烟台海岸带所检测生物活性物质分子荧光探针研究取得进展

生物体内存在着各种内源性活性物质 (蛋白质,小分子和离子),它们在生命体内的种类和浓度不尽相同,所起的生理活性的功能各异。生态环境一旦改变(例如:受到环境污染或者其它刺激)就会直接改变内源性物质的分布,从而导致疾病的发生。因此,详尽了解这些活性物质的产生、分布和生理功能对生态平衡、生理和病理的研究都有着重要的科学意义。利用小分子荧光探针可视化监测各类活性物质已成为目前化学和生物学的热点领域之一。 中科院烟台海岸带研究所陈令新研究员“环境微分析与监测”创新团队针对硫化氢(H2S)、硫醇和铁等活性物质,巧妙设计合成了几种新颖的小分子荧光探针,成功实现了活细胞内可视化检测。一系列相关成果发表在Chemical Communications和Chemistry - A European Journal等国际著名化学杂志上。 硫化氢 (H2S)是继NO和CO之后的第三个气体信号分子,可以快速穿过细胞膜,对一系列......阅读全文

共聚焦荧光探针标记方法

(一)BCECF测定pH值 1. 储存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分装后,-20℃避光保存。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。加入BCECF-AM(终浓度1~5μmol/L),37℃孵育30~60min。PBS(含Ca2+、M

pcr荧光探针法是什么

pcr荧光探针法是是SYBRGreen掺入到双链DNA中的量。SYBRGreen掺入到双链DNA中后会发出荧光。但是只要是双链,它都掺。而探针法是当探针结合到目标序列上以后,聚合酶降解探针后,探针上自带的荧光基团离开淬灭基团,从而发出荧光。

荧光探针的分类及应用

受到激发光激发后,从激发态单重态回到基态,在紫外-可见-近红外区有特征发光,称之为荧光。荧光性质(激发和发射波长、强度、寿命、偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子,被称为荧光探针。荧光探针分类很多,可以根据材料属性分为有机和无机探针,可以根据探针尺寸分为

IL2生物学活性检测实验

白细胞介素-2(IL-2)是由活化的辅助性T细胞分泌的一种细胞增殖因子,具有促T细胞增殖和维持T细胞体外长期生长的作用。CTLL-2为IL-2依赖细胞株可用作IL-2生物学活性定量检测。本实验采用MTT分析法,通过测定CTLL-2细胞的增殖量,确定IL-2生物学活性单位。检测IL-2的生物学活性,可

IL6生物学活性检测实验

实验材料 IL-6的诱生试剂、试剂盒 FCS-RPMI-1640培养液谷氨酰胺HEPES青霉素链霉素PBSA缓冲液仪器、耗材 离心机培养箱摇床实验步骤 1.  IL-6的诱生:诱生过程与IL-2基本相同。用于诱导产生IL-6的细胞可用PBMC。诱生剂用PHA。2.  IL-6的生物学活性测定:采用M

IL6生物学活性检测实验

实验材料IL-6的诱生试剂、试剂盒FCS-RPMI-1640培养液谷氨酰胺HEPES青霉素链霉素PBSA缓冲液仪器、耗材离心机培养箱摇床实验步骤 1.  IL-6的诱生:诱生过程与IL-2基本相同。用于诱导产生IL-6的细胞可用PBMC。诱生剂用PHA。2.  IL-6的生物学活性测定:采用MH60

IL10生物学活性检测实验

实验材料小鼠IL-4试剂、试剂盒FCS-IMDM培养液rh IL-10标准品3H-TdR仪器、耗材离心机培养箱实验步骤D36细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算待测样品的IL-10的活性单位⑥展开 注

IL4生物学活性检测实验

实验材料IL-4诱生试剂、试剂盒生理盐水淋巴细胞分层液FCS-IMDM培养液PHA仪器、耗材细胞培养板培养箱实验步骤一、IL-4生物学活性测定 CT.4S细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算待测样品的

IL8生物学活性检测实验

IL-8中对中性粒细胞具有激活和趋化作用,通过检测中性粒细胞的迁移距离可以确定IL-8的生物学活性,即对中性粒细胞的趋化活性。实验材料IL-8的诱生试剂、试剂盒右旋糖酐生理盐水琼脂糖淋巴细胞分层液Hank’s液甲醇Wright-Giemsa染液仪器、耗材洁净载玻片打孔器离心机培养箱实验步骤一、IL-

IL8生物学活性检测实验

实验材料 IL-8的诱生试剂、试剂盒 右旋糖酐生理盐水琼脂糖淋巴细胞分层液Hank’s液甲醇Wright-Giemsa染液仪器、耗材 洁净载玻片 打孔器离心机培养箱实验步骤 一、IL-8的诱生1.  常规分离PBMC,洗涤后,调细胞浓度为5×106/ml。2.  将细胞接种于24孔细胞培养板,每孔0

IL2生物学活性检测实验

实验方法原理实验材料 人外周血T细胞试剂、试剂盒 FCS-RPMI-1640培养液谷氨酰胺HEPES青霉素链霉素PBSA缓冲液仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 一、人外周血T细胞分泌IL-2的诱生1.  人PBMC分离:采用常规淋巴细胞分层液浓度梯度离心法分离PBMC,用10%FCS-RPM

大连理工樊江莉开发超敏荧光探针增强细胞活性氧的检测

  次氯酸(HOCl)是免疫细胞为抵抗感染而产生的活性氧(ROS)的重要组成部分。另一方面,HOCl在体内平衡中引起对生物分子的氧化损伤,并且与许多疾病相关,包括炎症,神经退行性疾病和心血管疾病。2018年9月24日,大连理工大学樊江莉课题组等人在Nature protocols上在线发表了题为"S

双重荧光定量PCR探针荧光基团该怎么选择

有干扰的话,在仪器上面就可以看出来,比如说,FAM和VIC,FAM有信号,单独看VIC也肯定有信号,只是低点而已

实时荧光定量-PCR-所用荧光探针及功能介绍

应用于实时定量 PCR 检测体系中的荧光探针主要有两种:一种是 TaqMan 探针,一种是分子信标探针。Tyagi 和 Krammer(1996)首次建立了分子信标探针,在同一寡核苷酸探针的5'端标记荧光素、3'端标记淬灭剂(DABCYL)分子信标探针能形成发夹结构,探针的噜扑环(L

探针法荧光定量pcr-荧光值要达到多少

定量PCR有绝对定量跟相对定量,绝对定量就是先用已知浓度的质粒浓度梯度(1.00E+07、1.00E+06、1.00E+05、1.00E+04、1.00E+03)制作标准曲线,然后通过做Real-timePCR的CT值计算出其表达量;相对定量是比较管家基因(GAPDH)与目的基因的CT值,得出各标本

荧光探针和荧光染料对于PCR技术的区别

1. TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭

南开大学团队研获新型生物荧光探针设计策略

  可根据荧光发射波长和待检测物“个性定制”  南开新闻网讯(记者 吴军辉 通讯员 崔长智)记者日前获悉,南开大学药物化学生物学国家重点实验室李昌华课题组开发了一种全新的用于制备高灵敏生物荧光探针的通用策略,该策略不仅可用于定制探针的荧光发射波长,亦可定制待检测物。介绍该成果的论文在线发表于国际知名

中科院福建物构所研发稀土双模荧光生物探针

  中科院福建物构所光电材料化学与物理重点实验室陈学元小组和结构化学国家重点实验室洪茂椿小组合作,采取将三价铕离子Eu3+分别掺杂到内外壳层的设计策略,研发成功了一种基于Eu3+双模(上转换/下转移)发光的核—壳—壳结构纳米荧光探针,并成功将其应用到甲胎蛋白(AFP)的上转换和溶解增强下转移发光双模

中科院福建物构所研发稀土双模荧光生物探针

  中科院福建物构所光电材料化学与物理重点实验室陈学元小组和结构化学国家重点实验室洪茂椿小组合作,采取将三价铕离子Eu3+分别掺杂到内外壳层的设计策略,研发成功了一种基于Eu3+双模(上转换/下转移)发光的核—壳—壳结构纳米荧光探针,并成功将其应用到甲胎蛋白(AFP)的上转换和溶解增强下转移发光双模

利用“微生物细胞工厂”高效生物合成抗肿瘤活性化合物

  中国医学科学院药物研究所朱平研究团队利用“微生物细胞工厂”高效生物合成具有良好抗肿瘤活性的达玛烯二醇-Ⅱ糖苷,该成果近期作为杂志封底图片发表于国际著名期刊《Green Chemistry》,论文标题为 “Construction and Optimization of Microbial Cel

锌离子荧光染料探针的应用

锌离子在许多生理和病理过程中都起到至关重要的作用,因此对锌离子进行探测和识别有重要理论和实际意义。荧光探针因其设计简单、易于操作、灵敏度高、可细胞成像等诸多优点而广泛应用于锌离子的识别研究。锌是生物中含量第二高的过渡金属(仅次于铁), 大脑中大多数Zn 2+紧密结合,因此细胞外和细胞内的游离Zn 2

使用荧光探针的注意事项

使用荧光探针的注意事项 不同的荧光探针在不同标本的效果常有差异,除综合考虑以上因素以外,有条件者应进行染料的筛选,以找出最适的荧光探针。此外,许多荧光探针是疏水性的,很难或不能进入细胞,须使用其乙酰羟甲基酯(acetoxymethyl,AM)形式,也就是荧光探针与AM结合后变成不带电荷的亲脂性化合物

钙离子荧光探针类型大盘点

钙离子在许多生理过程中起着复杂的作用。例如,细胞内钙离子在促进神经元从神经元中释放神经递质的信号转导途径中必不可少,并参与所有肌肉细胞收缩所需的机制。细胞离子浓度受被动和主动离子通道和泵的调节。离子通道和泵的故障可能导致离子浓度调节不当,从而产生不利于正常细胞功能的不利条件。钙离子浓度研究领域中常使

荧光探针有助于癌症研究

   Echelon Biosciences公司和犹他大学的研究人员合作研究,指出使用ATX-Red AR-2作为新的显像剂可有效照亮肿瘤。       ATX-Red AR-2是临床前阶段药物研发中令人兴奋的进步,可使研究人员使用非侵入性、机制特异诊断方法来监控疾病和候选药物。图像化酶自毒素的活性

荧光探针的化学性质

  荧光定量PCR所使用的荧光化学制剂可分为两种:荧光探针和荧光染料。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切

医学高科技:靶向荧光探针

  靶向荧光探针能够在术中实时点亮癌细胞,帮助医生判断肿瘤边界和发现转移灶,这一概念也被称为荧光引导手术(fluorescence-guided surgery,FGS)。  在过去几十年中,分子影像技术的发展大大提高了肿瘤诊治的能力,传统医学影像技术一般基于生物体本身的物理特性或解剖学特征,缺乏特

局部荧光探针可以检测肠癌啦!

  近日,国际化学与生物学杂志chemistry&biology发表了来自斯坦福大学医学院Matthew Bogyo研究小组的一项最新研究成果,他们发现一种荧光淬灭探针(aABP)能够特异性靶向在肠道发育不良中高表达的半胱氨酸蛋白酶,对指示肠道肿瘤具有非常高的敏感性和特异性。  早期检测结肠息肉能够

复合荧光探针HSA/PinkmentOAc

  过氧亚硝酸盐(Peroxynitrite,ONOO-)是由超氧阴离子自由基和一氧化氮自由基形成的具有高活性的活性氮物种,是许多体内循环途径的信号传导分子。同时,该分子具有强氧化性,可引起自由基介导的硝化反应,从而会影响生物体内多种生物过程,对脂质、蛋白、DNA等造成不可逆转的损伤。研究表明,过氧

荧光探针法是什么意思

荧光探针法是探针法是当探针结合到目标序列上以后,聚合酶降解探针后,探针上自带的荧光基团离开淬灭基团,从而发出荧光。荧光探针分类很多,可以根据材料属性分为有机和无机探针。荧光探针是指在紫外-可见-近红外区有特征荧光,并且其 荧光性质(激发和发射波长、 强度、寿命、 偏振等)可随所处环境的性质,如极性、

荧光PCR法与PCR荧光探针法有何不同

荧光定量PCR法检测的是SYBR Green掺入到双链DNA中的量。SYBR Green掺入到双链DNA中后会发出荧光。但是只要是双链,它都掺。而探针法是当探针结合到目标序列上以后,聚合酶降解探针后,探针上自带的荧光基团离开淬灭基团,从而发出荧光。从两者的原理上来看,不难判断,荧光PCR法更加简单方