密度梯度离心法概述
〔1〕亦称平衡密度梯度离心法。用超离心机对小分子物质溶液，长时间加一个离心力场达到沉降平衡，在沉降池内从液面到底部出现一定的密度梯度。若在该溶液里加入少量大分子溶液，则溶液内比溶剂密度大的部分就产生大分子沉降，比溶剂密度小的部分就会上浮，最后在离心力和浮力平衡的位置，集聚形成大分子带状物。利用这种现象，测定核酸或蛋白质等的浮游密度，或根据其差别进行分析的一种沉降平衡法。自1958年米西尔逊（M．Meselson），斯塔尔（F．W．Stahl），维诺格拉德（J．Vinograd）成功地分离了〔15N〕DNA和〔14N〕DNA以来，该法取得许多成果。为得到必要的浓度梯度，多采用浓氯化铯溶液，所以有时也使用氯化铯浓度梯度离心法这个名称，还可采用氯化铷、溴化铯等溶液。通常利用分析超离心机，但在将细胞颗粒成分进行分离等以纯化为目的的情况，利用密度差，使用分离超离心机，采用预先制备好的蔗糖等的密度梯度。 〔2〕采用蔗糖等一些小分子溶液......阅读全文
密度梯度离心法概述
〔1〕亦称平衡密度梯度离心法。用超离心机对小分子物质溶液，长时间加一个离心力场达到沉降平衡，在沉降池内从液面到底部出现一定的密度梯度。若在该溶液里加入少量大分子溶液，则溶液内比溶剂密度大的部分就产生大分子沉降，比溶剂密度小的部分就会上浮，最后在离心力和浮力平衡的位置，集聚形成大分子带状物。利用这
什么是密度梯度离心？
用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种。密度梯度离心常用的介质为氯化铯，蔗糖和多聚蔗糖。分离活细胞的介质要求：1）能产生密度梯度，且密度高时，粘度不高；2）PH中性或
色谱法概述
色谱法是一种重要的分离分析方法，它是利用不同物质在两相中具有不同的分配系数(或吸附系数、渗透性)，当两相作相对运动时，这些物质在两相中进行多次反复分配而实现分离。在色谱技术中，流动相为气体的叫气相色谱，流动相为液体的叫液相色谱。固定相可以装在柱内，也可以做成薄层。前者叫柱色谱，后者叫薄层色谱。根据色
法夏的概述
法夏（拉丁学名：Rhizoma Pinelliae），又名“半夏”“三叶半夏”“三步跳”等，天南星科半夏属植物。[1] 法夏块茎圆球形，直径1-2厘米，具须根。叶2-5枚，有时1枚，叶柄长15-20厘米。浆果卵圆形，黄绿色。花期5-7月，果8月成熟。除内蒙古、新疆、青海、西藏尚未发现野生的外，
Sanger测序法概述
Sanger测序法就是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成，每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)，并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。 [1] 由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-
凝胶层析法概述
凝胶层析法(gel chromatography)也称分子筛层析法，是指混合物随流动相经过凝胶层析柱时，其中各组分按其分子大小不同而被分离的技术。该法设备简单、操作方便、重复性好、样品回收率高，除常用于分离纯化蛋白质、核酸、多糖、激素等物质外，还可用于测定蛋白质的相对分子质量，以及样品的脱盐和浓
密度梯度离心的离心原理
不同颗粒之间存在沉降系数差时，在一定离心力作用下，颗粒各自以一定速度沉降，在密度梯度不同区域上形成区带的方法。
等密度梯度离心的特点
有些密度相差不大的物质，用一般沉降的离心机是不能分离的，这时候就需要用到等密度梯度离心机进行分离，下面就分离特点分析如下：1.分辨率高，可分离密度差小到0.01－0.02毫克每立方厘米的两个组分。2.抗对流性、抗扰动性能好，能较好地抗温度变化及加减速引起的扰动。3.样品悬浮于梯度介质中不形
密度梯度离心的离心原理
不同颗粒之间存在沉降系数差时，在一定离心力作用下，颗粒各自以一定速度沉降，在密度梯度不同区域上形成区带的方法。
密度梯度离心的离心原理
不同颗粒之间存在沉降系数差时，在一定离心力作用下，颗粒各自以一定速度沉降，在密度梯度不同区域上形成区带的方法。
等密度梯度离心的特点
有些密度相差不大的物质，用一般沉降的离心机是不能分离的，这时候就需要用到等密度梯度离心机进行分离，下面就分离特点分析如下：1.分辨率高，可分离密度差小到0.01－0.02毫克每立方厘米的两个组分。2.抗对流性、抗扰动性能好，能较好地抗温度变化及加减速引起的扰动。3.样品悬浮于梯度介质中不
内标法与外标法概述（二）
三、定量分析中怎样选择内标法或外标法选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物（当然是样品中没有的组分），然后配制欲测组分和内标物的混合标准溶液，进样得相对校正因子。再将内标物加入欲测组分的样品中，进样后测得欲测组分和内标物的定量参数。用内标法公式计算即可。 内标法是将一定量的纯物质作内标物，加入
内标法与外标法概述（一）
一、内标法什么叫内标法?怎样选择内标物?内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质，它可被色谱拄所
色谱法概述（一）
第一课 色谱法概述 色谱法是一种重要的分离分析方法，它是利用不同物质在两相中具有不同的分配系数(或吸附系数、渗透性)，当两相作相对运动时，这些物质在两相中进行多次反复分配而实现分离。在色谱技术中，流动相为气体的叫气相色谱，流动相为液体的叫液相色谱。固定相可以装在柱内，也可以做成薄层。前者叫柱色谱，后
色谱法概述（三）
第十一课 离子色谱法 离子色谱法 离子色谱法是利用离子交换原理和液相色谱技术测定溶液中 阴离子和阳离子的一种分析方法。离子色谱是液相色谱的一种。离子色谱是利用不同离子对固定相亲合力的差别来实现 分离的。离子色谱的固定相是离子交换树脂，离子交换树脂是苯乙烯- 二乙烯基苯的共聚物。树脂核外是一层可离解的
亲和层析法概述
亲和层析法是利用生物大分子与某些对应的专一分子特异识别和可逆结合的特性而建立起来的一种分离生物大分子的色谱方法，也叫做生物亲和或生物特异性亲和色谱。这种特异可逆结合的物质很多，见表6–3。如抗原与抗体、底物与酶、激素与受体等，他们间的这种特异亲和能力又叫亲和力。亲和色谱中，一对互相识别的分子互称对方
色谱法概述（二）
第七课 液相色谱仪 气相色谱法是一种很好的分离、分析方法，它具有分析 速度快、分离效能好和灵 敏度高等优点。但是气相色 谱仅能分析在操作温度下能汽化而不分解的物质。据估 计，在已知化合物中能直接进行气相色谱分析的化合物 约占15％，加上制成衍生物的化合物，也不过20％左右。 对于高沸点化合物；难挥发
关于内标法的概述
内标法（Internal Standard Method）是将一定重量的纯物质作为内标物（参见内标物条）加到一定量的被分析样品混合物中，然后对含有内标物的样品进行色谱分析，分别测定内标物和待测组分的峰面积（或峰高）及相对校正因子，按公式即可求出被测组分在样品中的百分含量。内标法是色谱分析中一种比
免疫浊度法概述
本质上是属于液体内沉淀技术，其特点是将现代光学测量仪器、自动化检测系统和免疫沉淀反应相结合。免疫浊度法本质上是属于液体内沉淀技术，其特点是将现代光学测量仪器、自动化检测系统和免疫沉淀反应相结合，可进行液体中微量抗原、抗体和小分子半抗原定量检测。 当可溶性抗原与相应抗体在两者比例合适时，抗原抗体
彩色免疫金银法概述
彩色免疫金银法（colouredIGSS简称CIGSS）是在IGSS基础上发展起来的一种新方法。其基本原理与彩色显影相似。IGSS方法染色在抗原位点处生成银颗粒经铁氰化钾与溴化钾的作用即被氧化成溴化银，后者与彩色显影剂相接触立即被还原成金属银，而彩色显影剂本身则被氧化，其氧化产物使彩色成色剂由无色变
概述薄层色谱法
薄层色谱，或称薄层层析(thin—layer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法，从50年代发展
法罗海的概述
功能主治：理气止痛；止咳平喘。主胸胁脘腹疼痛；头痛；咳喘 用法用量：内服：煎汤，6-15g；或入丸、散。 注意：《四川中药志》1960年版：阴虚有热及胃病唾血者忌用。 附方：产云南东川府法戛地的法落海村，故名法落海，亦写作法罗海。又名法落梅，梅乃海字之讹。茎叶似川芎，故又名土川芎。 各家
农杆菌介导法概述
农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中，农杆菌的介导转化在一些单子叶植物(尤其是水稻)中也得到了广泛应用。此外，生物技术学家还可以通过发根农杆菌转化，在液体培养基中培养高密度的根，作为一种在转基因植物中获得大量蛋白质的方法。 农杆菌Ti质粒的T-DNA可高效率地整合到植物受体细胞的染色体上并得到
气相色谱法分析法概述
气相色谱仪是用于分离复杂样品中的化合物的化学分析仪器。气相色谱仪中有一根流通型的狭长管道，这就是色谱柱。在色谱柱中，不同的样品因为具有不同的物理和化学性质，与特定的柱填充物（固定相）有着不同的相互作用而被气流（载气，流动相）以不同的速率带动。当化合物从柱的末端流出时，它们被检测器检测到，产生相应
密度梯度离心法的原理简介
又称速率—区带离心,沉降系数较接近的物质分离的方法； 原理：不同颗粒之间存在沉降系数差时，在一定离心力作用下，颗粒各自以一定速度沉降，在密度梯度不同区域上形成区带的方法。 介质梯度应预先形成，介质的最大密度要小于所有样品颗粒的密度。常用的有蔗糖、甘油； 密度梯度液的制备用梯度混合器，形成由
密度梯度离心基础知识（五）
序数符号表示为： ①细胞核 ②质膜 ③细胞质 ④细胞核 ⑤线粒体 ⑥溶酶体 ⑦线粒体 ⑧溶酶体 ⑨内质纲 ⑩病毒(1)细胞核 (2)质膜 (3)细胞质 (4)细胞核 (5)线粒体 (6)溶酶体 (7)线粒体 (8)溶酶体 (9)内质网(10）病毒 (11)核蛋白体 (12)核糖体 (13)D
密度梯度离心基础知识（二）
（2）各种转头用于等密度离心的优缺点分析： A、固定角式转头：主要用于差分离心的角式转头，在超速离心机上可以很好地用于等密度离心，尤其是 DNA平衡等密度离心，自形成梯度，用快速密封管或厚壁管，常用的单管的容量为 10~40ml。常用转速 40,000~80,000rpm，离心时间较短，分离
密度梯度离心基础知识（四）
从上面公式可以看出，要使曲线变陡： a：降低β° b：提高转速 c：加大离心半径 d：增大初始密度以同等转速离心，甩平转头的 r较大，在同等初始密度条件下，甩平转头的密度梯度曲线比垂直管转头、近垂直转头或固定角式转头都要陡一些。（参见下图）CSCL初始密度为 1.72g/cm3时的自形成梯度曲线九十
密度梯度离心基础知识（三）
●等运动梯度（等速梯度）（Isokinetic）等运动梯度是指在某一恒定离心转速时，样品颗粒在梯度中以定常速度沉降。要做到等速沉降，必须使梯度液密度和粘性力的增加与沿着离心半径方向的离心力增加相平衡，在这种梯度液中，颗粒的沉降距离与离心时间，离心力，以及颗粒本身的沉降系数成正比。因此如果已知某单一组
密度梯度离心基础知识（一）
一、概论在密度梯度离心中，单一样品组份的分离是借助于混合样品穿过密度梯度层的沉降或上浮来达到的。梯度液的密度随着离心半径的增大而增加。密度梯度可以予形成，也可以在离心过程中自形成，密度梯度可以分为：速率—区带（Rate-Zonal）离心和等密度（Isopycnic）离心。在速率—区带离心中混合样品以