HPLC是做什么的？原理？操作方法？
HPLC是高效液相色谱，英文全称是High Performance Liquid Chromatography。该方法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中被用来做重要的分离分析技术。用途：高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质，因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂，抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂的分析等物质的分析。原理：高效液相色谱以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析和分离。操作方法：如下图所示，溶剂贮器中的流动相被泵吸入，经梯度控制器按一定的梯度进行混合然后输出，经测其压力和流量，导入进样阀（器）经保护柱、分离柱后到检测器检测，由数据处理设备处理数据或记录仪记录色谱图，馏分收集器收集馏分，废......阅读全文
HPLC什么情况下使用梯度洗脱
梯度洗脱（gradient elution）又称为梯度淋洗或程序洗提。在气相色谱中，为了改善对宽沸程样品的分离和缩分析间周期，广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中，按一定程度不断改变流动相的浓度配比，称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分
超纯水对液相（HPLC）实验的影响
随着时代和科技的发展，液相等精密分析仪器已普及至与分析测试有关的行业，对实验水质要求也愈来愈高。现今液相(HPLC) 都要求用户使用超纯水定出平坦而没有波峰的基线以保证分析测试的灵敏度，但有部分HPLC用户因资金或习惯等原因仍沿用瓶装饮用纯净水或蒸馏水进行实验,效果往往不很理想。
HPLC色谱柱柱压很高，什么原因
柱压的影响因素有一部分是流动相的黏度。流动相黏度越大，柱压越高。甲醇和水混合后，黏度会升高，其最大黏度时两者比例差不多是50比50 。另外，固定相的颗粒大小或者均匀程度以及流动相的流速也会对柱压有影响。不过看你柱压这么高，八成是柱子堵了。。。把柱头的过滤套子拆下来放稀HNO3中超声一下，再放在超纯水
HPLC蒸发光散射检测器的原理
简介 蒸发光散射检测器（Evaporative Light Scattering Detector）设计用于高效液相色谱系统，分析任何挥发性低于流动相的化合物。ELSD的应用范围包括：碳水化合物，药物，脂类，甘油三脂，未衍生的脂肪酸和氨基酸，聚合物，表面活化剂，营养滋补品，及组合分子库等。 蒸发光散
HPLC常见问题和解决方法总汇
压 力 异 常 操作压力的变化往往是故障的征兆。从下表中找出所观察到的现象，并在右侧的列表中参考相应的解决方法。 A、 没有压力显示，没有流动相流动 原 因 解决方法 1、电源问题 1、接通电源，开机 2、保险丝被烧坏 2、更换保险丝 3、
高效液相色谱技术(HPLC)的技术原理
尽管二维凝胶电泳（2-DE）是常用的对全蛋白组的分析方法，但其存在分离能力有限、存在歧视效应、操作程序复杂等缺陷。对于分析动态范围大、低丰度以及疏水性蛋白质的研究往往很难得到满意的结果。Chong 等使用HPLC/ 质谱比较分析恶性肿瘤前和癌症两种蛋白质差异表达。利用HPLC 分离蛋白质，并用MAL
HPLC氘灯：基线不稳问题原因分析探讨
氘灯的技术性能指标通常包括氘灯能量、噪音、漂移这三个重要的指标，其中，对于最终的用户来说，可能碰到的最多的问题就集中在氘灯能量上，但在氘灯销售过程中，还经常碰到购买氘灯的客户反映氘灯基线不稳，后来通过反复的确认和对比，发现其实绝大多数的情况下，最终都不是氘灯的问题，因此，在下面的内容中，我们针
仪器简介：HPLCICPMS室：微波消解仪
仪器名称：微波消解仪规格/型号：Multiwave PRO 生产厂商：奥地利安东帕有限公司资产编号：17011178 放置地点：厦门校区泛华科技大楼B213负责人：吴雅清，电话：0592-6161598，邮箱：iac@hqu.edu.cn一、测试要求：1、样品不能含有有机溶剂2、消解溶剂不能用高氯酸
减少HPLC分析中乙腈用量方法（二）
减小色谱柱的尺寸规格 通常在HPLC分析中，经常使用直径4.6mm的柱子。而在保持分离度不变的条件下，通过减小色谱柱的尺寸可减少流动相的消耗量。从图4中可以看出，流动相的消耗量将随着色谱柱内径的减小而相应减少，具体如下所示： 4.6 mm I.D.→3.0 mm I.D.→2.0 mm
HPLC色谱柱柱压很高，什么原因
柱压的影响因素有一部分是流动相的黏度。流动相黏度越大，柱压越高。甲醇和水混合后，黏度会升高，其最大黏度时两者比例差不多是50比50 。另外，固定相的颗粒大小或者均匀程度以及流动相的流速也会对柱压有影响。不过看你柱压这么高，八成是柱子堵了。。。把柱头的过滤套子拆下来放稀HNO3中超声一下，再放在超纯水
HPLC脱气、过滤、冲洗三大步骤
和其它分析仪器一样，你若想让HPLC很好地为你工作、得到可靠的数据，首先你要保养好它，使它处于一个良好的待机状态，这样你操作它进行分析时就可以比较顺利地获得理想的结果。而且良好规范的操作习惯可以延长仪器使用寿命。大家在学校或接受仪器公司培训的时候，老师或工程师会提出很多的操作注意事项。但要是总结
Waters－Alliance－HPLC溶出度系统介绍（三）
充分利用分析结果沃特世软件解决方案可帮助您充分利用Alliance HPLC溶出度系统生成的分析结果。轻松易用的溶出度软件与Empower软件实现了无缝集成，可自动控制整个溶出过程— 从溶出到采样、分析计算，以及最后的报告生成。它内置的关系型数据库可帮助您快速简便地对实验数据进行组织、储存和
2012年IC/HPLC/ASE/AT－产品客户培训方案
一.培训课程介绍 作为全球科学服务领域的领导者，赛默飞世尔科技一直秉承用户满意度第一的企业宗旨，为客户提供最佳的售后服务。为提高用户更好的使用仪器，赛默飞世尔科技色谱产品培训中心定期举行IC、HPLC、ASE、AT 产品用户培训班。培训班分为以下的培训课程，其中新购整机客户可免费参加基
在HPLC中，如何用峰面积求浓度
有标品的话，把标品配成已知浓度a1，进样一定体积b1，得到一定的液相峰面积c1；再把样品进样一定体积b2，得到一个峰面积c2．则你的样品浓度是a2 的话，a2=a1b1c2/b2c1.因为a1，b1，c2，b2，c1均已知，故能得到浓度．
减少HPLC分析中乙腈用量方法（一）
图1. 乙腈和甲醇作为流动相时的峰的保留时间的差异。 面对全球范围的乙腈供应紧缺，如何减少乙腈在HPLC分析中的消耗量成为一个热门的话题，我们可以通过采取以下三种措施来减少乙腈在HPLC分析中的消耗量：将乙腈更换为其他溶剂；减小色谱柱的尺寸规格；通过减小填料的粒径来提高通量。这里暂
高效毛细管电泳（HPLC）的特点
高效毛细管电泳（HPLC）亦即毛细管电泳（ＣＥ），是一种发展迅猛的新型的分离分析技术，与常用的高效液相色谱法（HPLC）相比，具有分析时间短，分离效率高，适应性广，检测限低，进样量小，溶剂消耗少，自动化程度高等优点，近十多年来已广泛应用于蛋白质、氨基酸、无机离子、有机化合物、药物的分离分析，在生物医
关于进行HPLC用泵性能测试的通知
中 国 分 析 测 试 协 会 〔2007〕测协发字15号 关于进行HPLC用泵性能测试的通知 HPLC用泵生产厂家： HPLC用泵是HPLC仪器的核心，是决定HPLC仪器使用寿命的关键部件。为使国内广大用户对各厂家生产的HPLC用泵的性能有所了解，中国分析测试协会技术与标准委员会将进行一次H
HPLC－基本维护故障诊断交流讲座
1.判断仪器脱气机是否正常：打开purge阀，流速设为2ml/min，然后提起过滤头，让体系进一些空气，再放下过滤头，看气泡是否会减少来判断脱气机是否起作用； 2. 溶剂过滤头不可超声清洗，可用35%硝酸浸泡1小时后再用溶剂清洗； 3. EDTA、乙二胺四乙酸等会对液相柱的不朽钢产生腐
HPLC常见问题和解决方法汇总
压 力 异 常操作压力的变化往往是故障的征兆。从下表中找出所观察到的现象，并在右侧的列表中参考相应的解决方法。A、 没有压力显示，没有流动相流动原 因解决方法1、电源问题1、接通电源，开机2、保险丝被烧坏2、更换保险丝3、控制器设定不正确或设定失败3、a、采取恰当的设定b、修理或更换
苦参碱含量的HPLC测定法
本文采用HPLC法建立了苦参中苦参碱含量的检测方法。实验采用氨基色谱柱，以乙腈+磷酸二氢钠（80+20）为流动相，检测波长210nm，流速1ml/min，苦参碱在0.01~0.2μg范围内具有良好线性范围（R2=0.9991），RSD为0.45%（n=5）。采用HPLC法检测苦参碱简单、
HPLC基线不稳的原因及解决办法
液相色谱经常会出现基线不稳定，其主要原因和解决方法大致如下： 1 高压泵的单向阀堵塞引起基线波动；解决方法：取下单向阀，用超声波在纯水中超20分钟zui右，去除堵塞物。 2 流动相中有溶解气体引起基线波动；解决方法：用超声波脱气15~30分钟或用充氮气方法脱气，一般可解决。 3 高压泵密封垫
HPLC对流动相的一般要求
流动相就比如人体的血液，其质量直接影响到整个系统的正常运行与否。 应该使用HPLC级的溶剂，不能互相混溶的溶剂不可以直接切换!一般在水相和与其不混溶的溶剂切换时，使用异丙醇作为过渡溶剂。 注意溶剂的截止波长。截止波长是指该溶剂可以在紫外检测器中使用的最低波长，低于该波长后，溶剂会
LUMTECH－HPLC与Thermo质谱仪联机测试成功
绿绵科技有限公司，致力于用自己的服务和产品，为客户提供更高的使用和体验价值。几年来，先后向各级实验室推广引进了600余套高质量ThermoFisher的质谱产品，并引进德国先进液相色谱技术，创立了高质量的LUMTECH液相品牌。 LUMTECH液相色谱与Thermo的质谱连接 为了进一步实现
HPLC分析方法开发中流动相的调整
秘诀1：由强到弱： 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验， 这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。秘诀2 三倍规则 ：每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量，保留因子约增加3倍，此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中，注意
图解HPLC填料中的表面多孔颗粒（一）
表面多孔颗粒（superficially porous particle,以下简称SPP）至今已有40多年的发展历史。最近，这种拥有坚固粒核和表面薄层多孔结构的填料又获得了长足发展——粒径低于3μm的表面多孔颗粒较粒径低于2μm的全多孔颗粒，具有更好的柱效，且压降只有后者的一半。本文介绍了
HPLC分析一物质，如何消除梯度峰
如果是紫外检测器，是无法完全消除的，信号的产生不仅仅是吸收，还有反射等，梯度洗脱时流动相的变化肯定会引起响应的变化。如果用ELSD就没有。所谓的梯度峰，是在进行空白梯度是能够重现的色谱曲线变化，如果不能重复，则有两种可能：1. 有杂质洗脱出来2. 色谱系统不一致（在进行梯度洗脱时，完全一致的条件，第
HPLC的眼睛——检测器的秘密（一）
高效液相色谱仪是由溶剂贮液器、泵、进样器、色谱分离柱、检测器和数据处理系统几部分组成。检测器、泵与色谱柱是组成高效液相色谱仪的三大关键部件，其中检测器是高效液相色谱仪的眼睛，它将样品的物理或化学特性信息转换成易测量的电信号输入到记录仪，并记录下来，得到样品组分分离的色谱图。 检测器的类型
HPLC法中的超纯水有多重要？
先进、高效的实验室分析方法搭配高精尖的科学仪器得出的实验结果必然是越来越精确。其实，要得到高质量的检测数据，实验用试剂起着决定性意义。比如超纯水就是起决定性作用的实验材料。 近几年来，实验室分析技术有了很大的改进。与此同时，检测仪器设备也越来越精密、灵敏，这就要求所使用的试剂、稀释剂和水要达到
教你如何使HPLC系统顺利通过FDA检查
HPLC在QC实验室控制系统中主要用来检测原辅料、中间体（半成品）、产品的含量和（或者）杂质。现在已经非常普及了，在FDA的cGMP认证或者审计中，是“中枪”频率非常高的仪器之一。结合自己的经验，和朋友们分享下如何使HPLC系统顺利通过FDA的检查，不出现或者仅出现一般的缺陷项。
HPLC蒸发光散射检测器的原理
蒸发光散射检测器（Evaporative Light Scattering Detector）设计用于高效液相色谱系统，分析任何挥发性低于流动相的化合物。ELSD的应用范围包括：碳水化合物，药物，脂类，甘油三脂，未衍生的脂肪酸和氨基酸，聚合物，表面活化剂，营养滋补品，及组合分子库等。 蒸发光散射检