离子交换色谱实验的基本流程介绍
预处理和装柱 1. 将超纯水与沉降胶按1:3 比例悬浮,轻轻搅匀; 2. 将色谱柱固定到设备支架上,链接出口管道,从柱底端进口反向泵入超纯水,排除管道及筛板中的气泡,停泵,然后从出口端放出部分超纯水,保留1~2cm 高度超纯水,封死出口端,然后正向冲洗进口端管道和适配器,排除筛板和管道中气泡; 3. 通过玻璃棒引流将悬浮胶导入色谱柱,在柱上端补充部分超纯水,搅匀,装上适配器; 4. 将柱出口端与色谱设备连接,以0.2MPa 恒压装柱,装填至恒定的柱床高度,标记柱床胶面位置,关闭泵,松开适配器,降低适配器至胶面下2mm 处,继续装填,待柱床高度稳定后,标记柱床胶面位置,降低适配器至柱上标记柱床位置下2mm。固定适配器,继续装填2~3 柱体积; 5. 确定柱体积,测量柱高,计算柱体积及记录装柱时的最大流速; 6. 选择最佳线速,用0.5mol/L NaOH 冲洗柱,冲洗3~5 体积; 7. 接着用超纯水冲柱,冲洗1......阅读全文
离子交换色谱实验的基本流程介绍
预处理和装柱 1. 将超纯水与沉降胶按1:3 比例悬浮,轻轻搅匀; 2. 将色谱柱固定到设备支架上,链接出口管道,从柱底端进口反向泵入超纯水,排除管道及筛板中的气泡,停泵,然后从出口端放出部分超纯水,保留1~2cm 高度超纯水,封死出口端,然后正向冲洗进口端管道和适配器,排除筛板和管道中气泡
离子交换色谱法基本介绍
IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。 以阴离子交换剂为例,其交换过程可表示如下: X-(溶剂中)+(树脂-R4N+Cl-)===(树脂-R4N+X-)+Cl-(溶
薄层色谱的实验流程
显色 计算Rf值 铺板 取7.5x2.5cm左右的载玻片5片,洗净晾干。在50mL烧杯中,放置3g硅胶G,逐渐加入0.5﹪羧甲基纤维素钠水溶液(CMC)8mL,调成均匀的糊状,涂于上述洁净的载玻片上,用手将带浆的玻片在水平的桌面上做上下轻微的颠动,制成薄厚均匀、表面光洁平整的薄层板,涂好
气相色谱的基本流程
从图中可以看出,气相色谱仪通常由以下五个部分组成:1)气源和载气的控制和测量(1)气源气源多采用高压瓶(氢、氮、氩等)做高纯气的储存器,并装有减压阀,使高压气体减压 成低压气体(0.1-O.5MPa)以供使用。钢瓶供给的气体称为流动相,又称载气。载气的作用 主要是把样品输送到色谱柱和检测器中
有关薄层色谱的实验流程
铺板 取7.5x2.5cm左右的载玻片5片,洗净晾干。在50mL烧杯中,放置3g硅胶G,逐渐加入0.5﹪羧甲基纤维素钠水溶液(CMC)8mL,调成均匀的糊状,涂于上述洁净的载玻片上,用手将带浆的玻片在水平的桌面上做上下轻微的颠动,制成薄厚均匀、表面光洁平整的薄层板,涂好的硅胶G的薄层板置于水平的
关于离子交换色谱法的基本信息介绍
IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。 以阴离子交换剂为例,其交换过程可表示如下: X-(溶剂中) + (树脂-R4N+Cl-)=== (树脂-R4N+ X-) +
离子交换色谱法的基本原理介绍
IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。 以阴离子交换剂为例,其交换过程可表示如下: X-(溶剂中) + (树脂-R4N+Cl-)=== (树脂-R4N+ X-) +
离子交换色谱仪离子交换树脂的基本结构
离子交换色谱仪离子交换树脂由固体载体、活性基团和可交换离子组成。一、固体载体:为不溶性的三维空间的高分子网状骨架,具有良好的亲水性、水不溶性、较好的化学稳定性和连接较多的活性基团。常用的载体:1、化学合成载体:如聚苯乙烯树脂等。2、天然材料制成的载体:如琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶和纤维素等。二、活性基团
离子交换色谱实验常见的问题
一、纯化后样品纯度不高怎么办? 若目标蛋白和杂蛋白等电点差异较大,目标蛋白通过穿透步骤获得,通过调节起始缓冲液pH,使目标蛋白与填料之间的静电作用更强;若目标蛋白和杂蛋白等电点差异较小,目标蛋白通过洗脱步骤获得,过调节起始缓冲液pH,使目标蛋白与填料之间的静电作用更强;再调节洗脱溶液的离子强度
实验分析方法离子交换色谱固定相的相关介绍
离子交换色谱固定相也称离子交换剂,主要有键合硅胶和聚合物两类。离子交换剂上的活性离子交换基团決定着其性质和功能,表1列出了一些主要的有机离子交換剂的类型和性质。表1 常见有机离子交换剂的类型和性质种类缩写官能团基质材料类型PKa值阳离子交换剂S—SO3—树脂强酸性SM—CH2SO3—树脂强酸性SE—
离子交换色谱的基本原理
离子交换色谱的基本原理离子交换色谱适用于氨基酸、蛋白质、蛋白质水解物以及其他离子型化合物。以离子交换树脂作为固定相,用水或与水混合的溶剂作为流动相。在流动相中存在的离子性物质与树脂进行离子交换反应而被吸附,代替了因吸附表面活性所产生的吸附作用。离子交换色谱的分离原理主要表现在以下3个方面:①利用样品
离子交换色谱仪离子交换剂的基本性质
离子交换色谱仪离子交换剂又称离子交换介质,通常是一种不溶性的高分子化合物,有树脂、纤维素、葡聚糖和琼脂糖等。离子交换剂的基本性质如下:一、含可交换离子。二、洗脱的可能性取决于交换反应的平衡常数。三、吸附的蛋白质可以通过改变pH值,使蛋白质分子电性发生改变而洗脱下来。四、不同蛋白质形成的离子键数目不同
高效离子交换色谱仪离子交换树脂的基本结构
高效离子交换色谱仪离子交换树脂由固体载体、活性基团和可交换离子组成。一、固体载体: 为不溶性的三维空间的高分子网状骨架,具有良好的亲水性、水不溶性、较好的化学稳定性和连接较多的活性基团。 常用的载体: 1、化学合成载体:如聚苯乙烯树脂等。 2、天然材料制
关于离子交换色谱的介绍
离子交换色谱通常用离子交换树脂作为固定相。一般是样品离子与固定相离子进行可逆交换,由于各组分离子的交换能力不同,从而达到色谱的分离。 离子交换色谱法是新发展起来的一项现代分析技术,已广泛用于氨基酸、蛋白质的分析,也适合于某些无机离子(NO3-、SO42-、Cl-等无机阴离子和Na+、Ca2+、
离子交换色谱仪基本结构
离子交换色谱仪由输液系统、进样系统、分离系统、抑制系统、检测系统和数据处理系统等组成。一、输液系统:输液泵为整个分析系统提供淋洗液。二、进样系统:以前采用25uL进样管,通过注射器将样品注入六通阀,由六通阀进行自动切换进样。目前为了适应纯净水中含氧酸根等痕量离子的测定,采用100uL进样管,通过自动
离子交换色谱仪基本结构
离子交换色谱仪由输液系统、进样系统、分离系统、抑制系统、检测系统和数据处理系统等组成。一、输液系统:输液泵为整个分析系统提供淋洗液。二、进样系统:以前采用25uL进样管,通过注射器将样品注入六通阀,由六通阀进行自动切换进样。目前为了适应纯净水中含氧酸根等痕量离子的测定,采用100uL进样管,通过自动
液相色谱仪的基本操作流程
液相色谱仪操作流程1、开机:依次打开脱气机、色谱泵、检测器、计算机电源;待各设备自检正常后,启动色谱管理系统。2、流动相准备:过滤,脱气。3、色谱泵排气4、安装色谱柱5、平衡流动相(有机溶剂与缓冲盐溶液切换时等易产生沉淀,需先使用90%超纯水/10%甲醇作为流动相冲洗系统)6、数据采集、进样7、冲洗
离子交换器的典型的工艺流程介绍
电渗析工程典型工艺流程: 1.苦咸水淡化、地下水除氟 原水→101过滤器→精密过滤器→电渗析装置→中空纤维超滤器→紫外线杀菌器→成品水 2.饮用纯净水、太空水生产 原水→机械过滤器→活性炭过滤器→精密过滤器→电渗析装置→阳离子交换器→阴离子交换器→混合离子交换器→中空纤维超滤器→紫外线杀
离子交换层析实验——基本方案
离子交换层析(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。实验材料蛋白质试剂、试剂盒离子交换缓冲液仪器、耗材离子交换层析柱梯度混合器电导表实验步骤1.
液相色谱仪离子交换色谱实验操作步骤
实验操作1.填料的预处理2.装柱离子交换色谱不同于凝胶色谱,柱子通常较为短小,对于一般工作,通常选长度为10-40cm的柱已足够。柱的直径按照欲分物质的数量来选定。对于很复杂的混合物和进行精细分析是用细长的柱,分辨率较好;对于初步分离可用较粗、容量较大的柱。装好的柱子用起始缓冲液充分平衡后上样。3.
离子交换色谱法介绍
离子交换色谱法(Ion-exchange Chromatography) IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换,依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。以阴离子交换剂为例,其交换过程可表示如下: X-(溶剂中)
离子交换色谱法介绍
固定相是离子交换树脂,常用苯乙烯与二乙烯交联形成的聚合物骨架,在表面未端芳环上接上羧基、磺酸基(称阳离子交换树脂)或季氨基(阴离子交换树脂)。被分离组分在色谱柱上分离原理是树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及被测组分的离子进行可逆交换,根据各离子与离子交换基团具有不同的电荷吸引力而分离
实验室检测业务基本流程
1.检测申请人负责填写《化学检测申请单》并提供检测用的样品和相关的技术资料、信息。实验室样品管理员进行收样并有技术负责人进行复核确认。2检测受理本实验室受理检测业务,均由实验室样品管理员统一接收,其它人员不得擅自接收检测样品。样品的检查和管理应按照《样品管理程序》执行。对于例行、重复性和其它简单的检
离子交换层析法基本介绍
离子交换层析法(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。常用的离子交换剂有:离子交换纤维素、离子交换葡聚糖和离子交换树脂 。 离子交换层析法中
实验室分析仪器气相色谱的操作的基本流程
1、气相色谱仪的使用步骤1)打开稳压电源。2)打开氮气阀,打开净化器上的载气开关阀,然后检查是否漏气,保证气密性良好。3)调节总流量为适当值(根据刻度的流量表测得)。4)调节分流阀使分流流量为实验所需的流量(用皂膜流量计在气路系统面板上实际测量),柱流量即为总流量减去分流量。5)打开空气、氢气开关阀
离子交换剂的基本信息介绍
离子交换剂指的是含有若干离子基团的不溶性高分子物质,是通过在不溶性高分子物质(母体) 上引入若干可解离基团(活性基团) 而制成。根据活性基团的性质不同,离子剂可分为阳离子交换剂和阴离子交换剂。根据母体的不同,离子交换剂可分为离子交换树脂、离子交换纤维素和离子交换凝胶等。 能与溶液中的离子进行等
实验室分析方法离子交换色谱法概念介绍
离子交换色谱法(IEC, ion exchange chromatography)物的液相色谱法。以离子交换作用分离离子型化合物的液相色谱法。
氨基酸离子交换柱色谱分离实验
实验概要本实验介绍了氨基酸的离子交换柱色谱分离的原理和操作步骤等。实验原理本实验采用磺酸型阳子交换树脂(732型)分离酸性氨基酸(天冬氨酸Asp pI=2.97)和硷性氨基酸(赖氨酸Lys pI=9.74)的混合液。在pH5.3条件下,因为低于Lys的pI值,Lys可解离成阳离子挂在树脂上;高于
离子交换色谱
实验方法原理离子交换色谱是将离子交换基因(CM、SP、Q、DEAE等)键合于一定的惰性载体(纤维素、交联葡聚糖,交联琼脂糖等)之上,并以此作为固定相,依据样品所带电荷的不同,从而与固定相上的离子交换基团相互作用的程度不同而进行分离的一种色谱方法。离子交换色谱技术已广泛用于蛋白质、多肽、寡核苷酸、病毒
离子交换色谱
洗脱方式的选择,离子交换色谱洗脱方式有三种:一是改变缓冲液pH,使蛋白质从吸附状态变为解吸附状态。如在阴离子交换色谱中,通过降低流动相pH使吸附在柱子上的带负电荷的蛋白质带正电,从而达到解吸附,在阳离子交换色谱中则是通过升高流动相pH的方法达到解吸附;二是增加缓冲液的离子强度,将吸附强的分子从离子交