大肠杆菌的检测方法酶底物法
酶底物法已被列为国家标准(GB/T4789.32－2002)，用酶底物法来检测大肠杆菌的主要原理是:大肠杆菌细菌能够产生 β－半乳糖苷酶(β－D－galactosidase)，它能够分解 ONPG(Ortho－nitro phenyl－β－D－galactopyr－anoside)，从而使得培养基呈现黄色，来检测水样中是否含有大肠杆菌 。利用大肠杆菌内源性 β－D－葡糖醛酸糖苷酶(β－D－glucuronidase，GUS)可以将 4－甲基伞形－β－D－葡糖醛 酸 糖 苷 ( 4 － Methylumbelliferyl － － β － D －glucuronidase，MUG)分解为葡萄糖苷、甲基伞形酮，从而形成荧光特异性的产物，在长波 UV 光为 366nm下可见，并且产物的荧光强度与大肠杆菌的数量呈现正比的关系，利用所得的线性关系可定量检测食品中的大肠杆菌，但此方法与其他快速检测方法相比较而言，耗时较长。......阅读全文
大肠杆菌的检测方法酶底物法
酶底物法已被列为国家标准(GB/T4789.32－2002)，用酶底物法来检测大肠杆菌的主要原理是:大肠杆菌细菌能够产生 β－半乳糖苷酶(β－D－galactosidase)，它能够分解 ONPG(Ortho－nitro phenyl－β－D－galactopyr－anoside)，从而使得培养
大肠杆菌的呼吸酶和底物
大肠杆菌的呼吸酶和底物呼吸酶氧化还原对中点电位（伏）甲酸脱氢酶碳酸氢盐/甲酸盐−0.43氢化酶质子/氢−0.42NADH脱氢酶NAD/NADH−0.32甘油-3-磷酸脱氢酶DHAP/Gly-3-P−0.19丙酮酸氧化酶醋酸盐+二氧化碳/丙酮酸盐?乳酸脱氢酶丙酮酸盐/乳酸盐−0.19D-氨基酸脱氢酶2
大肠杆菌的呼吸酶和底物汇总
大肠杆菌的呼吸酶和底物呼吸酶氧化还原对中点电位（伏）甲酸脱氢酶碳酸氢盐/甲酸盐−0.43氢化酶质子/氢−0.42NADH脱氢酶NAD/NADH−0.32甘油-3-磷酸脱氢酶DHAP/Gly-3-P−0.19丙酮酸氧化酶醋酸盐+二氧化碳/丙酮酸盐?乳酸脱氢酶丙酮酸盐/乳酸盐−0.19D-氨基酸脱氢酶2
大肠菌群检测新方法：酶底物法检测系统
水质大肠菌群酶底物法检测系统： 由LK-2010程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物检测试剂四部分组成。检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、医疗用水等。 该检测方法采用大肠杆菌产生β-半乳糖苷酶分解色源底物-ONPG(Ort
大肠杆菌的检测方法－滤膜法
滤膜法是目前最为流行的检测水中大肠杆菌群的方法。滤膜法的具体步骤是首先将一定量的水体样本注入 0.45μm的滤膜过滤，经过抽滤，水中的细菌则被留在滤膜上，将滤膜贴于品红亚硫酸钠培养基上培养 24h，温度为恒温 37℃，这使得菌群因发酵乳糖而使得滤膜，出现紫红色，通过计算滤膜上的菌落进而计算出单位
大肠杆菌的检测方法－－平板计数法
该方法是统计物品含菌数的有效方法，操作的顺序是首先将样本进行适当稀释，使其中的微生物充分分散成单个细胞，取定量的稀释液进行培养使其逐渐生长成肉眼可观察的菌落，然后通过稀释度和样本数量来计算菌数。但是，由于待测样品往往不宜完全分散成单个细胞，所以，长成的一个单菌落也可能来自样品中的 2～3或更多
大肠杆菌的检测方法多管发酵法简介
多管发酵法是根据大肠菌群能发酵乳糖产酸产气的特征，检测水样中大肠菌群的方法。多管发酵的大肠菌群阳性，如果在 44.5℃的培养基上进行 24h的培养，能释放出荧光产物而使培养基在紫外光源的照射下呈现荧光反应，此种方法即可检测出样本中是否含有大肠杆菌，具体步骤:取一定量水样于乳糖蛋白胨培养液中进行初
酶联免疫法的检测方法
双抗体夹心法 双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下： 一、将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。 二、加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。 三、加酶标抗
酶联免疫法的检测方法
双抗体夹心法 双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下： 一、将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。 二、加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。 三、加酶标抗
酶免疫技术酶与底物
酶结合物是酶与抗原或者抗体、半抗原在交联剂作用下联结的产物,是 ELISA 成败的关键试剂。它不仅具有抗原抗体的特异性反应,还具有酶促反应的特性,最终产生生物放大的特性。酶免疫反应中,最常用的酶是辣根过氧化物酶,HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2)。供氢体多为无色的还原型染
大肠杆菌的检测方法
随着人们生活水平的提高，食品安全问题受到越来越多的重视，在不断被报道的食品安全事故中，大肠杆菌是引起这些事件的主要的影响因素之一，是判断食品污染程度的一个重要参数，因此采用快速、可靠、简便的方法来准确检测食品中大肠杆菌数量是否超标是至关重要的。本文综述了大肠杆菌的传统检测方法以及最新的检测方法，
关于大肠杆菌的发酵法检测介绍
这种方法主要是在44.5℃下的培养基上进行大肠杆菌的培养，该培养基含有荧光底物，需要培养 24 h。然后对荧光底物进行释放，需要采用葡萄糖醛酸进行，让培养基能够在紫外光的照射下发出荧光。采用这样的方式方法，还可以进行统计学估计原来样品中的菌落。主要步骤包括发酵、分离培养、二次发酵、显微镜观察等。
关于大肠杆菌的平板计数法检测
用无菌吸管吸取稀释度样品1 mL，该样品与乳糖胆盐发酵类似，然后将其放入无菌培养皿中，再加入温度于 45℃下的 CDLJ JD 显色培养基中10 mL的量，并进行培养皿中溶液均匀混合，可以通过快速转动培养皿的方式，等溶液凝固以后，加入5 mL左右 [3] ，然后快速摇晃培养基，使其可以均匀覆盖平
酶免疫技术中酶和酶作用底物
酶和酶作用底物（一）酶的要求： 一个酶蛋白分子每分钟可催化10 3 ～10 4 个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合：1.酶的活性要强，催化反应的转化率高，纯度高。2.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量，方法简单易行、敏感和重复性好。3.作用专一性强 ，酶活性不受样品中其他成分的影响，受检
免疫酶技术中常用的酶底物系统
各种免疫酶技术,最终都是以某种显色反应而揭示待测物质来进行定性和定量分析。不同酶要选择相应的底物,见下表。免疫酶技术中常用的酶-底物系统酶底物显色反应测定波长/nm辣根过氧化物酶二氨基联苯胺深褐色沉淀5-氨基水杨酸棕色449邻苯二胺橘红色492/460邻联甲苯胺蓝色4254-硝基酚磷酸黄色400碱性
细胞生长检测方法：碱性磷酸酶检测法（AKP法）
1、按MTT法用细胞因子处理靶细胞适当时间，用PBS洗去死亡细胞，洗两次。2、向96孔细胞培养板各孔中加0.2ml新鲜配制的底物液（0.2mol/L 硼酸，1mmol/L MgCl2 ，1.2mmol/L甲伞基磷酸）。在37℃ 5％ CO2 的饱和水汽CO2 培养箱中培养3小时。3、在荧光计数仪上测
试剂盒酶的底物分类
酶的底物 1.3.3.1 HRP的底物 HRP催化过氧化物的氧化反应，最具代表性的过氧化物为H2O2，其反应式如下：DH2+ H2O2 D+ H2O上式中，DH2为供氧体，H2O2为受氢体。2.在ELISA试剂盒中，DH2一般为无色化合物，经酶作用后成为有色的产品，以便作比色测定。常用的供氢体有邻苯
酶底物复合物的概念
中文名称酶-底物复合物英文名称enzyme-substrate complex定 义在酶催化的反应中，酶首先与底物结合形成的过渡态中间物。可转化成产物和酶。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
血栓/止血成份检测方法—底物显色法简介
底物显色法通过测定产色底物的吸光度变化来推测所测物质的含量和活性的，该方法又可称为生物化学法。检测通道由一个卤素灯为检测光源，波长一般为405nm。探测器与光源呈直线，与比色计相仿。 凝血仪使用产色底物检测血栓与止血指标的原理是：通过人工合成与天然凝血因子有相似的一段氨基酸排列顺序并还有特
关于大肠杆菌的检测方法介绍
食品中的大肠杆菌进行快速准确的检测已成为了人们经常关注的问题。下面阐述食品中的大肠杆菌检测的方法及分析 [2] 。 发酵法 这种方法主要是在44.5℃下的培养基上进行大肠杆菌的培养，该培养基含有荧光底物，需要培养24h。然后对荧光底物进行释放，需要采用葡萄糖醛酸进行，让培养基能够在紫
大肠杆菌检测的新方法
1 气相色谱（GC）和高效液相色谱法（HPLC） 气相色谱法主要是将大肠杆菌经过一系列衍生化的前处理后，为接下来的分析研究提供尽可能多的化学组分。大肠杆菌的污染程度可以用顶空气相色谱法来分析，其原理是利用食品密封系统顶部的微生物代谢产物CO2对微生物进行分析。这种方法对食品质量安全检测有重
大肠杆菌检测的新方法
1 气相色谱（GC）和高效液相色谱法（HPLC）气相色谱法主要是将大肠杆菌经过一系列衍生化的前处理后，为接下来的分析研究提供尽可能多的化学组分。大肠杆菌的污染程度可以用顶空气相色谱法来分析，其原理是利用食品密封系统顶部的微生物代谢产物CO2对微生物进行分析。这种方法对食品质量安全检测有重大意义。与上
ELISA中的试剂（3）－酶的底物
3.3 酶的底物 3.3.1 HRP的底物 HRP催化过氧化物的氧化反应，最具代表性的过氧化物为H2O2，其反应式如下：DH2+ H2O2 D+ H2O上式中，DH2为供氧体，H2O2为受氢体。在ELISA中，DH2一般为无色化合物，经酶作用后成为有色的产物，以便作比色测定。常用的供氢体有邻苯二
精准检测去泛素化酶活性新型双泛素底物的使用
泛素-蛋白酶体（ubiquitin-proteasome system，UPS）途径介导的蛋白降解是机体调节细胞内蛋白水平与功能的一个重要机制。负责执行这个调控过程的组成成分包括泛素及其启动酶系统和蛋白酶体系统。泛素启动酶系统负责活化泛素，并将其结合到待降解的蛋白上，形成靶蛋白多聚泛
底物因素对化学发光法检测促甲状腺激素的影响
在临床实验中，要求所有项目均应该严格按照标准化操作程序（SOP）进行操作，但实际工作中由于人为或外界因素，实验进程往往会受到干扰，对结果造成一定影响。促甲状腺激素（thyroid stimulating hormone，TSH）是判断甲状腺功能是否正常的首选指标，化学发光法因具有快速、准确、灵敏
底物种类对酶活的影响
实验结果表明，用Sigma植酸钠做底物，其酶活检测值相当于国产植酸钠的82.49%左右，经过反复多次的对比，两种底物的检测值都有相似的对应关系。国产植酸钠完全可以替代Sigma植酸钠用于中性植酸酶酶活的检测,同时，其价格只有Sigma植酸钠的0.5%，用国产植酸钠可以大大降低检测成本。
底物存放时间对酶活的影响
大量实验表明,长时间存放的底物,会造成较高的本底值,影响测定精度。我们分析了植酸钠溶液存放在4 ℃条件下,底物存放时间对酶活的影响,结果见表3。
酶催化的特点和底物类型
特点一、酶促反应具有极高的效率二、酶促反应具有高度的特异性酶的特异性是指酶对底物的选择性，有以下三种类型：1.绝对特异性 酶只作用于特定结构的底物，生成一种特定结构的产物。如淀粉酶只作用淀粉。2.相对特异性 酶可作用于一类化合物或一种化学键。例如磷酸酶可作用于所有含磷酸酯键的化合物。3.立体异构特异
自动酶联荧光免疫检测系统筛选法检测大肠杆菌O157:H7
此E.coliO157:H7的抗原鉴别是基于在VIDAS仪器内进行的酶联荧光免疫分析。像吸液管的装置是固相容器（SPR），在分析中既作为固相也作为吸液器。SPR包被有高特异的单克隆抗体混合物。将一定量的增菌肉汤加入试剂条，肉汤中的混合物在特定时间内循环于SPR内外。如果有E.coliO157:H
关于大肠杆菌的免疫磁珠法检测介绍
该分离技术的主要原理是以磁珠为载体和抗体，进行抗体和磁珠的结合，然后通过磁力技术完成力学的移动，进而分离大肠杆菌。与其他分离细菌的方式相比，这样的方式方法具有一定的优点，该技术可以提升样本中病原性弧菌的检测成功率，并且免疫磁珠技术可以于不同菌种中对不同的微生物进行处理，进而在很大程度上提高检测效