怎样避免液相色谱基线漂移?
①控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器; ②使用HPLC级的溶剂,高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气,使用中使用在线脱气或氦气脱气; ③用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池,如有需要,可以用1n的硝酸(不要用盐酸); ④取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗; ⑤更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速; ⑥用中等强度的溶剂进行冲洗,更改流动相时,在分析前用10~20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。使用离子对试剂、缓冲盐更应注意平衡柱; ⑦检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂; ⑧改变分析条件。使用保护柱,如有必要,在进样之间或在分析过程中,定期用强溶剂冲洗柱子; ⑨重新设定基线。使用新的流动相; ⑩将波长调整至最大吸收波长处。重选检测波长。......阅读全文
HPCL液相色谱怎样才会使峰位发生重排?
在分析多组分样品时,仅改变流动相的强度(组成百分比)而不改变其组成,一般仅仅改变所有组分的保留时间,不会发生峰位的重排。 下列条件改变可能发生峰位重排: 流动相中换了强溶剂; PH值的改变; 柱填料的改变; 柱温的改变; 流动相的组成改变(如加入离子对试剂
高效液相色谱的外标法是怎样的
外标法就是以待测成分的对照品作为对照物质,相对比较以求得供试品含量。简单说,想要测定X样品的浓度,要先配制X对照品,进样分析。然后在配制X样品,进样分析。根据公式:A样/A对=C样/C对,来计算样品的浓度。其中A是峰面积,C是浓度。因为对照品的含量是已知的,可以求得C对。而A样和A对是可以通过液相色
反相高效液相色谱柱是一种怎样的色谱模式
反相高效液相色谱柱是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面较广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色谱条件下,流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液,并加一定比例的能
气相色谱PK液相色谱
气相和液相是有机检测的两大基本仪器,占据着有机实验室的统治地位,虽然同做有机检测,但就两个仪器本身也有着较大区别,小析姐从以下5个方面进行了比较。气相色谱是二十世纪五十年代出现的一项重大科学技术成就。这是一种新的分离、分析技术,它在工业、农业、国防、建设、科学研究中都得到了广泛应用。同为色谱技术之一
气相色谱PK液相色谱
气相和液相是有机检测的两大基本仪器,占据着有机实验室的统治地位,虽然同做有机检测,但就两个仪器本身也有着较大区别,小析姐从以下5个方面进行了比较。 气相色谱是二十世纪五十年代出现的一项重大科学技术成就。这是一种新的分离、分析技术,它在工业、农业、国防、建设、科学研究中都得到了广泛应用。同为色谱技
淋洗液发生器能避免基线漂移保证色谱峰积分良好的重...
淋洗液发生器能避免基线漂移保证色谱峰积分良好的重复性 淋洗液发生器通过电解方式产生高纯度KOH,MSA,配合脱气装置大幅度降低了本底电导。选用淋洗液发生器可省去配置淋洗液时间,随时切换淋洗液浓度节省实验时间,提升实验效率。 淋洗液发生器用来电解产生高纯度淋洗液等度或梯
淋洗液发生器能避免基线漂移保证色谱峰积分良好的重...
淋洗液发生器能避免基线漂移保证色谱峰积分良好的重复性淋洗液发生器通过电解方式产生高纯度KOH,MSA,配合脱气装置大幅度降低了本底电导。选用淋洗液发生器可省去配置淋洗液时间,随时切换淋洗液浓度节省实验时间,提升实验效率。淋洗液发生器用来电解产生高纯度淋洗液等度或梯度淋洗。淋洗液发生器能避免基线漂移,
高效液相色谱中怎样改善条件达到分离度要求
(1)选择合适的流动相,使其流经色谱柱时,受到的阻力减小,从而能迅速通过色谱柱,且必须对载液加高压。(2)可选择合适的固定相和流动相以达到最佳分离效果。高效液相色的分离效果比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。(3)定时清洗柱子。高效液相色谱的柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物。但是要
高效液相色谱中怎样改善条件达到分离度要求
(1)选择合适的流动相,使其流经色谱柱时,受到的阻力减小,从而能迅速通过色谱柱,且必须对载液加高压。(2)可选择合适的固定相和流动相以达到最佳分离效果。高效液相色的分离效果比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。(3)定时清洗柱子。高效液相色谱的柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物。但是要
液相色谱一个组分出现双峰怎样处理
"问:液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?答: 1. 筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。2. 存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子"色谱柱塌陷,或者是含酸的水溶液在疏水的色谱柱上走的时间过长。进样量过大、进样技术差或者是pH不对也会
高效液相色谱走基线时出现负峰怎样处理
那说明管路或者柱子里还有杂质,继续用流动相冲洗,等基线平稳后,在开始进样品。
怎样选择液相色谱柱保护柱不会影响分离分析?
液相色谱柱通常在选择保护柱之前首先要考虑样品是否清洁,对于大部分分析工作来说,一支25px长的保护柱便能够提供充分的保护作用。但是,如果样品较脏,或工作中发现经常要更换25px的保护柱,那么就应该选用50px或75px的保护柱。保护柱越长自然所装的色谱填料就越多,则其保护性能越好,当然随着保护柱长
高效液相色谱中怎样改善条件达到分离度要求
(1)选择合适的流动相,使其流经色谱柱时,受到的阻力减小,从而能迅速通过色谱柱,且必须对载液加高压。(2)可选择合适的固定相和流动相以达到最佳分离效果。高效液相色的分离效果比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。(3)定时清洗柱子。高效液相色谱的柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物。但是要
怎样选择液相色谱柱保护柱不会影响分离分析
液相色谱柱通常在选择保护柱之前首先要考虑样品是否清洁,对于大部分分析工作来说,一支25px长的保护柱便能够提供充分的保护作用。但是,如果样品较脏,或工作中发现经常要更换25px的保护柱,那么就应该选用50px或75px的保护柱。保护柱越长自然所装的色谱填料就越多,则其保护性能越好,当然随着保护柱长度
高效液相色谱中怎样改善条件达到分离度要求
(1)选择合适的流动相,使其流经色谱柱时,受到的阻力减小,从而能迅速通过色谱柱,且必须对载液加高压。(2)可选择合适的固定相和流动相以达到最佳分离效果。高效液相色的分离效果比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。(3)定时清洗柱子。高效液相色谱的柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物。但是要
液相色谱一个组分出现双峰怎样处理
"问:液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?答: 1. 筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子。2. 存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子,改换流动相或更换选择性好的柱子"色谱柱塌陷,或者是含酸的水溶液在疏水的色谱柱上走的时间过长。进样量过大、进样技术差或者是pH不对也会
液相色谱中RSD是怎样计算的,用什么公式
rsd(%)=标准偏差sd/平均值*100%其中标准偏差这么说吧,在excel里面,sd相当于公式STDEV比如说,你测定了三个含量值, 100.01 99.82 99.69 把这三个数值放在excel里A1、A2、A3的位置,那么rsd就是=STDEV(A1:A3)/AV
液相色谱中流动相、固定相和保留时间的关系是怎样
一般极性大的样品用反相色谱柱,流动相极性大于固定相极性,样品极性越小,保留时间越长。极性小的样品用正相色谱柱,流动相极性小于固定相极性,样品极性越大,保留时间越长。当然如果有其它保留机理,如氢键等,波流时间会变化。固定相不同保留能力会有不同,如C8的保留能力弱于C18。流动相根据不同的溶解能力、极性
液相新柱子怎样处理
很难判断,在新柱子中也是用甲醇封存的。可以仔细观察柱子表面是否有摩擦痕迹,柱子的外包装是否有防开启的密封贴。做厂家规定的标准物质看是否达到相应的理论塔板数等等方法。其实在真实购买过程中,色谱柱很少会遇到用过的旧柱子。
液相新柱子怎样处理
很难判断,在新柱子中也是用甲醇封存的。可以仔细观察柱子表面是否有摩擦痕迹,柱子的外包装是否有防开启的密封贴。做厂家规定的标准物质看是否达到相应的理论塔板数等等方法。其实在真实购买过程中,色谱柱很少会遇到用过的旧柱子。
液相管脱落怎样处理
液相色谱从开始的流动相瓶到结束的废液瓶之间,其流通管路是全封闭的,虽然内部压力很高,但色谱仪的外部不会出现一滴液体。如果出现了漏液现象,系统一般会发出报错信号,无法正常工作。对于操作人员来说,漏液是一件让人苦恼的事情,因为有些漏液问题比较直观,容易解决,但有些漏液问题比较复杂,需要深入排查。
怎样避免标本溶血?
1.在消毒用酒精完全干燥之前,不要进行操作2.避免将小号针头和大号真空采血管配套使用3.确保将针头正确安装于注射器上,以避免混入气泡4.使用注射器采血时,避免过分用力抽拉注射器活塞5.避免在将血液从注射器转移至采血管时压活塞-应使用安全的专用转移装置和真空采血管等6.避免从血肿中采血7.颠倒混匀采血
高效液相色谱之高效反相液相色谱(一)
反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色
液相色谱的分类和高效液相色谱用途
制备型加压液相色谱,按照色谱柱和样品量的大小,分为:(1)低压液相色谱;(2)中压液相色谱;(3)高压液相色谱;(4)快速色谱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠,没有统一、明确的标准。 1、快速色谱 柱压通常为2bar(或30psi)左右,对于那些容易分离的简单混
高效液相色谱之高效排阻液相色谱
高效液相色谱(High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC)又叫高压、高速、近代液相色谱,通常叫做高效液相色谱。它是60年代中期才建立的一种高效快速分离化合物的方法,到了70年代后期才广泛用于蛋白质的分离纯化方面,现已成为分离纯化蛋白质非常有效的方
高效液相色谱之高效反相液相色谱(二)
附:色谱柱操作说明,(以迪马公司Diamonsil(TM)柱为例)1. 色谱柱常规参数订货号:Catalog.No. 产品ZL号 Serial No.出厂日期 Date填料 Column Paking 如,Diamonsil(TM)钻石C18 5цm柱规格 Col
C18液相色谱柱色谱柱液相色谱柱
分析型到制备型一套完整的填料体系,目前可提供的填料键合相有C18、C4、C8、SI、NH2、CN、Phenyl、Diol以及手性填料TBB和 DMB。孔径有60A、100A和300A三种,满足不同条件的分析。填料粒径可以提供3.5um、5um、7um、10um、13um和16um六种。可谓品
气相色谱仪运行时基线漂移的原因
在气相色谱仪运行当中,基线漂移是比较常见的现象。气相色谱仪运行时基线漂移的原因 基线漂移可由很多因素引起,例如:①污染问题;②仪器在逐渐接近恒温,各部件在稳定过程中;③温度控制器失灵;④载气已逐渐用完;⑤气路不严密,出现泄漏;⑥载气阀失灵;⑦进样口处硅胶垫太松;⑧检测器出口所连接的出气管
气相色谱仪基线漂移过大怎么办?
在气相色谱仪刚启动、色谱柱更换后不久,基线的漂移是正常现象。 基线漂移过大是指基线的漂移比正常的标准高很多,并且始终无法稳定下来。 一、将火焰熄灭之后如果基线还是漂移很大,要考虑是否电路系统的故障或接触不良、绝缘退化等因素: 1.检查检测器和离
气相色谱柱怎样老化?
本文主要说明气相色谱柱老化的方式。 安装色谱柱后,首先用至少3倍于平常工作流速的载气吹色谱柱, 然后将载气流速调整到正常流速,开始从100度升温迅速升温到老化温度,老化色谱柱。 那么老化温度是多少呢? 一般推荐的老化温度为:Tcond = Tmax/2+Tapp/2; 其中:Tcon