HPLC是做什么的？原理？操作方法？
HPLC是高效液相色谱，英文全称是High Performance Liquid Chromatography。该方法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中被用来做重要的分离分析技术。用途：高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质，因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂，抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂的分析等物质的分析。原理：高效液相色谱以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析和分离。操作方法：如下图所示，溶剂贮器中的流动相被泵吸入，经梯度控制器按一定的梯度进行混合然后输出，经测其压力和流量，导入进样阀（器）经保护柱、分离柱后到检测器检测，由数据处理设备处理数据或记录仪记录色谱图，馏分收集器收集馏分，废......阅读全文
HPLC故障排除：保留时间问题（三）
图9的示例显示了在约25％、50％和75％B的线性（箭头）条件下，空白梯度运行呈现有规律的偏移。图8. 图9显示了HPLC系统的梯度阶梯测试结果。（a）0、10、20、30、40、45、50、55、60、70、80、90和100％B的梯级；（b）以1％的梯级向上跟踪至45-55％。箭头显示了50和5
HPLC的固定相和流动相（一）
在色谱分析中，如何选择最佳的色谱条件以实现最理想分离，是色谱工作者的重要工作，也是用计算机实现HPLC分析方法建立和优化的任务之一。本章着重讨论填料基质、化学键合固定相和流动相的性质及其选择。一、基质（担体）HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质，也可以是有机聚合物基质。无机物基质主要是硅胶和氧化铝
HPLC前处理过滤颗粒物来源
目前，HPLC已成为不可或缺的分析仪器。为了提高数据的可靠性和延长HPLC寿命，过滤是相当必要的。下面围绕液相前处理过滤时颗粒物主要的三种来源进行说明。 一、过滤的必要性 任何颗粒物进入HPLC系统后都会在柱子入口端被筛板挡住，最后的结果是将柱子堵塞，表现出的特征是系统压力增加并使色谱峰变形。因此，
HPLC故障排除：保留时间问题（一）
可能致因预防措施/解决方案 减少保留时间 键合固定相的损失 （流失） 更换柱 （更换色谱柱）在pH值为2-8的硅基（硅胶基质）RP柱上操作 固定相上的（存在）活性基团 在流动相中使用
HPLC的酸清洗和钝化操作步骤
HPLC的酸清洗和钝化！HPLC系统内部可能的污染物来自人的触摸，暴露在实验室化学环境，与零部件制造相关的残留物，或来自先前的流动相和样品的残余物。虽然HPLC系统自身也会逐步地被流动相清洗，但某些释放出的杂质会吸附在色谱柱上以及检测器润湿的表面上，因而会降低总的性能。 磷酸清洗：通常用于从系统中除
hplc面积归一法纯度检测原理
高效液相色谱法。在实验里hplc面积，归一法纯度检测的原理是高效液相色谱法来进行的。hplc面积归一法纯度检测的原理该物质浓度和峰面积成正比。原理是该物质(的官能团)在某一特定波长下有吸收。
HPLC故障排除：保留时间问题（二）
2.3.色谱柱温度变化会导致保留时间的变化：每1°C的温度变化会引起1-3％的保留时间变化。如果不使用柱温箱（即“室温”条件），由于实验室温度的变化，温度通常会在日间（和夜间）循环（周期性）变化。虽然在室内恒温器的测量下，实验室温度显示为恒定，但是HPLC系统的微观（微）环境可能会发生显著变化，尤其
HPLC、UV、GC、TLC是什么检测方法
TLC:薄层色谱法.系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，根据比移值（Rf）与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值（Rf）作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，也用于跟踪反应进程。P
调整HPLC的流动相有哪些原则？
液相色谱仪的流动相调整非常重要，一般来说，应该考虑以下方面。 一 由强到弱。一般先用90%的乙腈/水进行试验，这样可以很快地得到分离结果，然后根据出峰情况调整有机溶剂的比例。 二 三倍规则。每减少10%的有机溶剂的量，保留因子约增加3倍，此为3倍规则。调整过程中，注意观察各个峰的分离情况。 三
HPLC中PDA检测器是什么
二极管阵列检测器，英文表述为PDA(photo-diode array)，是上个世纪八十年代发展起来一种用于液相色谱检测的光学多通道检测器。二极管阵列检测器 即光电二级阵列管检测器又称光电二极管列阵检测器或光电二极管矩阵检测器，表示为PDA、PDAD是20世纪80年代出现的一种光学多通道检测器。在晶
HPLC中PDA检测器是什么
二极管阵列检测器，英文表述为PDA(photo-diode array)，是上个世纪八十年代发展起来一种用于液相色谱检测的光学多通道检测器。二极管阵列检测器 即光电二级阵列管检测器又称光电二极管列阵检测器或光电二极管矩阵检测器，表示为PDA、PDAD是20世纪80年代出现的一种光学多通道检测器。在晶
HPLC中PDA检测器是什么
二极管阵列检测器，英文表述为PDA(photo-diode array)，是上个世纪八十年代发展起来一种用于液相色谱检测的光学多通道检测器。二极管阵列检测器 即光电二级阵列管检测器又称光电二极管列阵检测器或光电二极管矩阵检测器，表示为PDA、PDAD是20世纪80年代出现的一种光学多通道检测器。在晶
HPLC、UV、GC、TLC是什么检测方法
TLC:薄层色谱法.系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，根据比移值（Rf）与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值（Rf）作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，也用于跟踪反应进程。P
HPLC输液泵系统的维护事项
一套HPLC系统大致分为以下几个部分：流动相前处理部分、输液部分、进样部分、分离部分、检测部分。 输液系统即是指高压恒流泵，其作用是能提供稳定准确的流速。泵的维护主要分为以下三个部分。 1、溶剂过滤头。吸液过滤头，或称沉子，主要作用是过滤流动相中可能存在的颗粒性杂质。长时间使用后，杂质有可能阻塞
博纳艾杰尔参加HPLC展会
2010年6月24日，博纳艾杰尔参加了在美国波士顿举办的HPLC2010届展会。 会上，博纳艾杰尔展示我们的重点产品，Venusil 系列色谱柱和Cleanert SPE固相萃取系列产品，引起了欧美客户的强烈兴趣，大家纷纷向参展人员询问使用注意
HPLC、UV、GC、TLC是什么检测方法
TLC:薄层色谱法.系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，根据比移值（Rf）与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值（Rf）作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，也用于跟踪反应进程。P
如何用电脑绘制HPLC色谱图
方法如下：精密取相应对照品，加适当的溶剂溶解，分别精密量取1、2、3、4、5ml（或相应成梯度的量），稀释成各个梯度的溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积为纵坐标，以浓度C为横坐标进行线性回归。在Excel中就直接可以绘制高效液相色谱法标准曲线。有的色谱工作软件能直接绘制标准曲线。色谱法也叫层
用于HPLCSEC分析的超纯水
高效液相色谱(HPLC)是一种进行物质分离、鉴定和定量的分析方法。与其它通常采用梯度模式的各种生物聚合物HPLC(离子交换、疏水相互作用和反相色谱)不同，SEC(尺寸排阻色谱法)通常采用等度方法。 尺寸排阻色谱法 尺寸排阻色谱法(SEC)包括凝胶渗透色谱法(GPC)和凝胶过滤色谱法(在含水条
HPLC柱柱压过高原因分析
柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。1、拆去保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查；2、把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查；3、将柱子的进出口反过来
HPLC实验中手动进样的原理
HPLC是高效液相色谱，英文全称是High Performance Liquid Chromatography。该方法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中被用来做重要的分离分析技术。原理：高效液相色谱以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等
手性HPLC峰面积怎么计算ee值
手性HPLC峰面积计算ee值：测定ee值不需要标准品的啊，只需要手性柱把两个异构体分开，然后两个峰面积之差除以两者峰面积之和即可。首先用手性柱测试外消旋标准品，测试两个对映异构体的峰面积比例（一般1：1，也有不成1：1的）。根据这个比例测定样品ee值。没有标准品，做手性柱，出现两个峰的峰面积之比就是
HPLC芯片液质联用系统介绍
纳流微喷液质联用技术因为能大大提高微量样品中蛋白质检测的灵敏度，而被广泛用于蛋白组学的研究领域。但由于此技术本身存在着诸多问题,从而降低了该技术在实际应用中对微量样品进行的定性（如2D胶上的蛋白银染样品）和定量作用。 对此，安捷伦公司开发了微流芯片液质联用技术（HPLC-Chip/MS），
高效液相色谱法（HPLC）复核细则
一、对起草单位的要求：1．HPLC法用于药品的有关物质检查或含量测定时，需提供建立HPLC法的依据及参考文献。2．应对建立的方法进行论证，按照中国药典2000年版第二部凡例与附录收载的药品质量标准分析方法验证项下所列的要求进行试验。3．建立方法时，应考虑下列事项：①首选填料为十八烷基键合硅胶
HPLC－正己烷纯度值背后的秘密
正己烷试剂还有一项指标，是包含异构体的己烷含量，一般这项指标都为大于99%，由此可见，正己烷中的杂质来源可能主要为己烷异构体。 首先，通过配制己烷异构体混标并对几种己烷异构体进行分离。称取一定量的正己烷、2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、2,3-二甲基丁烷和2,2-二甲基丁烷配制异构体混标 按此色
手性HPLC峰面积怎么计算ee值
手性HPLC峰面积计算ee值：测定ee值不需要标准品的啊，只需要手性柱把两个异构体分开，然后两个峰面积之差除以两者峰面积之和即可。首先用手性柱测试外消旋标准品，测试两个对映异构体的峰面积比例（一般1：1，也有不成1：1的）。根据这个比例测定样品ee值。没有标准品，做手性柱，出现两个峰的峰面积之比就是
HPLC/ICPMS分析果汁中的砷
应用高效液相色谱分离不同价态的砷，再通过电感耦合等离子体质谱仪检测，是目前对苹果汁中的砷进行形态分析的最简单方法。本文以多种苹果汁样品为例，对HPLC/ICP-MS方法分离和测定各形态砷的能力进行了验证。 最近，媒体的报道使得公众开始关注苹果汁中砷（As）的问题。由于砷能够以多种形态存在（
黄酒中圆弧偶氮酸（Cyclopiazonic－acid）HPLC检测
一、背景介绍 黄酒是中国的民族特产，也称为米酒（ricewine），在世界三大酿造酒（黄酒、葡萄酒和啤酒）中占有重要的一席。酿酒技术独树一帜，成为东方酿造界的典型代表和楷模。近年来，有研究发现黄酒在发酵过程中不可避免会产生圆弧偶氮酸，这就要求必须对圆弧偶氮酸进行检验。 圆弧偶氮酸（Cyclopiaz
半制备HPLC是干什么的
半制备HPLC主要用于制备，即通过液相色谱柱对混合物进行分离后，收集目标馏分，再将流动相挥去后获得目标化合物。主要应用于植化、制药、化工行业。
论食品检测中HPLC技术的应用
[摘要]现如今，随着我国科学技术水平的提高，人们对食品安全性要求越来越高，要求检测方法应简便快捷、灵活性强以及特异性高等，从而促进了食品检测技术水平的提高。但是，食品安全问题却一直层出不穷，为了确保人们的身体健康，HPLC在食品检测领域中发挥着越来越重要的作用，并且满足了现代食品检测的要求。本文
HPLC的眼睛——检测器的秘密（二）
HPLC中常见检测器的基本特性如下 表2.HPLC中常见检测器的基本特性 检测器常见问题及解决方法 检测器性能的好坏直接影响仪器的正常工作，其中噪声和漂移是检测器稳定性的主要表现。 1基线噪声较大的可能原因及对策 噪声是指由检测器输出与被测样品组分无