细菌内毒素检验实验的操作步骤
1、实验前准备 试验所用的器皿须经处理,去除可能存在的外源性内毒素。耐热器皿用干热灭菌法(250℃、30min)去除;塑料器具置30%双氧水中浸泡4h,再用无热原水冲洗后于60℃烘干。 2、鲎试剂灵敏度复核 当使用新批号的鲎试剂或实验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时,应进行鲎试剂灵敏度复核试验。 (1)取内毒素工作标准品一支,用75%酒精棉擦拭安瓿颈,开启,开启过程应防止玻璃屑落入瓶内。 (2)向内毒素工作标准品安瓿内加入1ml内毒素检查用水,在漩涡混合器上混匀15min,制成10EU/ml的内毒素标准溶液。 (3)根据鲎试剂灵敏度标识值λ=0.015EU/ml,用内毒素检查用水将10EU/ml内毒素标准溶液稀释成2λ、λ、0.5λ、0.25λ四种浓度的内毒素标准溶液。 (4)取0.1ml/支的鲎试剂原安瓿18支,其中16支分别加入0.1ml不同浓度的内毒素标准溶液,每个内毒素浓度平行做4支;另外两只各加......阅读全文
噬菌体侵染细菌实验步骤
大致分为四步。1、培养用p32和s35 标记的大肠杆菌,再用此大肠杆菌培养噬菌体。p32用于标记噬菌体蛋白质,s35 用于标记噬菌体DNA。2、用培养后的p32和s35噬菌体侵染未被标记的的大肠杆菌。3、培养物离心,分离。4 、分别对上清液和沉淀物的放射性进行检测。上清液中有S35,而沉淀中几乎没有
噬菌体侵染细菌实验步骤
有四个步骤,分别是:1、培养用p32和s35 标记的大肠杆菌,再用此大肠杆菌培养噬菌体。p32用于标记噬菌体蛋白质,s35 用于标记噬菌体DNA。2、用培养后的p32和s35噬菌体侵染未被标记的的大肠杆菌。3、培养物离心,分离。4 、分别对上清液和沉淀物的放射性进行检测。上清液中有S35,而沉淀中几
噬菌体侵染细菌实验步骤
有四个步骤,分别是:1、培养用p32和s35 标记的大肠杆菌,再用此大肠杆菌培养噬菌体。p32用于标记噬菌体蛋白质,s35 用于标记噬菌体DNA。2、用培养后的p32和s35噬菌体侵染未被标记的的大肠杆菌。3、培养物离心,分离。4 、分别对上清液和沉淀物的放射性进行检测。上清液中有S35,而沉淀中几
细菌内毒素(定性)的注意事项
凝胶法试验前工作人员手要清洁消毒,试验操作应在洁净工作台进行。在使用洗耳球、移液管取样时,要注意不要将空气吸人溶液中,防止气体中的内毒素进入供试品。由于凝胶反应是不可逆的,所以在反应过程中及观察结果时注意不要使试管受到振荡,以免使凝胶破碎产生假阴性。
关于细菌内毒素的检测相关介绍
细菌内毒素是 革兰氏阴性菌的细胞壁成分,当细菌死亡或自溶后便会释放出内毒素。因此,细菌内毒素广泛存在于 自然界中。如自来水中含内毒素的量为1至100EU/ml。当内毒素通过消化道进入人体时并不产生危害,但内毒素通过注射等方式进入血液时则会引起不同的疾病。内毒素小量入血后被肝脏枯否细胞灭活,不造成
细菌内毒素的结构构造相关介绍
细胞壁较薄,厚约10-15nm,结构也较复杂。肽聚糖含量低,仅占细胞干生10%左右,层薄又较疏松,因肽聚糖之间仅四肽侧链直接联结,缺乏五肽桥;肽聚糖居于细胞最内层,外面由内向外还有脂蛋白, 外膜和 脂多糖的三层聚合物。 蛋白质 脂蛋白(lipoprotein) 由 类脂和蛋白质构成,联结在
细菌内毒素检查法简介
细菌内毒素检查法是判断供试品中细菌内毒素是否符合规定。 内毒素(Endotoxin)即革兰氏阴性菌细胞壁的脂多糖,其毒性成分为类脂A。菌体死亡崩解后释放出来。细菌内毒素检查包括两种方法,即凝胶法和光度测定法,后者包括浊度法和显色基质法。供试品检测时,可使用其中任何一种方法进行试验。当测定结果有争
细菌内毒素检测及临床应用
一 细菌内毒素定量检测法应用与发展近10年,人们对疾病病因、病理的认识不断深化,发现了许多疾病与内毒素的关系。由于很小剂量的内毒素即能引起极广泛的生物作用及病理作用,因而加强内毒素的检测研究便成为临床、公卫及药检等领域的重要课题。 细菌内毒素检查法又称鲎试验法,它是1964年由美国学者Levih和
详述蒸馏实验的操作步骤
加料:把待蒸馏液通过玻璃漏斗小心倒入蒸馏瓶中,要注意不使液体从支管流出。加入几粒助沸物,安好温度计,温度计应安装在通向冷凝管的侧口部位。再一次检查仪器的各部分连接是否紧密和妥善。 加热:用水冷凝管时,先由冷凝管下口缓缓通入冷水,自上口流出引至水槽中,然后开始加热。加热时可以看见蒸馏瓶中的液体逐
布鲁菌病的实验室检验方法及操作步骤
1.布氏杆菌病的平板凝集试验 试验目的:利用本试验对大量样本进行初步筛选。筛选出的阳性反应血清,再做试管凝集试验,以试管凝集的结果为被检血清的最终结果。 方法步骤: (1)取一长方形洁净玻璃板,用玻璃铅笔划成若干方格,每格约4cm2,编号。
布鲁菌病的实验室检验方法及操作步骤
1.布氏杆菌病的平板凝集试验 试验目的:利用本试验对大量样本进行初步筛选。筛选出的阳性反应血清,再做试管凝集试验,以试管凝集的结果为被检血清的最终结果。 方法步骤: (1)取一长方形洁净玻璃板,用玻璃铅笔划成若干方格,每格约4cm2,编号。 (2)分别吸取25μL被检血清
内毒素测定实验
实验方法原理 鲎是一种海洋节肢动物,其血液中的有核变形细胞含有凝固酶原和可凝固蛋白。将这些变形细胞冻融裂解后制成鲎变形细胞溶解物(limulus amebocyte lysate,LAL),此溶解物若与待检标本中的内毒素相遇,内毒素激活 LAL 的凝固酶原成为凝固酶,作用于可凝固蛋白,使其凝
大肠杆菌内毒素(endotoxin)酶联免疫试剂盒操作步骤
检测范围: 96T0.03Eu/L – 0.8Eu/L试剂盒组成 130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(1.6Eu/L)0.5ml×1瓶3酶
微生物限度检验仪的操作步骤
1.泵头灭菌 2.放置滤膜 3.安装过滤杯 4.过滤供试品 5.取下过滤杯 6.转移滤膜
牛酮病的检验原理及操作步骤
1.尿的物理性质检查盛被检尿于容器中,用手扇气嗅闻。牛患酮血病时,尿呈丙酸酮的臭味。2.尿的酸碱度(pH)检查(1) pH试纸法取pH试纸一小片,将一端浸入被检尿中,浸湿后取出,与标准色板进行比色,与此相同的颜色,就是该尿的pH。(2)石蕊试纸法 用清洁的镊子夹一小片红或蓝色石蕊试纸,浸入被检尿中,
简介铜绿假单胞菌检验的操作步骤
铜绿假单胞菌群属单胞菌属,为革兰氏阴性杆菌,氧化酶阳性,能产生绿脓菌素。此外还能液化明胶,还原硝酸盐为亚硝酸盐,在 42℃±1℃条件下能生长。 操作步骤如下: 1.增菌培养:取 1:10 样品稀释液 10mL 加到 90mL SCDLP 液体培养基中,置 36℃±1℃培养 18h—24h。如
耐热大肠菌群检验的操作步骤
耐热大肠杆菌群系需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌,在 44.5℃培养 24h—48h 能发酵乳糖产酸并产气。 该菌主要来自人和温血动物粪便,可作为粪便污染指标来评价化妆品的卫生质量, 推断化妆品中有否污染肠道致病菌的可能。 操作步骤如下: 1. 取 10mL 1:10 稀释的检液,加到 1
细菌内毒素测定仪的使用科室
1、医院:ICU、血液科、肾内科、检验科、烧伤科、感染科(肝病科等)、口腔科、消化科、呼吸科。 2、血站、血液中心、质量管理科。 3、药厂、医疗器械厂家、质量部QC、化验室。 4、医学院、药学院等教研室、研究所。
细菌内毒素测定仪的性能特点
●直接检测鲎试剂安瓿ZL技术。 ●真正一次实验同时获得的凝胶法、定量法检测数据。 ●8mm试管适配器技术,可以使用8mm试管检测,仅使用0.05ml鲎试剂,节约一半鲎试剂。 ●凝胶法、动态浊度法、动态显色法。 ●有两种检测波长可供选择(405nm和660nm)。采用660nm检测波长黄色
细菌内毒素测定仪的性能特点
●直接检测鲎试剂安瓿ZL技术。 ●真正一次实验同时获得的凝胶法、定量法检测数据。 ●8mm试管适配器技术,可以使用8mm试管检测,仅使用0.05ml鲎试剂,节约一半鲎试剂。 ●凝胶法、动态浊度法、动态显色法。 ●有两种检测波长可供选择(405nm和660nm)。采用660nm检测波长黄色
细菌内毒素测定仪的特点简介
●直接检测鲎试剂安瓿ZL技术。 ●真正一次实验同时获得的凝胶法、定量法检测数据。 ●8mm试管适配器技术,可以使用8mm试管检测,仅使用0.05ml鲎试剂,节约一半鲎试剂。 ●凝胶法、动态浊度法、动态显色法。 ●有两种检测波长可供选择(405nm和660nm)。采用660nm检测波长黄色
细菌内毒素的鲎试剂检查法
细菌内毒素检查法又称鲎试剂法,是利用鲎试剂与细菌内毒素发生凝集反应,以检测或量化药品中因革兰阴性菌产生的细菌内毒素含量是否符合规定的一种方法。此法以其快速、灵敏、经济、重现性好等特点得到了日益广泛的应用,并有取代传统的热原检查法的发展趋势。1956年,美国动物学家Bang首先发现,给美洲鲎注入革兰阴
细菌内毒素中什么是定量法
目前,国内外广泛应用且检测技术比较成熟的细菌内毒素定量检查法主要有以下四种。1. 1 凝胶法 是目前最常用的细菌内毒素检查法。即在10mm×75mm的小试管内,加入待检样品和鲎试剂各0. 1ml混合, 37℃、60 min保温反应后, 180°倒转,根据凝胶形成的情况(凝胶是否坚实)作为判定指标的一
氯米酚实验的操作步骤
月经来潮或黄体酮撤药性出血蒂5日开始,每日口服氯米酚50-100mg,连服5日,子啊服药第1,3,5日清晨空腹时测FSH、LH,第3周或经前抽血孕酮。
细胞有丝分裂的实验操作步骤
细胞有丝割裂指数(mitotic index,MI)是指归于割裂期的细胞占总细胞数的百分率.用于表明细胞增殖旺盛的程度,也可用于检查药物对细胞增殖能力的影响。用盖玻片培育法培育细胞,做固定和染色后,镜下调查和计数1000个细胞中处于割裂期的细胞数并核算MI。(一)材料1.待检资料(药物)。2.细
化学发光实验的操作步骤
1、将A和B两种试剂在保鲜膜上等体积混合;1min后,将膜蛋白面朝下与此混合液充分接触;1min后,将膜移至另一保鲜膜上,去尽残液,包好,放入X-光片夹中。2、在暗室中,将1×显影液和定影液分别倒入塑料盘中;在红灯下取出X-光片,用切纸刀剪裁适当大小(比膜的长和宽均需大1cm);打开X-光片夹,把X
化学发光实验的操作步骤
1、将A和B两种试剂在保鲜膜上等体积混合;1min后,将膜蛋白面朝下与此混合液充分接触;1min后,将膜移至另一保鲜膜上,去尽残液,包好,放入X-光片夹中。2、在暗室中,将1×显影液和定影液分别倒入塑料盘中;在红灯下取出X-光片,用切纸刀剪裁适当大小(比膜的长和宽均需大1cm);打开X-光片夹,把X
蒸馏法的实验操作步骤介绍
加料 将待蒸馏液通过玻璃漏斗小心倒入蒸馏瓶中,要注意不使液体从支管流出。加入几粒助沸物,安好温度计。再一次检查仪器的各部分连接是否紧密和妥善。 加热 用水冷凝管时,先由冷凝管下口缓缓通入冷水,自上口流出引至水槽中,然后开始加热。加热时可以看见蒸馏瓶中的液体逐渐沸腾,蒸气逐渐上升。温度计的读
小量细菌克隆的杂交法筛选实验步骤
小量细菌克隆的杂交法筛选实验步骤,一、材料1. 培养基含有适当抗菌素的 LB 或 SOB 琼脂板。含有氯霉素的 LB 或 SOB 琼脂板。2. 专用设备(1) 硝酸纤维素膜(Millipore HAWP,或类似产品)或尼龙膜。滤膜不必是无去污剂污染或无菌。(2) 注射器(3cc ),针头(18 号)
视频:ELISA实验操作步骤演示
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。ELISA 的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式ELISA。以下是一份操作视频演示。ELISA实验操作步骤演示