高效液相色谱常见故障处理
故障1:在移动相存在气泡,关闭泵,打开排气阀,按下清洗键和通风口,气泡继续从过滤器中冒出来,进入移动相,无论打开多少次清洗键,都不能清除连续产生的气泡。 理由: 过滤器在水中浸泡很长时间,由于霉菌在过滤头中的生长和传播,过滤器被细菌的形成所堵塞。"缓冲器很难顺利通过过滤头,空气在泵的压力下通过过滤器进入移动相。过滤头用5%硝酸溶液浸泡,超声清洗15 min。滤头还可以在5%硝酸溶液中浸泡12小时,轻轻震荡36小时,然后用纯净水冲洗几次,打开排气阀,打开净化键,从滤池中取出气体,如果过滤器中还有气泡,则继续将过滤器浸泡在5%硝酸溶液中。如果过滤器内没有气泡继续出现,就意味着过滤器内的霉菌可以被硝酸破坏,流动相可以顺利通过过滤器,打开排气阀,打开泵流量调节1。0×30 mL/min,冲洗1小时左右,即可清洗滤液。关闭减压阀,用纯甲醇冲洗半小时。 故障2:柱压高; 原因: (1)缓冲液盐份如,乙酸铵等,沉积柱内......阅读全文
高效液相色谱常见故障处理
故障1:在移动相存在气泡,关闭泵,打开排气阀,按下清洗键和通风口,气泡继续从过滤器中冒出来,进入移动相,无论打开多少次清洗键,都不能清除连续产生的气泡。 理由: 过滤器在水中浸泡很长时间,由于霉菌在过滤头中的生长和传播,过滤器被细菌的形成所堵塞。"缓冲器很难顺利通过过滤头,空气在泵的压力下通
液相色谱柱常见故障处理
液相色谱柱在使用一段时间后,会出现一定的常见故障,如果不能很好的判断并解决就会影响色谱柱的使用效果,从而影响样品的分析结果。小编为您总结怎么正确对液相色谱柱常见故障的判断及排除,希望对您正确使用液相色谱仪有所帮助。液相色谱柱常见的几种故障判断及排除方法:1、当色谱柱压高于正常值,有三种情况:(1)柱
高效液相色谱样品预处理地位
高效液相色谱仪分析样品的预处理方法有过滤、离心、加速溶剂萃取、超临界流体萃取、固相萃取、固相微萃取、液相微萃取和衍生化等。01过滤 常用的滤膜材质有纤维素、聚四氟乙烯和聚酰胺。其中聚酰胺应用最广,是亲水材料,适合水溶液的过滤,不被HPLC常用溶剂所腐蚀,不含添加剂。 加速溶剂萃取 1、原理
高效液相色谱堵塞如何处理
首先说一下原理:异丙醇的粘度比较高。如果是不溶性微粒,或者气泡之类的东西堵住了管路,异丙醇可以把他们粘下来。第二,如果是比例阀堵了。建议四个管路都冲,每个管路25%。如果是某一个管路堵了,那就单独冲洗这一个通道就可以。第三,冲洗方法:先把色谱柱卸下来,换上两通。异丙醇对色谱柱有伤害。最好不要过柱子。
高效液相色谱堵塞如何处理
首先说一下原理:异丙醇的粘度比较高。如果是不溶性微粒,或者气泡之类的东西堵住了管路,异丙醇可以把他们粘下来。第二,如果是比例阀堵了。建议四个管路都冲,每个管路25%。如果是某一个管路堵了,那就单独冲洗这一个通道就可以。第三,冲洗方法:先把色谱柱卸下来,换上两通。异丙醇对色谱柱有伤害。最好不要过柱子。
高效液相色谱堵塞如何处理
首先说一下原理:异丙醇的粘度比较高。如果是不溶性微粒,或者气泡之类的东西堵住了管路,异丙醇可以把他们粘下来。第二,如果是比例阀堵了。建议四个管路都冲,每个管路25%。如果是某一个管路堵了,那就单独冲洗这一个通道就可以。第三,冲洗方法:先把色谱柱卸下来,换上两通。异丙醇对色谱柱有伤害。最好不要过柱子。
高效液相色谱堵塞如何处理
首先说一下原理:异丙醇的粘度比较高。如果是不溶性微粒,或者气泡之类的东西堵住了管路,异丙醇可以把他们粘下来。第二,如果是比例阀堵了。建议四个管路都冲,每个管路25%。如果是某一个管路堵了,那就单独冲洗这一个通道就可以。第三,冲洗方法:先把色谱柱卸下来,换上两通。异丙醇对色谱柱有伤害。最好不要过柱子。
高效液相色谱之高效反相液相色谱(一)
反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式,在生物大分子的反相液相色
高效液相色谱之高效反相液相色谱(二)
附:色谱柱操作说明,(以迪马公司Diamonsil(TM)柱为例)1. 色谱柱常规参数订货号:Catalog.No. 产品ZL号 Serial No.出厂日期 Date填料 Column Paking 如,Diamonsil(TM)钻石C18 5цm柱规格 Col
高效液相色谱之高效排阻液相色谱
高效液相色谱(High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC)又叫高压、高速、近代液相色谱,通常叫做高效液相色谱。它是60年代中期才建立的一种高效快速分离化合物的方法,到了70年代后期才广泛用于蛋白质的分离纯化方面,现已成为分离纯化蛋白质非常有效的方
高效液相色谱分离度不好怎么处理
可以通过调整流动相比例、调整流动相PH值、更换其他牌子的色谱柱和增加色谱柱的长度等方法尝试解决。1、调整流动相比例:检测使用的色谱柱有较高的理论塔板数,能提供更好的分离度,从而对可能存在的杂质有更大的分离的可能性;可以通过同时调整流速、减少进样量来进行比例的调整;2、调整流动相PH值:流动相pH值改
高效液相色谱分离度不好怎么处理
可以通过调整流动相比例、调整流动相PH值、更换其他牌子的液相色谱柱和增加色谱柱的长度等方法尝试解决。 1.调整流动相比例:检测使用的液相色谱柱有较高的理论塔板数,能提供更好的分离度,从而对可能存在的杂质有更大的分离的可能性;可以通过同时调整流速、减少进样量来进行比例的调整;
高效液相色谱分离度不好怎么处理
可以通过调整流动相比例、调整流动相PH值、更换其他牌子的液相色谱柱和增加色谱柱的长度等方法尝试解决。1.调整流动相比例:检测使用的液相色谱柱有较高的理论塔板数,能提供更好的分离度,从而对可能存在的杂质有更大的分离的可能性;可以通过同时调整流速、减少进样量来进行比例的调整;2.调整流动相的pH值:流动
液相色谱柱常见故障及处理办法
气泡溢出流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入流动相,无论打开purge键几次,都无法清除不断产生的气泡。原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过
高效液相色谱常见故障的断定及解决
(一)保留时间变化1.柱温变化 柱恒温,必要时需配置恒温箱;2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱;3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液;4.柱污染 每天冲洗柱;5.柱内条件变化 稳定进样条件,调节流动相;6.柱快达到寿命 采用保护柱。(二)保留时间缩短1.流速
高效液相色谱常见故障的断定及解决
(一)保留时间变化1.柱温变化 柱恒温,必要时需配置恒温箱;2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱;3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液;4.柱污染 每天冲洗柱;5.柱内条件变化 稳定进样条件,调节流动相;6.柱快达到寿命 采用保护柱。(二)保留时间缩短1.流速增
高效液相色谱新买的色谱柱如何处理
此柱填充的是反相或者极性胶联型态的硅胶基质材料的硅胶。硅胶形态的柱子用于正相(非水)条件。反相(C8,C18,ODS,RP-8和RP-18)通常用于反相条件(水相)。极性胶联型(APS,diol,CN和NH2)依照应用目的,可以用于正相和反相条件。建议不要将一个相同的柱子用于差别非常大的条件下,这是
高效液相色谱分离度不好该怎样处理
1、改变流动性比例,可同时调整流速,减少进样量。2、减少有机相比例,例如50%乙腈可改成40%、30%等,注:研发时可用。3、改用四元高压梯度洗脱4、更换色谱柱分离不好有很多原因,可以先试试减少时样量.最好先从流动相入手比较好解决!!最常用的就是调PH.改变流动相比例是最好的方法。换梯度洗脱,更换分
高效液相色谱故障及应急处理办法汇总
高效液相色谱在使用过程中常会出现一些影响分析结果的问题,如果使用人员了解常见问题及其成因和相关解决方法,就能做到早预防勤维护,使分析结果保持较好的稳定性与较高的精确性。高效液相色谱仪系统组成:液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言,柱子、泵和检测
高效液相色谱分离度不好该怎样处理
个人建议:1、改变流动性比例,可同时调整流速,减少进样量。2、减少有机相比例,例如50%乙腈可改成40%、30%等,注:研发时可用。3、改用四元高压梯度洗脱4、更换色谱柱分离不好有很多原因,可以先试试减少时样量.最好先从流动相入手比较好解决!!最常用的就是调PH.改变流动相比例是最好的方法。换梯度洗
高效液相色谱柱的十大常见故障
高效液相色谱柱是高效液相色谱的核心部件,它主要起到了分离作用。色谱柱同样也是一个消耗品,在流动相冲刷的过程和样品在分析的过程,填料损失和污染使得色谱柱的性能慢慢下降。所以,对于高效液相色谱尤其是常用的C18柱,需要在一定时间内对其性能做一个评估,同样,新的色谱柱也要对色谱柱做一个有效的体检。
高效液相色谱柱常见故障的判断及排除
色谱柱简介:南京科捷分析仪器研究所色谱柱按分析方法需要分为填充柱或毛细管柱。置于柱箱内,一端用专用接头连于进样器,一端用接头连于检测器要注意的是连接尺寸及空端位置需按仪器型号和柱型严格按仪器使用说明上操作。 高效液相色谱柱常见故障的判断及排除 现 象判 断排 除 方 法1、柱压高于
高效液相色谱柱的常见故障及排除方法
液相色谱仪的色谱柱在使用一段时间后,会出现一定的常见故障,如果不能很好的判断并解决就会影响色谱柱的使用效果,从而影响样品的分析结果。 高效液相色谱柱常见的几种故障判断及排除方法: 1柱压问题柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时
高效液相色谱特点
①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。 ②高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。 ③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离
高效液相色谱原理
以高压下的液体为流动相,并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。构造可分为高压输液泵,色谱柱,进样器,检测器以及数据获取与处理系统等部分。与气相色谱法相比,液相色谱法不受样品挥发性和热稳定性及相对分子质量的限制,只要求把样品制成溶液即可,非常适合于分离生物大分子、离子型化合物,不稳定的天然产物以
高效液相色谱技术
高效液相色谱(HPLC:High Performance Liquid Chromatography )是化学、生物化学与分子生物学、医药学、农业、环保、商检、药检、法检等学科领域与专业最为重要的分离分析技术,是分析化学家、生物化学家等用以解决他们面临的各种实际分离分析课题必不可缺少的工具。国际市场
高效液相色谱柱
一、怎样选择色谱柱 现代高效液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。 (1)硅胶基质填料: 1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(
高效液相色谱原理
色谱法是一种分离技术,试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。 其中的一相固定不动,称为固定相; 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体(气体或液体),称为流动相。 当流动相中携带的混合物流经固定相时,其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质
反相高效液相色谱
实验材料 蛋白质标样试剂、试剂盒 乙睛(HPLC级)去离子水(HPLC级) 三氟乙酸(TFA)仪器、耗材 HPLC 色谱系统 反相柱实验步骤 1.进行空白或对照层析谱分析(即在步骤①中不加样)。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系统评估的标准色谱条件。(1)线性梯
高效液相色谱原理
采用高效液相色谱(HPLC)法分离单糖和寡糖,较多采用氨基柱,乙腈和水作为流动相,此法具有完全分离麦汁、发酵液和啤酒中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和麦芽三糖的优点。本文采用Hypersil NH2柱分析麦汁、发酵液和啤酒中三糖以内的可发酵糖。至今尚未见到采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法分离测