为何液相色谱试验时出现鬼峰?
(1)进样阀残余峰--每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗; (2)样品中未知物--处理样品; (3)柱未平衡--重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱); (4)三氟乙酸(tfa)氧化--每天新配,用抗氧化剂; (5)水污染(反相)--通过变化平衡时间检查水质量,用HPLC级的水。......阅读全文
液相色谱峰分不开,怎么办
1、柱效不好,有可能柱子污染了,从谱图上看,每个峰型 都不是左右对称。2、出峰太快,洗脱力太强。减少有机相比例可提高分离度(从你谱上看,这点对你可能不起作用)3、流动相PH选择不当,应根据物质结构,选择适合的缓冲盐及PH值。
液相色谱峰分不开怎么办
1、柱效不好,有可能柱子污染了,从谱图上看,每个峰型 都不是左右对称。2、出峰太快,洗脱力太强。减少有机相比例可提高分离度(从你谱上看,这点对你可能不起作用)3、流动相PH选择不当,应根据物质结构,选择适合的缓冲盐及PH值。
液相色谱峰分不开,怎么办
调整有机相比例,看看变化趋势,如果能调开,用这个方法简单变梯度,这个最好是有经验的实验员调整调的好的话,峰型会变得很好。调整水相pH值,这个吧,如果你分不开的色谱峰是有酸碱性的官能团会比较好。不过pH值一变,所有色谱峰的保留时间都可能变色谱柱,你看看峰型,有没有拖尾。如果有的话换一根好点儿的柱子可能
液相色谱峰分不开,怎么办
v1、柱效不好,有可能柱子污染了,从谱图上看,每个峰型 都不是左右对称。2、出峰太快,洗脱力太强。减少有机相比例可提高分离度(从你谱上看,这点对你可能不起作用)3、流动相PH选择不当,应根据物质结构,选择适合的缓冲盐及PH值。
液相色谱进样品不出峰的原因
一般就是几个原因导致的:仪器、方法,或者是操作。1、仪器:你先看看仪器的而压力是多少。是不是哪里漏液了。如果漏了肯定是检不出来了。再有就是放大看一看基线噪音,查一下氘灯的使用时间。2、方法:波长,这个是直接原因,你这个物质测过紫外吗?在这个波长下有没有吸收呢?如果波长错了,那你就别费劲了。溶剂,你的
液相色谱峰分不开,怎么办
1、柱效不好,有可能柱子污染了,从谱图上看,每个峰型 都不是左右对称。2、出峰太快,洗脱力太强。减少有机相比例可提高分离度(从你谱上看,这点对你可能不起作用)3、流动相PH选择不当,应根据物质结构,选择适合的缓冲盐及PH值。
高效液相色谱峰宽怎么看
高效液相色谱峰宽看法:在吸附色谱法中,如果吸附等温线为非线性的,则在进样量超过一定数量时会出现拖尾峰。在分配色谱法中,如果载体表面具有活性作用点,试样量超过柱负荷或进样方法不当等,都会出现拖尾峰。手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定
液相色谱峰分叉了,怎么办
做液相色谱的同学基本都会碰到分叉峰,很多时候,这都意味着硬件或者方法某些地方可能出现问题。今天我们就一起看看导致峰分叉的原因,以及如何解决这个问题。首先,我们需要判断这到底是一个峰,还是两个峰?A图主峰前面有一个肩峰这到底是峰形不好,还是另外一个化合物没分开呢?判断方法:降低该成分在样品中的浓度B图
液相色谱峰面积计算的具体公式
峰高×半高峰宽,峰高×平均峰宽,积分都可以。有峰高就可以计算了,m=fA中A可以是峰高或峰面积,m是质量或浓度。
液相色谱峰拖尾的原因何在
改出峰时间的方法:1.调流速;2.改柱温;3.更换色谱柱;4.更改流动相组成或比例。改工作站系统时间(仅进样前改有效,通常用于作弊造假):在电脑管理员界面(像我们公司就分管理员界面和操作者界面,平时做检验都是在操作者界面中)的控制面板中修改系统时间即可。记得做完样打完图谱之后把系统时间改回来。
液相色谱峰分不开,怎么办
1、柱效不好,有可能柱子污染了,从谱图上看,每个峰型 都不是左右对称。2、出峰太快,洗脱力太强。减少有机相比例可提高分离度(从你谱上看,这点对你可能不起作用)3、流动相PH选择不当,应根据物质结构,选择适合的缓冲盐及PH值。
高效液相色谱峰面积比是什么
含量是不变的,不管你用什么方法积分算,你算出来的那个叫纯度。色谱归一法都是是按面积积分也就是半峰高对峰宽。
液相色谱峰分不开,怎么办
1、柱效不好,有可能柱子污染了,从谱图上看,每个峰型 都不是左右对称。2、出峰太快,洗脱力太强。减少有机相比例可提高分离度(从你谱上看,这点对你可能不起作用)3、流动相PH选择不当,应根据物质结构,选择适合的缓冲盐及PH值。
液相色谱峰拖尾的原因何在
改出峰时间的方法:1.调流速;2.改柱温;3.更换色谱柱;4.更改流动相组成或比例。改工作站系统时间(仅进样前改有效,通常用于作弊造假):在电脑管理员界面(像我们公司就分管理员界面和操作者界面,平时做检验都是在操作者界面中)的控制面板中修改系统时间即可。记得做完样打完图谱之后把系统时间改回来。
液相色谱峰分不开,怎么办
1,调整有机相比例,看看变化趋势,如果能调开,用这个方法简单变梯度,这个最好是有经验的实验员调整调的好的话,峰型会变得很好。调整水相pH值,这个吧,如果你分不开的色谱峰是有酸碱性的官能团会比较好。不过pH值一变,所有色谱峰的保留时间都可能变色谱柱,你看看峰型,有没有拖尾。如果有的话换一根好点儿的柱子
高效液相色谱峰宽怎么看
高效液相色谱峰宽看法:在吸附色谱法中,如果吸附等温线为非线性的,则在进样量超过一定数量时会出现拖尾峰。在分配色谱法中,如果载体表面具有活性作用点,试样量超过柱负荷或进样方法不当等,都会出现拖尾峰。手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定
液相色谱进样品不出峰的原因
一般就是几个原因导致的:仪器、方法,或者是操作。1、仪器:你先看看仪器的而压力是多少。是不是哪里漏液了。如果漏了肯定是检不出来了。再有就是放大看一看基线噪音,查一下氘灯的使用时间。2、方法:波长,这个是直接原因,你这个物质测过紫外吗?在这个波长下有没有吸收呢?如果波长错了,那你就别费劲了。溶剂,你的
液相色谱中出现气泡会有什么后果
流动相不过滤。因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏,而常用的方法是滤过,可采用Millipore滤膜(0.2μm或0.45μm)等滤器。泵的入口都应连接砂滤棒(或片)。输液泵的滤器应经常清洗或更换。使用后没有及
液相色谱中出现气泡会有什么后果
流动相不过滤。因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏,而常用的方法是滤过,可采用Millipore滤膜(0.2μm或0.45μm)等滤器。泵的入口都应连接砂滤棒(或片)。输液泵的滤器应经常清洗或更换。使用后没有及
液相色谱中出现气泡会有什么后果
由于气泡的存在,会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰,严重时会造成分析灵敏度下降。气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳定,使基线起伏。
液相色谱中出现气泡会有什么后果
流动相不过滤。因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏,而常用的方法是滤过,可采用Millipore滤膜(0.2μm或0.45μm)等滤器。泵的入口都应连接砂滤棒(或片)。输液泵的滤器应经常清洗或更换。使用后没有及
液相色谱中出现气泡会有什么后果
由于气泡的存在,会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰,严重时会造成分析灵敏度下降。气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳定,使基线起伏。
气相色谱仪操作时,进样不出峰
可能有五个原因:灵敏度选择太低。汽化室进样口密封垫漏气。汽化室与色谱柱或柱后至检测器之间漏气。注射针使用过久本身漏气,或汽化室温度太低。输入电缆线断路或短路,或极化电压没加上。气相色谱仪,指将分析样品在进样口中气化后通过对欲检测混合物中组分有不同保留性能的色谱柱,得到各组分的检测信号的仪器。气相色谱
气相色谱峰面积计算时,基线向下漂移严重
积分方法有问题,试试修改参数,或者直接手动积分,沿基线积分。
鬼峰或交叉污染问题
系统的污染主要是由鬼峰或交叉污染造成的。如果鬼峰的峰宽与样品的峰类似(具有类似的保留时间),则污染物很可能是与样品同时进入色谱柱的。进样器中可能存在额外的化合物(即污染物)或样品本身存在这些化合物。溶剂、样品瓶、瓶盖和注射器中的杂质只是某些可能的污染源。进样样品和溶剂空白有助于找到可能的污染物源。如
做HPLC的“鬼峰”知识
鬼峰,顾名思义,就是指在相同的色谱条件下,有时候出现,有时候消失的杂峰。鬼峰产生的原因是多种多样的,查询了相关文献,结合本人以往的经验,来谈谈鬼峰的成因及应对策略,主要体现在以下几个方面:1、流动相、样品及仪器中存在杂质。运行梯度洗脱时,由于开始时有机相比例不高,洗脱能力不强,部分杂质在便富集在色谱
反相液相色谱与正相液相色谱分析时,出锋顺序如何
常见物质官能团的极性顺序:烷基〈卤素〈(F〈 Cl〈 Br〈 I )〈醚〈硝基〈睛〈叔胺〈酯〈酮〈醛〈醇〈酚〈伯胺〈酰胺〈羧酸〈磺酸。在反相液相色谱法中,物质极性强的先出峰,极性弱的后出峰,在正相色谱中相反,物质极性强的后出峰,极性弱的先出峰。
液相色谱出峰延迟或者不出峰,是什么原因
可以看看色谱仪的基线是不是正常的形状,泵压是否正常,看看有没有漏液,流路有没有从洗脱切换到正常进样的流路。再有就是将正常出峰的色谱仪上的色谱柱换上试试。如果流动相,流速等参数相同,延迟出峰就要考虑流路和色谱柱是否有问题了,如果完全不出峰的话,就要再考虑检测器的问题。
做气相色谱和液相色谱时怎么样选择色谱柱
气相色谱柱选择:柱长:增加柱长可提高分离效果。但柱长过长,使分析时间延长。所以在满足一定分离度的条件下,应选用尽可能短的色谱柱。填充柱的柱内径一般为 3~6 mm,毛细管柱的内径0.1~0.5 mm。固定液的用量选择:担体的表面积较大时,固定液用量可多些,允许的进样量也相应增加。但从速率方程式的传质
简述液相色谱试验时的管子切割与安装注意事项
(1)管子的断面必须垂直,否则,将会产生死体积而引起色谱峰峰形扩展。 (2)确保管子内表面不被损伤,如果损伤,可能会发生管路堵塞。 (3)将管子完全插入开口端,直至其与开口端的末端相碰为止。否则,将会产生死体积而引起色谱峰峰形扩展。 (4)不要过分拧紧螺帽,以防损坏螺纹。