HPLC是做什么的?原理?操作方法?

HPLC是高效液相色谱,英文全称是High Performance Liquid Chromatography。该方法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中被用来做重要的分离分析技术。用途:高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂,抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂的分析等物质的分析。原理:高效液相色谱以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析和分离。操作方法:如下图所示,溶剂贮器中的流动相被泵吸入,经梯度控制器按一定的梯度进行混合然后输出,经测其压力和流量,导入进样阀(器)经保护柱、分离柱后到检测器检测,由数据处理设备处理数据或记录仪记录色谱图,馏分收集器收集馏分,废......阅读全文

HPLC检测样品出锋太快怎么办

1、降低流速;2、降低柱温;3、改变流动相配比(样品是水溶性的话就降低流动相中水的比例)

Waters-Alliance-HPLC溶出度系统介绍(二)

效率最大化高样品通量如果有大量的样品需要分析,多水浴槽取样可帮助您实现最高的分析效率和有效的操作成本控制。Alliance溶出度系统可从最多两个溶出水浴槽中采集和处理溶出样品(每个水浴槽中有六到八个溶出杯)。直观易用的用户界面简单易学的溶出度样品设置向导可通过易于操作的分步方式设置 溶出度测试的所有

hplc极性超大的物质选择什么色谱柱

硅胶柱,HILIC色谱柱(如果样品是水溶性的话)

HPLC柱平衡慢的常见原因有哪些?

柱平衡慢的常见原因有哪些? 柱平衡慢的常见原因是,组分在旧的或新的流动相中对柱吸附强,或者,在新的流动相中浓度小甚至为零:a.流动相含有胺改良剂; b.流动相含有离子对试剂;硅胶柱;流动相中有四氢呋喃。可考虑采用专用柱用于特殊的方法,不用时将柱折下来,注满适当的溶剂或流动相,密封保管,不再作

HPLC测变压器油中糠醛含量

 1、前言    长期以来,采用气相色谱法检测绝缘油中的CO、CO2和低炭烃类含量作为判断电气设备固体绝缘材料老化程度或进行故障分析的依据。但是实验证明,绝缘油氧化分解也能产生绝缘纸老化、降解的特征产物CO和CO2,所以给正确判断带来了难度。    在充油电气设备中,由于构成固体绝缘的纤维质材料的老

HPLC氘灯——基线不稳问题原因分析探讨

氘灯的技术性能指标通常包括氘灯能量、噪音、漂移这三个重要的指标,其中,对于最终的用户来说,可能碰到的最多的问题就集中在氘灯能量上,但在氘灯销售过程中,还经常碰到购买氘灯的客户反映氘灯基线不稳,后来通过反复的确认和对比,发现其实绝大多数的情况下,最终都不是氘灯的问题,因此,在下面的内容中,我们针对经常

超临界萃取人参皂苷及HPLC分析

采用超临界CO2萃取法提取人参中的人参皂苷,通过单因素试验探讨萃取方式、萃取温度、萃取时间、夹带剂用量以及萃取次数对人参皂苷提取率的影响,采用正交试验对超临界CO2萃取人参皂苷的工艺条件进行优化,并采用高效液相色谱法对萃取物中的人参皂苷单体Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2、Rd进行测定。结果表明:

沃特世Alliance-HPLC系统申报ANTOP奖

  金秋十月,ANTOP 2018第二期申报工作正在如火如荼的进行,多家科学仪器企业竞相参与申报,这里将为您介绍ANTOP奖项“打榜”产品。  沃特世科技(上海)有限公司的Waters Alliance HPLC系统申报“液相色谱稳定性领跑者”奖。沃特世Alliance系统于1996年问世,至今20

液相色谱(HPLC)漏液怎么办

  通常可以通过拧紧或更换管路接头来解决漏液的问题。但值得注意的是过份拧紧会导致金属接头的漏液和塑料接头的磨损。如果通过稍微拧紧接头不能解决漏液的问题,就必须将接头取下,检查是否损坏(例如,卡套损坏、密封表面有杂质);损坏的接头应该更换掉。   1. 接头处漏液。   一般通过拧紧、清洗、更

IDEX-Health--Science-LLC参加HPLC-2010国际大会

        2010高效液相分离和相关技术第35届国际研讨会于2010年6月19日至24日在美国马萨诸塞州波士顿的海因斯会议中心和喜来登酒店盛大举行。经过多年的发展,HPLC大会已经成为液相分离学界最重要的会议。这一国际性的系列会议涉及了多个学科门类,汇集了世界上多位知

你是否正走在购买HPLC系统的路上?

  分析测试百科网讯 高效液相色谱(HPLC)是很多科学家必不可少的科研工具。HPLC可用于多种化学和生物化学的分离、鉴定、纯化和定量分析,由泵、进样器、分离柱、检测器和数据处理系统组成。  那么如何购买到称心如意的HPLC系统?购买HPLC需要注意什么?国外有人在使用HPLC系统人群中做了这样一份

半制备HPLC是干什么的

半制备HPLC主要用于制备,即通过液相色谱柱对混合物进行分离后,收集目标馏分,再将流动相挥去后获得目标化合物。主要应用于植化、制药、化工行业。

HPLC泵压明显的偏高原因分析

流速设定过高;流动相或进样中有机械杂质,造成保护柱、柱前筛板或在线过滤器阻塞;流动相粘度过大;柱温过低;缓冲盐结晶;压力传感器故障。2、 基线不稳,上下波动或漂移的原因是什么,如何解决?a.流动相有溶解气体;用超声波脱气15-30分钟或用充氦气脱气。b.单向阀堵塞;取下单向阀,用超声波在纯水中超20

HPLC日常维护及常见故障诊断

HPLC日常维护 HPLC常见故障诊断

环境分析中HPLC检测法的应用

 由于化学工业的发展和天然化合物的开发,使得环境污染越来越严重。据相关新闻报道,被确认为环境污染物的已超过350种,人们能在水中、空气中、污泥里、鱼、禽体内发现这些污染物。通过食物链,它们将进一步污染肉类、蛋类、粮食、蔬菜等。环境污染的检测早已成为分析化学中重要的研究课题之一。  液相色谱(HPLC

网络研讨会HPLC故障排除与维护

  高效液相色谱(HPLC)是一种强大样品分析工具,已经深入地渗透到各行各业,成为制药、食品、环境、生命科学、临床诊断、石油化工、公共安全等领域不可或缺的分析手段,其重要性已获得广泛认同。  默克Supelco®液相色谱柱由原Merck与原Sigma两部分色谱柱产品组成,1973年开始提供商业化液相

在HPLC分析中死时间Tm的测量

在HPLC分析中,死时间Tm的测量是一个比较困难的问题,这也直接影响了高精度kovats保留指数在HPLC中的应用。死时间表示了一个在高效液相色谱固定相上未被滞留组分的保留时间,由于高效液相色谱立法的多样性,很难找到像气相色谱那样选择空气或甲烷为测量死时间的通用探针,其实平时分析时用这个死时间的意义

Waters-Alliance-HPLC溶出度系统介绍(一)

使溶出度测试结果更可信、更高效Waters® Alliance®HPLC溶出度系统是一套高通量、自动化的在线HPLC平台,适用于溶出度和药物释放度测试。本系统可自动完成整套测试:从投放药剂开始测试,到样品采集、分析和结果计算,再到测试报告的发布。等份样品将从单溶出或双溶出水浴槽直接传输到分离单元

水质对液相色谱仪(HPLC)的影响

1.颗粒颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且熔化它,这会导致回压增大。颗粒还会表现为另一种固相,可能改变样品的组分。2.有机物超纯水中的有机物可能影响色谱峰的分离度和积分、可能导致鬼峰、还可能改变固定相的选测性以及影响色谱基线。3.离子离子浓度的改变会影响分离结果,部分能吸收UV的离子会

HPLC色谱柱柱压很高,什么原因

甲醇和水以1:1的比例混合时,是压力最大值,所以你遇到的是正常现象,不用担心。你查看各种液相色谱的方法可以发现,基本上没有使用50:50的比例来等度分析的。

HPLC的日常维护和使用注意事项

   HPLC以它定量分析结果准确、分析周期短、分析范围广及分析检测限低等优势,在食品添加剂、药物成分分析等多领域得到了广泛的应用。本文就液相色谱仪在实际操作时应注意的事项及维护做了简单介绍。   主要部件介绍   输液系统   输液系统主要包括在线脱气装置、高压输液泵、梯度洗脱装置。在线脱气

高效液相色谱技术(HPLC)的技术原理

尽管二维凝胶电泳(2-DE)是常用的对全蛋白组的分析方法,但其存在分离能力有限、存在歧视效应、操作程序复杂等缺陷。对于分析动态范围大、低丰度以及疏水性蛋白质的研究往往很难得到满意的结果。Chong等使用HPLC/质谱比较分析恶性肿瘤前和癌症两种蛋白质差异表达。利用HPLC分离蛋白质,并用MALDI-

图解HPLC填料中的表面多孔颗粒(二)

现代的SPPs 与早期直径40μm的填料相比,现代SPP填料体积明显减小——直径5.0μm,薄层厚度0.25μm,孔径300Å。颗粒的核心变成坚固的SiO2,表面覆盖一层薄薄的纳米颗粒。这种SPP色谱柱被广泛用于生物大分子(如蛋白质)的快速分离。生物大分子的扩散系数只有普通小分子的1/10

SigmaAldrich推出HPLC方法计算器

您希望用一根色谱柱解决多种应用吗?您想优化当前不尽人意的HPLC条件吗?您正在为HPLC方法的转移而苦恼吗?  那么,推荐您尝试Sigma-Aldrich最新推出的HPLC方法计算器。  Sigmaaldrich首款官方Android、itunes、iPad应用

HPLC色谱柱的特点和发展方向

高效液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的分离分析技术,是现代分离测定的重要手段。问世以来,因其具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度好、能分析高沸点但不能气化的热不稳定生理活性物质的特点而被广泛应用于生物化学、药物及临床分析。高效液相色谱是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比

HPLC色谱柱柱压很高,什么原因

柱压的影响因素有一部分是流动相的黏度。流动相黏度越大,柱压越高。甲醇和水混合后,黏度会升高,其最大黏度时两者比例差不多是50比50 。另外,固定相的颗粒大小或者均匀程度以及流动相的流速也会对柱压有影响。不过看你柱压这么高,八成是柱子堵了。。。把柱头的过滤套子拆下来放稀HNO3中超声一下,再放在超纯水

关于食品化学分析中HPLC方法

  自HPLC仪问世以来,其硬件技术、分析方法及应用研究发展迅速。本文仅就在食品化学分析中,HPLC分析技术与应用进展概述如下。   HPLC分析方法进展   ● 液-固色谱法(LSC) LSC是根据组分基团对吸附剂表面亲和力的大小,决定了其保留程度。在LSC色谱中应用广泛的极性固定相是硅胶。

合理选择HPLC稀释剂有多重要?

  应用高效液相色谱检测时,流动相的选择十分重要,因此稀释剂的选择就成为重中之重。根据高效液相色谱检测的不同要求,可以选择不同的类型的稀释剂。而选择时的LC-MS级这一指标到底有何意义?本文对此予以了详尽的解答。   众所周知,在高效液相色谱检测中要使用高纯度稀释剂作为流动相,在此有不同纯度指标

如何解决HPLC色谱峰峰型异常问题?

  峰型问题是液相的主要问题,在做液相过程中,我们就是要变换不同的条件来改善不好的峰型,对于各种各样的异常峰,要区别对待,从主要问题出发,一个一个加以解决。  1. 色谱图中未出峰  系统未进样或样品分解;泵未输液或流动相使用不正确;检测器设置不正确;针对以上情况成因作相应调整即可。  2. 一个峰

hplc面积归一法纯度检测的原理

该物质浓度和峰面积成正比。根据查询hplc相关信息得知,hplc面积归一法纯度检测的原理该物质浓度和峰面积成正比。原理是该物质(的官能团)在某一特定波长下有吸收,并且,该物质浓度和峰面积成正比。