实验室分析仪器液相色谱仪常见问题HPLC柱压过高
柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,您可按下面步骤检查问题的起因:①拆去保护预柱,看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查。②把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查。③将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱子,(此时不要连接检测器,以防固体颗粒进入流动池)。这时,如果柱压仍不下降,再检查。只用于使用过的柱子。④更换柱子入口筛板,若柱压下降,说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质,正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高,请与厂商联系。一般情况下,在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题。......阅读全文
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题二十二
为了节约成本我们自己填保护柱,用废的同型号柱子填。但填完以后做标样定量分析有所改变。请问其原因。答:不建议自己填保护柱柱芯,填得不好的柱芯会影响分离效果,也会影响定量分析结果。你不知道废柱子里的填料是不是受了污染,另外你填的柱芯肯定没有厂商填得好,如果影响到峰形,峰面积积分结果有所改变是可能的。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题二十四
CN 基柱应该怎样维护才好呢?比如做完实验用什么流动相冲柱子、短期用什么溶剂保存、长期用什么溶剂保存等等。答:CN 可作正相柱,也可作反相柱用,除了保存溶剂有特殊要求外,其它维护办法和一般正相和反相柱没有多大区别。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题二十九
如果液相色谱谱图基线漂移很大是不是柱子的问题?波长越小的越大,270nm 的还不怎么能看出来,230nm 的就非常厉害了,有可能是什么原因造成的?答:有可能是你的流动相的问题,230 可能已经快到你流动相的截止波长了,当然紫外吸收强,基线漂移厉害。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题四十八
在梯度洗脱的时候,如果整个时间程序越长,保留时间的重现性越差,尤其是后出的峰重现性差更明显,我猜估计是流量本身的误差引起的,但是怎么尽量避免这种情况的出现,使保留时间重现性更好?答:这个要控制好环境温度和柱温,易挥发的流动相要适当密封,同时保留时间的漂移与仪器的精度也有关系。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题六十八
反相离子对色谱法中,离子对是如何起作用的,是离子对试剂的非极性端溶解在填料的非极性端里,解离端伸向流动相,对含胺化合起离子交换作用,还是样品与离子对生成紧密的结合物,离子对试剂掩藏化合物中的极性基团,还是这种结合物是在解离与结合的动态平衡之中? 答:首先离子对试剂的解离端和目标离子形成离子缔合物,降
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题四十九
因为不知道流动相已走完,液相色谱柱空走了大概一晚上,请问这种情况下柱子还能用吗?如果可以应该如何再生?答:能用的!可能柱子里会有气泡进去,但之后多用流动相冲冲,看到基线稳定,就没问题了。用色谱柱的保存液低流速长时间冲洗,然后再检测一下柱效,看柱子是否恢复,液相最好设置一下最低压限,这样就不怕流动相走
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题六十九
磷酸盐缓冲盐渗透力强,为什么,是因为与醋酸盐,枸椽酸盐相比,基团小吗,使用磷酸盐缓冲液与其它缓冲液相比,会使色谱柱寿命缩短多少?答:经常用磷酸盐,在其它条件差不多一样的情况下,柱子寿命肯定比不用磷酸缓冲盐相对短一些。但用磷酸盐也有不可取代的优点吧,否则不可能现在大部分人还在用。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题四十一
通常我们在分析天然药物成分的时候结构复杂,无法考察组分的 PKa 值,哪我们如何去选择最合适的流动相或者是拖尾该怎么改善呢?答:如果天然产物中没有易电离的极性基团,就不需要用缓冲盐调节 pH。如果天然产物中既有酸性基团,也有碱性基团,譬如有 pKa=6.2 的羧基和 pKa=9.0 的氨基的两性物质
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题八十二
色谱柱的技术都有哪些?比如封尾等,这些技术在应用时都体现在哪里?答:色谱柱技术包括填料技术和装柱技术,填料技术自不待言,填料的好坏对色谱柱分离性能和选择性有决定性影响。装柱技术也没有想象中的这么简单,不同固定相、不同粒径、不同柱管内径和长度,装柱工艺都有所不同,要装出紧密、稳定、均一的柱床,更多是一
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题六十五
多个样品不好不离的时候,请问该怎么通过选择合适的柱子来提高分离度?答:提高分离度可从三个主要影响因素来考虑,柱效、选择性和保留因子。可通过减小填料粒径和增加柱长提高柱效;选择性和固定相选择以及 pH 条件有关,通过选择合适的色谱柱和合适的 pH,可以提高选择性;有时候适当延长出峰时间增加保留因子,也
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题及分析汇总
1、网上对柱子是否可以反冲一直有争论,那什么样的柱子可以反冲,什么不可以。反冲后是正者用,还是反着用。具体到各型号柱子不仅是 ODS 柱,其他如正向柱、氨基柱、离子交换柱等最好都有解释。答:一般的正相反相柱应该都能反冲,只有两端筛板孔径不对称的柱子不能反冲,不过目前这样的柱子已经比较少见了。反冲是为
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题六十四
苯基柱,氰基柱该什么时候考虑用?答:苯基柱用于含苯环的芳香族化合物的测定时,具有较高的选择性。CN 柱可作为一个保留能力最弱的反相柱使用,也可作为一个活性降低的正相柱使用(保留时间比硅胶柱和氨基柱低很多)。
实验室分析仪器液相色谱仪色谱柱常见问题四十四
使用的氨基柱时,有时候峰型突然变宽,有拖尾,用一段时间就又好了,不明白是什么原因造成的,如果要再生氨基柱的时候应该怎么做呢?是像您先前回答的问题中提到的,用一定比例的氨水冲洗吗?氨基柱可以直接用纯水冲洗吗?记得当时买的氨基柱那个使用说明书上说不能用纯水冲?是这样的吗?如果可以冲的话,一般冲多久?答:
实验室分析仪器液相色谱仪常见问题分析柱效恢复方法
氨基柱在进酸性样品时,很伤柱子,如使用一段时间后,柱效降低,峰形改变,如何恢复?用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。
液相色谱仪新柱验收测试时柱压过高的原因
液相色谱仪新柱验收测试时柱压过高是zui常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是色谱柱本身的问题，可按下面步骤检查问题的起因。一、拆下保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题。若柱压仍高，再检查。二、将色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗。若压力下降，再检查。三、将色谱
实验室分析仪器色谱柱的常见问题一
键合硅胶固定相的稳定性硅烷键合相的流失是由于硅烷键合于硅胶基质上的Si—O—Si键的水解,在高温、长值及水比例高的流动相中,离解加剧。因此稳定性与键合相的类型、流动相pH、所用缓种与有机改性剂的种类等有关,键合硅胶正相、反相、离子对和离子交换色谱柱的稳定差异。在相同条件下应用时,长链的烷基(如C18
液相色谱仪色谱柱柱压升高的可能原因
液相色谱仪色谱柱柱压升高的可能原因有色谱柱筛板堵塞、非特异性吸附、样品沉淀、盐晶体析出和更换流动相时置换不彻底等。一、色谱柱筛板堵塞：色谱柱筛板堵塞往往是由于流动相没有过滤或虽已过滤但滤膜孔径过大或滤片损坏，使固体杂质滞留在筛板上造成的。可采用反冲的方法除去堵塞物。类似的堵塞也会发生在排气阀过滤芯、
HPLC异常峰峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题解析
高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法，这些方法在使用的过程中往往会遇到诸如鬼峰、基线漂移、拖尾、分叉峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题，如何解决这些问题呢? 1.用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，
HPLC异常峰峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题解析
高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法，这些方法在使用的过程中往往会遇到诸如鬼峰、基线漂移、拖尾、分叉峰、保留时间漂移、柱压过高等系列问题，如何解决这些问题呢? 1.用HPLC进行分析时保
做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在
1． 泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理；2． 比例阀失效，更换比例阀即可；3． 泵密封垫损坏，更换密封垫即可；4． 溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法；5． 系统检漏，找出漏点，密封即可；6． 梯度洗脱，这时压力波动是正常的。
实验室分析仪器液相色谱仪常见问题－脱气方式
①加热回流脱气,脱气效果最佳,但无法保持。②氦脱气,此方法脱气效果佳,能除去百分之九十以上的空气,但氦气价格太贵,所以用的不多。③真空脱气,效果仅次于氦脱气,但脱气过程中容易造成样品溶液挥发损失。④超声脱气,只能脱去约百分之三十的空气,但在实验室中最常用。目前还是尽量争取用在线脱气,方便且效果好。
液相色谱仪柱压高的故障分析
⑴缓冲液盐分如（乙酸铵等）沉积于柱内； ⑵样品污染沉积。 处理对于第一种情况先用40～50℃的纯水，低速正向冲洗柱子，待柱压逐渐下降后，相应提高流速冲洗，柱压大幅度下降后，用常温纯水冲洗，之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟；对于第二种情况，由样品的沉积引起污染的C18柱，和纯水反向冲洗柱子，换成甲
液相色谱仪色谱柱压升高原因
色谱是一种分离分析手段，分离是核心，因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对于液相色谱仪来说，保持色谱柱的柱效、容量及渗透性，对于检测结果的准确性有着比较重要的意义。而色谱柱的柱效受到内外多种因素影响，色谱柱压升高就是其中之一。柱压升高的原因可能是因为柱床内存在杂质，导致流动项阻力增加。
HPLC常见问题和解决方法色谱柱漏液
色谱柱漏液原 因解决方法1、尾端接头松动1、拧紧接头2、卡套内有填料2、拆下、清洗卡套、重新安装3、筛板厚度不合适3、使用合适的筛板（参考下表）筛板选择指导物质粒径筛板孔径3-4u0.5u5-20u2u
HPLC使用中常见的柱压问题及解决方法
柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI之间（在使用梯度洗脱时，柱压平稳缓慢的变化是允许的）。压力过高、过低都属于柱压问题。 1 压力过高
实验室分析仪器液相色谱仪柱再生的方法
当分析复杂样品时间过长,尤其是中药分析,若出现柱压正常而色谱峰形变差,分离度降低时可尝试如下方法再生:先用5%甲醇(或乙腈)-95%水,将色谱柱反向连接,以1ml/min冲洗60分钟以上→再用四氢呋喃(或丙酮)以0.5ml/min冲洗60分钟以上(去除脂类)→再用65%甲醇(或乙腈)-35%水,以流
实验室分析仪器液相色谱仪常见问题－色谱峰展宽
①样品体积过大:用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%。②在进样阀中造成峰扩展:进样前后排出气泡以降低扩散。③数据系统采样速率太慢:设定速率应是每峰大于10点。④流动相粘度过高:增加柱温,采用低粘度流动相。⑤检测池体积过大:用小体积池,卸下热交换器。⑥保留时间过长:等度洗脱时增加强溶剂含量,也
做HPLC分析时，柱压不稳定有什么原因
柱压的影响因素有很多：1、有一部分是流动相的黏度。流动相黏度越大，柱压越高。2、固定相的颗粒大小或者均匀程度以及流动相的流速也会对柱压有影响。3、泵内是否有空气残留，也会影响柱压稳定。4、密封片损坏，空气流入。5、溶剂中的气泡6、梯度洗脱，这时压力波动是正常的。
做HPLC分析时，柱压不稳定有什么原因
柱压的影响因素有很多：1、有一部分是流动相的黏度。流动相黏度越大，柱压越高。2、固定相的颗粒大小或者均匀程度以及流动相的流速也会对柱压有影响。3、泵内是否有空气残留，也会影响柱压稳定。4、密封片损坏，空气流入。5、溶剂中的气泡6、梯度洗脱，这时压力波动是正常的。
实验室分析仪器液相色谱仪柱效降低的影响
主要特征性现象有柱压基本正常,但出现拖尾峰、秃峰、分叉峰、前延峰、峰变宽、基线漂移、理论板数降低、分离度降低等。需要进行再生处理,具体方法如下:①一般情况下,顺接色谱柱,按如下溶剂顺序及条件冲洗95%水-5%甲醇(或乙腈)(1.0ml/min,1h以上)→100%甲醇(1.0ml/min,1h以上)