液相色谱仪图谱酸性或碱性化合物峰拖尾的原因
酸性或碱性化合物的峰拖尾原因解决办法1、缓冲不合适a、使用浓度50-100mM的缓冲液b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液......阅读全文
PCR拖尾及假阳性的原因及对策
拖尾 现象:产物在凝胶上呈Smear状态。 原因: 1.模板不纯 2.Buffer不合适 3.退火温度偏低 4.酶量过多 5.dNTP、Mg2+浓度偏高 6.循环次数过多 对策: 1.纯化模板 2.更换Buffer 3.适当提高退火温度 4.适量用酶 5.适当降低dNTP
电泳分离技术-带拖尾的形成原因
主要是样品融解效果不佳或分离胶浓度过大引起的。 处理办法:加样前离心;选择适当的样品缓冲液,加适量样品促溶剂;电泳缓冲液时间过长,重新配制;降低凝胶浓度。
液相色谱柱严重拖尾该如何处理
拖尾原 因 解决方法 1、筛板阻塞 1、a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱 2、色谱柱塌陷 2、填充色谱柱 3、干扰峰 3、a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱 4、流动相PH选择错误 4、调整PH值。对于碱性化合物,低PH值更有利于得到对称峰 5、样品与填料表面的溶化点发
气相色谱仪分析中峰拖尾和响应低甚至不出峰的主要原因
气相色谱仪分析中峰拖尾和响应低甚至不出峰的主要原因:一、系统污染或惰性下降:系统惰性不好对活性组分的峰形和响应的影响尤为明显。建议选用惰性优异的低流失色谱柱和色谱耗件。如果系统被污染,应及时对进样口和检测器进行维护。恢复被污染色谱柱的方法主要是将色谱柱的进样口端截去0.5~1m,根据样品来源做进一步
制备色谱色谱峰峰常见问题
峰形对称性的优劣对峰面积和分离度有很大的影响,从而影响分析结果的准确性。引起峰形异常的因素很多,色谱实践中,大部分的峰形问题都不是色谱柱的问题,仪器参数设定、色谱条件和方法正确与否对峰形有很大影响。和小析姐看看都有哪些问题吧。 峰拖尾 常见的3种拖尾情况: 次级保留引起峰拖尾的机理解析:
气相色谱中如何判断峰有没有拖尾
可以观察色谱峰来判断,只要不是对称后面有尾巴的峰就是拖尾峰。另外就是拖尾因子 t = W5.0/(tw*2)目测色谱峰就可以啊,实在不行扩大看看对不对称一般目测,峰一般是平均对称,拖尾峰一般在峰的右侧比较肥厚。
造成GC分析时色谱峰出现拖尾的因素(二)
B、进样器污染或者汽化室的衬管堵塞;
造成GC分析时色谱峰出现拖尾的因素(四)
D、载气流速过高;
造成GC分析时色谱峰出现拖尾的因素(六)
F、色谱柱安装不正确;
造成GC分析时色谱峰出现拖尾的因素(七)
G、色谱柱严重流失或污染;
造成GC分析时色谱峰出现拖尾的因素(八)
I、汽化室死体积过大;
造成GC分析时色谱峰出现拖尾的因素(三)
C、衬管未脱活,造成待测物被吸附后逐步释放;
造成GC分析时色谱峰出现拖尾的因素(九)
J、进样口汽化室温度太低;
造成GC分析时色谱峰出现拖尾的因素(十)
J、进样口汽化室温度太低;
造成GC分析时色谱峰出现拖尾的因素(十一)
K、放大器不佳,电容充放电不好。
造成GC分析时色谱峰出现拖尾的因素(一)
前沿陡峭、后沿较前沿平缓的不对称峰,称为拖尾峰。气相色谱仪中, 常见的吸附色谱法(利用吸附表面对不同组分物理吸附性能的差别,而使之分离的色谱法称为吸附色谱法),如果吸附等温线为非线性,当进样试样量超过一定数量 时就会出现拖尾峰;分配色谱法(利用固定液对不同组分分配性能的差别而使之分离
造成GC分析时色谱峰出现拖尾的因素(五)
E、载气系统漏气;
TLC拖尾现象
拖尾现象原因:样品浓度过大,层析板过载解决方法:直接降低样品浓度或者是上样量。原因:样品对硅胶的吸附能力过强解决方法:对不同体系加入不同的调节剂,酸体系加冰醋酸,碱体系加氨水。原因:展开剂的极性与样品极性不符,不能做到有效展开解决方法:调节展开剂极性。原因:展开剂对样品的溶解度不够解决方法:换极性相
如何解决色谱柱使用过程出现的问题?
如何解决色谱柱使用过程出现的问题问题: 不同色谱柱间差异使用期间柱变化原因: 填料、键合相不同柱床破坏键合相丢失硅胶基质溶解强保留组分堆积堵塞表现:保留因子(k),分离因子(α)柱效(N)保留因子(k),分离因子(α)柱效(N)
如何解决色谱柱使用过程出现的问题
问题: 不同色谱柱间差异 使用期间柱变化 原因: 填料、键合相不同 柱床破坏 键合相丢失 硅胶基质溶解 强保留组分堆积堵塞 表现: 保留因子(k),分离因子(α) 柱效(N) 保留因子(k),分离因子
使用液相色谱仪做含量时,有拖尾现象是什么原因
A、 峰拖尾1、筛板阻塞(a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱)2、色谱柱塌陷(填充色谱柱)3、干扰峰(a、使用更长的色谱柱 b、改变流动相或更换色谱柱)4、流动相PH选择错误 (调整PH值。对于碱性化合物,低PH值更有利于得到对称峰)5、样品与填料表面的溶化点发生反应(a、加入离子对试
液相色谱故障排除之谱图的各种问题(一)
液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。A、 峰拖尾1、筛板阻塞a、反冲色谱柱 b、更换进口筛板 c、更换色谱柱2、色谱柱塌陷a、填充色谱柱3、干扰峰a、使用更
HPLCK值增加时拖尾更严重原因分析
反相模式,二级保留效应;a.加入三乙胺(或碱性样品)b.加入乙酸(或酸性样品)c.加入盐或缓冲剂(或离子化样品)d.更换一支柱子
薄层色谱法斑点“拖尾”现象的原因分析
1、产生原因及克服方法(1)点样过量在薄层色谱过程中化合物在薄层板上进行吸附———解吸附的移动过程中,任何一类吸附剂,它们的负载化合物的能力是有一定限度的,因点样过量而超载后,过剩的化合物被抛在后面,形成拖尾现象。(2)重复点样样点虽在同一垂直线而样点圆心未重合,致使样点呈近椭圆形,也是形成拖尾现象
TLC为什么会拖尾?拖尾现象如何处理?
(1)样品溶度过大,TLC板过载,这种情况通过降低样品溶度或者上样量验证;(2)样品未完全溶解,TLC板上有未溶的固体样品,点板一定要是溶液形式;(3)TLC板吸潮,放烘箱110oC活化30分钟即可;(4)样品为强极性物质,含有氨基或者羧基等极性官能团,可以在展开剂中加入酸或者碱;(5)硅胶板在出厂
怎样选择色谱柱?(二)
二,如何解决色谱柱使用过程中出现的问题 1.保留值与分离度重现性不好原因分析 问题 原因 表现 不同色谱柱间差异 填料,键合相不同 保留因子(k),分离因子(α) 使用期间柱变化 柱床破坏 柱效(N) 键合相丢失 保留因子(k),分离子(α) 硅胶基质溶解 柱效(N) 强保留分堆积堵塞 保留因子(k
HPLC日常维护之:谱图问题解决方法
液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。 A、峰拖尾 B、峰前延 C、峰分叉 D、峰变形 E、早出的峰变形 F、早出的峰拖尾
正相硅胶反相洗脱色谱仪保留机理
正相硅胶反相洗脱色谱仪对碱性药物的保留主要是离子交换机理。在高PH值的条件下,硅胶表面弱酸性的硅羟基存在一定的离子化特征,硅胶在高PH值的情况下可作为阳离子交换剂。许多碱性化合物在高PH值(PH = 10)时也能部分质子化。非解离中性脂类和阴离子成分不被硅胶柱保留,在溶剂前沿被洗脱。只有在色谱条件下
HPLC故障排除:峰形问题(一)
1. 峰形1.1.在RP-HPLC应用之初,峰拖尾就是最常见的峰形问题(拖尾峰是RP-HPLC自出现以来最普遍的峰形问题)。大多数峰拖尾是由于柱内硅胶颗粒表面上的酸性或离子化硅烷醇基团之间相互作用而导致的。低纯度硅胶(通常称为“A型”或酸性硅胶)具有高含量的酸性硅烷醇(-Si-OH)基团,其富含的金
实验室分析仪器HPLC-常见故障出现峰拖尾的原因分析
1.柱超载 降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相 2.峰干扰 清洁样品,调整流动相 3.硅羟基作用 加三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相PH值,钝化样品 4.同前四4 同前四4 5.同前四3 5.同前四3 6.死体积或柱外体积过大 连接点降至最低,对所有连接点作合适调整,尽可能