小先后
全新Phenomenex-Yarra体积排阻色谱柱
2012年6月5日,全球色谱科技领域的领导者----Phenomenex公司发布了一新产品Yarra™-----用于分析生物样品的体积排阻法色谱柱(SEC),Yarra对生物样品的分离较其他同类色谱柱相比提高了70%的柱效。Yarra色谱柱有三种3µm粒径的固定相可供选择,不但非常适合用于分解各
实验室分析方法亲和色谱法原理及发展
亲和色谱(AFC)作为一种特异性分离技术,基于生物分子的活性特征,以其极高的选择性不可替代地被应用于复杂生物体系中特定组分的分离。一、原理与色谱柱推荐亲和色谱基于生物分子固有的特异性相互作用进行样品的高选择性分离。特异性相互作用包括醇能与底物、抑制物、辅酶等的结合:;抗体与抗原的结合:凝集素与细胞表
实验分析方法体积排阻色谱固定相的相关介绍
体积排阻色谱固定相包括具有确定孔径的有机和无机凝胶两大类,常用的凝胶包括硅胶、葡聚糖或琼脂糖凝胶、二乙烯基苯、丙烯酸酯、聚苯乙烯等。不同的凝胶在性能、使用及装柱方法等方面存在明显差异。由于聚合物固定相有轻微的交联,置于溶剂中时会产生1m的有效孔径。实际上在聚合物和硅胶固定相中,孔径有着不同的意义:硅
空间排阻色谱法介绍
空间排阻色谱法(Steric Exclusion Chromatography) 空间排阻色谱法以凝胶 (gel)为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶
什么是排阻色谱法?
排阻色谱法(size exclusion chromatography,SEC)是一种根据试样分子的尺寸进行分离的色谱技术。又称为凝胶色谱法、分子排阻色谱法、尺寸排阻色谱法等,是液相色谱的一种。
离子排阻色谱法(ICE)
这种分离模式包括Donnan排斥、空间排斥和吸附过程。固定相通常是由总体磺化的聚乙烯/二乙烯基苯共聚物形成的高容量阳离子交换树脂。ICE可以用于从完全离解的强酸中分离有机弱酸和硼酸盐的测定。在上面的保留模式中,带有负电荷的Donnan膜允许未解离的化合物通过而不允许完全解离的酸如盐酸通过,因为氯离子
分子排阻色谱法介绍
分子排阻色谱法是根据分子大小进行分离的一种液相色谱技术。分子排阻色谱法的分离原理为凝胶色谱柱的分子筛机制。色谱柱多以亲水硅胶、凝胶或经修饰凝胶如葡聚糖凝胶Sephadex和聚丙烯酰胺凝胶Sepherose等为填充剂,这些填充剂表面分布着不同尺寸的孔径,药物分子进入色谱柱后,它们中的不同组分按其大小进
关于体积排阻色谱的固定项介绍
体积排阻色谱所用的填料习惯上称为凝胶。填料的分类有两种方法,一是按机械强度,如软性、刚性、半刚性。二是按材料来分,又分为有机胶与无机胶两大类。因此就出现了有机硬胶和有机软胶的概念。 由于分离机理单纯,溶剂只是溶解样品,因此填料的发展过程就是排阻色谱的发展过程。从1955年淀粉开始,先后研制的填
关于体积排阻色谱的流动相介绍
流动相的作用仅仅在于溶解样品,不控制分离度。选择的原则是低黏度,不损害柱填料。和键合相色谱不同,要根据填料的性质选用溶剂,特别是新填料,厂家往往提供可选溶剂的范围。常用的溶剂有己烷、四氢呋喃、二氯甲烷、二嗯烷、环己烷、二氯乙烷、氯仿、三氯乙烷、四氯化碳、苯、甲苯、乙苯、N,N一二甲基甲酰胺、水、
实验室分析方法反向液相色谱法原理及发展
反相液相色谱(RPLC)是分离大多数常规样品的首选分离模式,它比其他液相色谱分离模式的适用范围更宽、更方便。据统计,在高效液相色谱法中,70%~80%的样品可采用反相键合相色谱法完成。极性、非极性,水溶性、油溶性,离子性、非离子性,小分子、大分子,以及具有官能团差别或分子量差别的同系物,均可采用反相
薄层色谱分析法—体积排阻色谱法的基本介绍
薄层色谱分析法—体积排阻色谱法:溶质分子在多孔填料表面上受到的排斥作用称为排阻。产生排阻现象的原因很多,如带电粒子的电荷,溶质分子的大小和空间结构等等。根据这种现象,将溶质分离的色谱过程称为排阻色谱,这种分离的依据是分子的大小。虽然排阻现象早为人知,但直到20世纪60年代初期,由于填料的商品化才
空间排阻色谱法的基本原理介绍
空间排阻色谱法以凝胶 (gel) 为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。试样进入色谱柱后,随流动相在凝胶外部间隙以及
实验室分析方法离子交换色谱法原理及发展
离子交换色谱( ion exchange chromatography,IEC)是最早应用的液相色谱技术之离子交换色谱法针对离子型样品,根据样品离子与固定相表面离子交换基团的交换能力差异进行分离,对生物样品,如蛋自质、肽类、氨基酸、核酸、核苷、碱基、碳水化合物等的分离尤为适宜,因此已成为相关领域中非
实验室分析方法正相液相色谱法原理及发展
正相液相色谱(NPLC)是最常用的HPLC分离方法之ー。与RPLC相反,其固定相极性大于流动相,样品的保留值随流动相极性降低而增加。NPLC常用于分离中性和离子样品。一、原理与色谱柱推荐正相液相色谱为典型的液-固吸附色谱。溶质在柱中固定相上反复进行吸附-解吸过程,根据不同被测物在吸附剂上吸附作用的强
实验室分析方法正相液相色谱法原理及发展
正相液相色谱(NPLC)是最常用的HPLC分离方法之ー。与RPLC相反,其固定相极性大于流动相,样品的保留值随流动相极性降低而增加。NPLC常用于分离中性和离子样品。一、原理与色谱柱推荐正相液相色谱为典型的液-固吸附色谱。溶质在柱中固定相上反复进行吸附-解吸过程,根据不同被测物在吸附剂上吸附作用的强
关于体积排阻色谱的基本性质介绍
体积排阻色谱是液相色谱方法中最新、也是最容易理解的一种,也被称为凝胶色谱或凝胶渗透色谱。体积排阻色谱的分离机理是分子的体积排阻,样品组分和固定相之间原则上不存在相互作用,色谱柱的固定相是具有不同孔径的多孔凝胶,只让临界直径小于凝胶孔开度的分子进入(保留),其孔径大于溶剂分子,所以溶剂分子可以自由
关于体积排阻色谱系统的内容介绍
体积排阻色谱系统是一种用于化学、药学领域的分析仪器,于2013年12月20日启用。 1、体积排阻色谱系统的技术指标: 20万PS标样,;单机激光光散射测定,;准确性偏差小于5%;T-rEX检测器;测定氯化钠dn/dc值,;准确性偏差小于5%;3万、20万PS标样;联机检测,准确性;偏差小于5