2013技术展望之细胞培养

原乍一看,细胞培养经过这么多年的发展,似乎不会在明年有什么大的改进。毕竟大部分培养细胞的方法都已成熟。但是,与其他领域一样,研究需求将大大推动细胞培养技术的发展。在未来的一年里,我们也许会看到干细胞、单细胞培养的方法有重大发展。 单细胞脱颖而出 许多基因组和转录组研究也指出,单个细胞之间在基因表达的频率和时机上存在差异。随着大家对单细胞分析的愿望越来越强烈,这有望成为2013年发展最快的一个领域。传统的细胞培养是在大的培养皿中进行的,但单细胞分析试图将特定的表型和基因型直接配对,因此需要更专业的分离和培养方法。 最近,几篇文章都强调了单细胞培养的可能性。10月,清华大学的研究人员发表文章,介绍了一种3D微型水凝胶的构建,它们可捕获和培养单个神经元,用于长期监控。监控单个神经元的能力让作者有机会详尽研究神经元的结构和功能。在另一篇文章中,一组研究人员介绍,单细胞可通过寡核苷酸膜附着在玻璃上。这种方法......阅读全文

Nature子刊:低价干细胞培养

  人类多能干细胞(human pluripotent stem cells,hPSCs)可无限自我更新、发育成人体所需的所有细胞类型。这种细胞的大量培育成本较高。日本京都大学与印度和伊朗的科学家同事开发出了一种更划算的干细胞培养基。  现在的培养系统包括维持hPSCs自我更新、阻止它们分化为其他细

脂肪干细胞培养和扩增实验

脂肪干细胞的原代培养脂肪干细胞的传代培养实验方法原理实验材料脂肪干细胞                                                          试剂、试剂盒ASC培养基                                            

干细胞培养传统方法受质疑

  人类干细胞通常是在一层饲养细胞上培养的,据认为,这可为细胞提供必需的营养物质,并有助于防止细胞分化。最近,一项新的研究对这种根深蒂固的做法提出了挑战。延伸阅读:更安全的干细胞培养新方法。  众所周知,干细胞是很难维持和培养。像所有的真核细胞一样,它们对养分的有效性、pH值、温度、氧气和二氧化碳的

干细胞培养基的使用

研究背景:小鼠骨髓间充质干细胞的目前干细胞培养难点。小鼠的骨髓基质细胞成分复杂,间充质干细胞比率低,分离培养有一定的难度。广东医学院的博士研究生陈博士在培养过程中就遇到该问题。他曾成功饲养成人和大鼠骨髓间充质干细胞。但新近培养的小鼠间充质干细胞状态就很差。按照自己的分析:细胞培养操作没有问题,培养条

小鼠胚胎干细胞培养实验

实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存在的情况下扩增(第4步)并最终分化在第5步。细胞全程培养在37℃,5%CO2,100%湿度条件下。一般体外诱导向神经细胞方向分化,也可以采用低浓度的RA进

干细胞培养器皿的清洗方法

干细胞离体条件下,有害物质可直接与细胞接触,细胞对任何有害甚至有益的物质十分敏感,极少量残留物就会对细胞产生毒性作用。因此,新的或重新使用的器皿都必须认真清洗,使其达到不含任何残留物的要求。因不同培养器皿的材料、结构、使用方法不同,清洗的方法也有区别.现分别介绍如下。1.玻璃器皿的清洗,玻璃器皿的清

新型分子标记物实现可预测的帕金森病细胞治疗结果

  6月15日,The Journal of Clinical Investigation在线发表了题为《人类中脑多巴胺能神经细胞分化标志物预测帕金森病细胞治疗结果》的研究论文。该研究由中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心(神经科学研究所)、灵长类神经生物学重点实验室、上海脑科学与类脑研究中心陈跃

一览细胞培养的前沿技术

  在最新一期《自然》(Nature)杂志上的一篇文章中,身为《Nature》以及《Nature Methods》的技术编辑费雯丽`马克思(Vivien Marx)想读者介绍了细胞培养的新进展,并概况了这一领域的前沿技术。以下为全文:  细胞培养基技术领域的进展,能帮助科学家们更深入的了解这些混合物

科学家们将皮肤细胞转变成神经元细胞

  应用   - 单细胞基因表达   Fluidigm技术   - Biomark系统   - 48.48动态微流体整合芯片   介绍   美国斯坦福大学医学院以转化开创性医学研究为病人提供优质护理而闻名。Dr. Zhiping(原分子和细胞生理学系博士后)和Dr. Ami Citr

胎牛血清可促进神经干细胞的分化

神经干细胞体外分化研究是神经科学研究领域的热点。有人观察了不同浓度胎牛血清对神经干细胞分化的影响。具体做法是:分离大鼠海马区组织,制成单细胞悬液后,加入适量培养基((含bFGF10 ng/mL、EGF 20 ng/mL HEPES 5 mmol/LHeparin 5mg/mL、葡萄糖23.33 mm

单细胞培养培养方法介绍细胞悬浮培养法

用液体培养基对保持良好的分散状态的单个细胞或小的细胞聚集体于摇床上进行培养的方法,称为细胞悬浮培养法(cell suspension culture)。依据培养目的不同,可分为浅层培养和深层培养。浅层培养是指使培养材料的一部分裸露于液体培养基表面,采用静止培养的方式,适用于各种器官和组织的培养。深层

单细胞培养培养方法介绍微室培养法

人工制造一个小室,将单细胞培养在小室中的少量培养基上,使其分裂、增殖形成细胞团的方法,称为微室培养法,亦称为双层盖玻片法。其操作是将携带1个细胞的1滴培养基置于无菌载玻片上,并用无菌矿物油包围培养基液滴。再分别在培养基液滴的两侧滴1滴矿物油,在每一矿物油滴上放一张盖玻片。然后,把第三张盖玻片放在培养

破解家畜干细胞不能承受-长周期、多次基因编辑难题

  家畜干细胞在生命科学基础研究、细胞培养人造肉生产和优良品种培育等方面具有巨大应用前景。自1981年小鼠胚胎干细胞(mESCs)培育成功以来,国内外科学家一直试图建立稳定的、可长期传代的大型家畜胚胎多能干细胞系,但始终未获得成功。  近日,中国农业大学韩建永教授团队联合国内多家单位在该领域获得重大

Nature:单细胞分析力撑癌症干细胞理论

麻省总医院MGH、Broad研究所的研究人员在单细胞水平上对脑瘤进行基因组分析,首次在人类脑瘤样本中鉴定到了癌症干细胞及其分化后代。这项重要的研究成果十一月二日发表在Nature杂志上。少突胶质细胞瘤是一种生长缓慢但无法治愈的脑瘤。“我们提出了强有力的证据,证明癌症干细胞是少突胶质细胞瘤的主要生长源

科学家揭示灵长类动物海马成体神经发生的转录组特征

成体海马神经发生(AHN)是否在成年和老年人中持续存在,至今仍然存在广泛的争议。其中关键问题是,在啮齿类动物中发现的标记能否用于描述灵长类动物的神经发生仍存在疑问。北京师范大学研究团队利用单细胞核RNA测序,揭示了灵长类动物海马成体神经发生的转录组特征。该研究成果于近日发表在《Cell Resear

干细胞来源的神经元改善患者认知功能

  美国大约有340万癫痫症患者,占总人口的1.2%。尽管大多数患者对药物治疗有反应,但是仍有20%-40%患者在尝试多种抗癫痫药物后继续发作。还有一个问题,即使药物能起作用,也可能产生认知和记忆障碍以及抑郁。  德州A&M大学医学院分子和细胞医学系教授、再生医学研究所副所长Ashok K. She

同济大学发表单细胞转录组研究新成果

  人类大脑是极为复杂的,数十亿神经元形成的庞大网络控制着我们的行为和情感。正因如此,解析神经回路的分子基础并不是一件容易的事。过去人们大多是在一块脑组织上进行遗传学和表观遗传学图谱分析,但这样的方法往往无法提供足够的精确性。  同济大学医学院的研究团队将电生理学技术与单细胞转录组分析结合起来,揭示

Cell-Stem-Cell八大热点文章(11月)

  《Cell Stem Cell》杂志是2007年Cell出版社新增两名新成员之一(另外一个杂志是Cell Host & Microbe),这一杂志内容涵盖了从最基本的细胞和发育机制到医疗软件临床应用等整个干细胞生物学研究内容。这一杂志特别关注胚胎干细胞、组织特异性和癌症干细胞的最新成果。《Cel

单细胞研究指南:细胞分离

  多细胞生物的每个细胞都携带着相同的遗传学信息。不过,近年来蓬勃发展的单细胞研究告诉我们,每一个细胞都是独一无二的。不同类型的细胞激活特定组合的机制,即使是同类型细胞,基因表达也会出现差异。  那么,细胞之间的哪些差异有生物学意义,哪些差异来自于技术偏好呢?要获得可靠的结果又需要研究多少细胞呢?这

2017年度技术公布-看看Nature-Methods预测哪个技术会火!

  2017年生命科学领域的年度技术是什么?有人说是荣膺诺贝尔化学奖的冷冻电子显微技术,有人说是单细胞DNA测序和RNA测序,当然也有人提及红遍大江南北的CRISPR技术,但Nature Methods给出的答案是类器官(organoids)。这种能将干细胞塞入三维组织模型,构建人类生物学重要工具的

细胞培养基怎么选择

细胞培养是在已经从其宿主生物体中移除的人造环境细胞中生长的过程。无论它们的来源如何,这些细胞的成功繁殖依赖于使用专门的培养基,这些培养基经过精心设计,有利于健康的生长和维持。在研究这种多样化的细胞类型的情况下,可用的培养基配方的范围似乎是压倒性的,但是为了选择合适的培养基产品,非常值得花时间研究每种

CREST技术一种高通量谱系示踪的新方法

  7月17日,《自然-方法》在线发表了中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心、神经科学国家重点实验室陈跃军研究组撰写题为《利用CRISPR条形码技术全面绘制小鼠脑内的单细胞时空谱系》的研究论文。该研究通过建立能够应用于小鼠体内任意组织器官的谱系示踪新技术——CREST,解析了小鼠中脑在胚胎发育过程

Nature发布干细胞培养重大突破

  由于肝细胞具有众多的生物医学用途,包括用于肝炎研究,药物代谢及毒性研究,以及用于肝硬化和其他慢性肝疾病移植,数十年来全世界的科学家们一直试图再生出原代肝细胞。然而直到现在,也没有实验室能够利用任何可用的技术,在培养物中成功地鉴别和培育出肝脏干细胞。   在近期的《自然》(Nature)杂志上,

脂肪干细胞培养_吸脂术法

实验材料深层脂肪组织试剂、试剂盒PBS缓冲液蒸馏水I型胶原酶氯化铵青霉素DMEM仪器、耗材离心管针管灭菌锅离心机水浴锅培养箱培养瓶流式细胞仪脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是近年来从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞。研究发现ADSCs细胞

干细胞培养制造技术新进展

  干细胞是一种能够长期存活,且具有不断自我繁殖能力和多向化潜能,几乎存在于所有组织中的原始细胞。近年来随着科学家们研究的深入,干细胞在血液系统疾病、神经系统疾病、心血管疾病、自身免疫系统疾病以及内分泌疾病等各种疾病的治疗上让人们看到了希望。  干细胞技术是当今医学研究最前沿也是最热门的方向之一,近

人类干细胞培养又有新方法

  人类多能干细胞(hPSCs)能够自我更新并转换成为体内其他任何类型的细胞,使其成为细胞移植疗法、药物开发、细胞分化和发育研究的一种很有前途的材料来源。然而,众所周知,干细胞是很难维持和培养。像所有的真核细胞一样,它们对养分的有效性、pH值、温度、氧气和二氧化碳的含量都很敏感,而且它们也易于分化,

干细胞培养制造技术新进展!

  干细胞培养制造技术新进展!   干细胞是一种能够长期存活,且具有不断自我繁殖能力和多向化潜能,几乎存在于所有组织中的原始细胞。近年来随着科学家们研究的深入,干细胞在血液系统疾病、神经系统疾病、心血管疾病、自身免疫系统疾病以及内分泌疾病等各种疾病的治疗上让人们看到了希望。   干细胞技术是

脂肪干细胞实验细胞培养的介绍

  将吸脂来源的脂肪组织用D-Hanks 冲洗,去除残留的血细胞和组织碎片,把脂肪组织放入离心管中,记录原始体积。向组织中加入等体积的0.1%Ⅰ型胶原酶,放入37℃气浴振荡器中消化30 min。然后将消化好的组织静置5 min,待其分层后,用吸管吸取位于悬液上层的脂肪细胞,将含有脂肪细胞的悬液以10

小鼠胚胎干细胞培养实验步骤

   一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态   培养基   细胞复苏   冻存细胞   明胶包被   细胞传代    体外分化   培养基   包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片)   体外分化方法   注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎

小鼠胚胎干细胞培养实验步骤

1、一般培养——保持胚胎干细胞处于未分化状态 培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代 2 、体外分化 培养基:包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片) 体外分化方法 注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的pr