免疫组化的操作步骤
1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复，可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色，将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ， 在室温下孵育 5 分钟以封闭非特异性的背景染色。(注:孵育不要超过 10 分钟，否则会导致特异性染色降低。如果一抗的稀释液中含有 5 - 10% 正常羊血清，这一步可以省略。)6. 缓冲液洗 5min/2 次。7. 滴加一抗工作液 37 ℃孵育 1 - 2 小时。(具体孵育时间和温度由试验者最终决定)8. 缓冲液洗 5min/2 次。9 . 滴加 Primary Antibody Enhancer(增强子)，在室温下孵育 20 分钟。10 .缓冲液洗 5min/2 次。11 .滴加 HRP Polymer(酶标二抗) ，在......阅读全文
免疫组化实验和elisa实验有什么区别
两者都是基于抗原与抗体之间能发生特异性结合这一基本原理。 免疫组化是对组织标本或细胞标本中的抗原类物质如细胞中的病原体、蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、酶、激素、核酸等进行定位或定量检测，检测材料是石蜡切片或细胞涂片，检测时用到的抗体可以用酶标记，也可以用荧光素标记。酶联免疫吸附试验既可以检测抗原
教你看懂乳腺癌免疫组化报告单
从乳腺癌术后病理中可以看出肿瘤具体分类名称、肿瘤大小、各切缘是否切除干净、淋巴结转移部位和数目以及血管淋巴管内和其他组织中有无侵润等。 此外，病理中尚包括免疫组织化学内容，与患者预后息息相关，具体分述如下： ER 雌激素受体，阳性提示预后比阴性患者要好，加号越多越好。
Western－Blot、ELISA、免疫荧光与免疫组化技术
1 原理： 将通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质转移到硝酸纤维素或PVDF膜上，然后与能特异性识别待检蛋白的抗体进行反应，洗涤去除没有结合的特异性抗体后，加入标记的、能识别特异性抗体的种属特异性抗体，反应一段时间后再次洗涤去除非特异性结合的标记抗体，加入适合标记物的检测试剂进行显色或发光
免疫组化非特异性染色消除方法
一、非特异性染色的主要因素 组织的非特异性染色的机理很复杂，其产生的原因主要可分为以下几点： （1）一部分荧光素未与蛋白质结合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去。 （2）抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白，可与组织成分结合。 （3）除去检查的抗原以外，组织中还可能存在类属抗原（如F
DAKO－EPOS免疫组化一步染色法
自Nakane（1966）建立了免疫酶标记技术以来，这门技术得到了迅速的发展。DAKO EPOS先进的多聚螯合物免疫组化一步染色法，是一种即用型快速而有效的方法，具有更为简便、更为敏感和高特异性的特点。1.、材料和方法（1）材料均为本院日常活检组织共32例，其中肉瘤5例，淋巴瘤7例，上皮癌12例，胶
免疫组化二抗和显色时间过长会怎样
血清封闭时间过长会降低阳性率，过短非特异性染色易于出现。增强阳性率的表达，最主要的是抗原修复方法、一抗二抗浓度的恰当选择而不是楼主所说的盲目增加一抗浓度。DAB的浓度与阳性率没有明确的关系，但是低浓度的DAB有助于确定恰当的终止时间。当然，对于组织抗原降低或者一抗敏感性太差，可考虑选择增强型DAB显
关于免疫组化的基本原理的介绍
免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学
免疫组化染色结果容易受哪些因素影响
众所周知免疫组化技术对于研究肿瘤的发展规律，进行良恶性分类及鉴别诊断具有重要的作用，因此在做此类实验过程中一定要加倍谨慎起来，尤其是免疫组化染色实验，其结果很容易受某些因素影响。那么，免疫组化染色结果容易受哪些因素影响？ 专家指出：免疫组化染色的结果，与组织的固定、抗原的修复、抗体的保存
免疫组化染色机需要进水口吗
显然，免疫组化（IHC）结果获取过程中最关键的步骤是使用正确的抗体和抗原特异结合并对信号进行放大，但其实免疫组化（IHC）过程中所有的步骤对于生成出色的图像结果都十分重要。免疫组化（IHC）染色经常很难获得最优的结果，但通常可以通过对一些实验流程的变量（例如样品制备、抗原修复以及孵育时间等）进行调整
做免疫组化需要哪些实验仪器和设备
免疫组化要求的设备不多，而且都很常用。首先要一个透明门的4度冰箱来存放稀释后的抗体，最好带-20度的可以用来保存暂时不用抗体。湿盒若干个，微波炉（用于修复）一台，37度温箱一台，高压锅一只（用于修复），用于加热的电炉或电磁炉一只，再加上一些常用的瓶瓶罐罐就可以了。
免疫组化染色结果容易受哪些因素影响
众所周知免疫组化技术对于研究肿瘤的发展规律，进行良恶性分类及鉴别诊断具有重要的作用，因此在做此类实验过程中一定要加倍谨慎起来，尤其是免疫组化染色实验，其结果很容易受某些因素影响。那么，免疫组化染色结果容易受哪些因素影响？ 专家指出：免疫组化染色的结果，与组织的固定、抗原的修复、抗体的保
免疫组化方法中关键环节及其原理（一）
一、酶免疫组化的关键环节 1、标本固定：固定的目的是①防止标本从玻片上脱落；②除去防碍抗原-抗体结合的类脂，使抗原抗体结合物易于获得良好的染色结果；③固定的标本易于保存。 2、脱水、石蜡包埋和制片：脱水用梯度乙醇（由低到高）充分脱水、对组织要完全浸蜡、切片时刀片要干净和锋利。否则，容
免疫组化实验所用的组织和细胞标本
实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切片（病理大片和组织芯片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法，对于组织形态保存好，且能作连续切片，有利于各种染色对照观察；还能长期存档，供回顾性研究；石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露
免疫组化的经验总结（2）－操作规程
（一）、仪器设备 1）450px不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉； 2）水浴锅（二）、试剂 1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。 2）0.0
HE－染色和免疫组化染色可以同时做吗
免疫组化是利用抗原与抗体间的特异结合原理和特殊的标记技术，对组织和细胞内的特定抗原、抗体进行定位、定性、定量的一们技术。我们都是先进行免疫组化，在DAB染色后进行HE染色。既能看到免疫组化的结果，又能看到细胞的形态，CD34+免疫组化染色后是棕色的颗粒，效果很好。 1）做免疫组化的片子最好不要同时做
免疫组化氨水反蓝以后要水冲吗
要。氨水是免疫组化中常用的蓝色染色剂，用于染色后需要进行水冲洗，水冲洗可以去除过量的染料和表面吸附的氨水，避免对结果产生干扰，并保证染色结果的准确性和清晰度。
免疫组化疑难病例读片会诊什么意思
病理诊断拿不准，需要再次开会讨论。免疫组化疑难病例读片会诊就是指这个病例的病理诊断拿不准，需要请其他医院或者其他科室的相关工作人员，对这个病例进行多方的诊断，来进一步提高诊断的准确性。会诊是指医师在诊治患者的过程中出现需要本院其他科室医师或外院医师协助诊治或抢救，会诊又包括院内会诊和院际会诊。
免疫组化方法中关键环节及其原理（二）
二、免疫荧光方法中的重要环节 1、冰冻切片制备：建议用新鲜组织，否则组织细胞内部结构破坏，易使抗原弥散。选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等，防止裂片和脱片严重。 2、组织切片固定：切好片风干后立即用冰丙酮等固定液进行固定5-10min,尤其要较长时间保存的白片，一定要及时固定和
Vector免疫组化笔（H4000）使用方法
Vector免疫组化笔，即ImmEdge Hydrophobic Barrier Pen，又称ImmEdge Pen，超级免疫组化笔，适用于玻璃切片的各种免疫组织化学染色实验，如PAP法，ABC法，免疫荧光法，冰冻切片及原位杂交技术，可减少抗体和试剂用量，避免染色时液体流淌和扩散，提高操作速
免疫组化疑难病例读片会诊什么意思
病理诊断拿不准，需要再次开会讨论。免疫组化疑难病例读片会诊就是指这个病例的病理诊断拿不准，需要请其他医院或者其他科室的相关工作人员，对这个病例进行多方的诊断，来进一步提高诊断的准确性。会诊是指医师在诊治患者的过程中出现需要本院其他科室医师或外院医师协助诊治或抢救，会诊又包括院内会诊和院际会诊。
做免疫组化需要哪些实验仪器和设备
免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究，称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。
免疫组化实验过程中的注意事项
如何随心所欲的做好免疫组化？免疫组化（Immunohistochemistry) 至今也有八十余年的历史了，从 1930 年免疫组化的理论被提出讨论，一直到 1941 年以带有荧光色素的抗体，成功地观察到组织中肺炎双球菌抗原的存在，至此之后不断对于方法改良创新，也就形成了我们实验中才使用的免
骨组织的免疫组化染色应采用什么方法？
在对骨骼生理和病理的研究过程中，经常需要制备脱钙的骨免疫组化标本，然而由于骨骼组织的特殊性，制备好的骨组化标本也并不是一件容易的事。由于骨组织中60%以上为钙盐组成的羟基磷灰石结晶，脱钙是标本制备中至关重要的过程。一些强酸如盐酸，硝酸等虽能快速有效除去骨组织中钙盐，但对其中的抗原蛋白也产生了致命
免疫组化实验过程中的要点和技巧
1．固定：最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液，请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液：饱和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其对组织的穿透力较强，固定较好
免疫组化的经验总结（1）－常见问题
免疫组织化学的概念： 免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。免疫组化实验所用的组织和细胞
免疫组化买回来的抗体原液如何稀释
IHC 一抗稀释比例可以参考说明书，抗体稀释液的成分都大同小异，主要就是BSA+PBS/TBS，所以一般的抗体稀释液就能用了。
免疫组化中，一抗、二抗的制备方法
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 (一) 原理 ELISA是以
如何用imagej分析免疫组化平均光密度值
1、打开Image-Pro Plus 6.0软件，点击右下方的Done。点击file，点击open，打开你要选择组化图片，点击打开，得到如图所示。2、点击file那一排的measure，选择calibration右侧下方的intensity。点击OD旁边的new，点击std. optical den
免疫组化非特异性染色的消除方法
一、非特异性染色的主要因素 组织的非特异性染色的机理很复杂，其产生的原因主要可分为以下几点： （1）一部分荧光素未与蛋白质结合，形成了聚合物和衍化物，而不能被透析除去 。 （2）抗体以外的血清蛋白与荧光素结合形成荧光素脲蛋白，可与组织成分结合。 （3）除去检查的抗原以外，组织中还可能存在类属抗原（如
免疫组化实验中固定液的选择遵循哪些原则
免疫组化实验中固定液的选择是免疫组化成功与否的基础。用于免疫组化实验的固定液种类较多，性能各不一样。不同抗原，其稳定性各不相同，对固定液的耐受性 差异较大。所以，除要了解不同固定剂的特性外，不同的抗原和标本需经过反复试验，必要时可作多种固定液对比，从而选出理想的固定液。选择最佳固定液的标准 是：①最