干细胞培养传统方法受质疑
人类干细胞通常是在一层饲养细胞上培养的，据认为，这可为细胞提供必需的营养物质，并有助于防止细胞分化。最近，一项新的研究对这种根深蒂固的做法提出了挑战。延伸阅读：更安全的干细胞培养新方法。 众所周知，干细胞是很难维持和培养。像所有的真核细胞一样，它们对养分的有效性、pH值、温度、氧气和二氧化碳的含量都很敏感，而且它们也易于分化，留给研究人员的细胞不同于他们打算在实验中使用的细胞。 在早期，研究人员发现，在小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）层的顶部培养干细胞，可阻碍分化并有助于维持干细胞的健康。但是MEF特别不容易维持自我。从那时起，研究人员和生物技术公司已经开发出其他有效的饲养层细胞系，可提供干细胞培养方面的优势，以及与干细胞之间更有利的相互作用，无饲养细胞的方法也已经变得可用。但是，干细胞培养通常仍然需要研究人员成功地维持两种类型的细胞，并且，无饲养层细胞的方法要求高水平的细胞接种密度、专业的媒质和生长补充剂，从而使得它们非常......阅读全文
胚胎干细胞中饲养层细胞的原代培养实验材料和步骤
实验材料12.5d孕鼠、PBS、DMEM、血清、酒精、双抗、解剖器、培养箱、超净台实验步骤1.性成熟小鼠合笼（♀∶♂=2∶1）2.每天观察小鼠，见阴道栓后确定为怀孕0.5d。3.取12.5d孕鼠，断颈处死，在酒精中泡数秒消毒。控干酒精后置于一个无菌的培养皿中。4.无菌条件下暴露子宫。每打开一层要换一
人胚胎干细胞系:衍生与培养—小鼠胚胎饲养细胞的制备
实验步骤2.3 小 鼠 胚 胎 饲 养 细 胞（MEF) 的 制 备最广泛地用于支持 h E S 的伺养层细胞来自小鼠胚胎 [丁]^〇 1113 〇 1161&1,， 1998;Reu-binoffetal. ， 2000]，如小鼠胚胎饲养细胞（MEFs) ，尽管它们可能是最原始的间叶细胞的前体细胞
牙髓干细胞的分离培养——牙髓干细胞/乳牙干细胞原代培养
实验材料牙髓组织试剂、试剂盒灭菌PBSAMSC培养基胶原酶中性蛋白酶免疫磁珠分选时所需试剂：含1%BSA的PBSA与DPSC反应的一抗用STRO-I(小鼠抗人MSC;IgM)CC9(小鼠抗人CD146 MUC-18;IgG2a)或3G5(小鼠抗人外膜细胞；IgM)仪器、耗材羊抗小鼠IgG-结合或大鼠
斑马鱼胚胎细胞的培养——成纤维细胞饲养层
实验方法原理通过用链酶蛋白酶除去绒毛膜、用添加成分的 FGF 培养液培养细胞和采用不同的胰蛋白酶消化筛选成纤维细胞，用原肠胚期斑马龟的胚胎成纤维细胞制备饲养层 [ Sun et al., 1995a ]。实验材料链酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L EDTA受精后8h的胚胎FB
饲养层细胞共培养体外扩增原代CD34+细胞
试剂和材料：1. MSCs培养基；2. 6孔培养板；3. 丝裂霉素C，100μg/ml；4. 共培养的培养基：IMDM添加10%FBS，100U/ml青霉素和100μl/ml链霉素；5. 细胞因子（干细胞因子，IL-6，Flt-3配体，促血小板生成素）；实验方法：1. 将脐带血来源的间充质干细胞（C
饲养层的准备
实验方法原理接种同源或异源细胞—比如来自小鼠胚胎的细胞。待受测细胞克隆培养之前，中等密度，用射线照射或药物作用使其失去增殖能力。实验材料第二代13天胎龄小鼠胚胎成纤维细胞
饲养层的准备
实验方法原理 接种同源或异源细胞—比如来自小鼠胚胎的细胞。待受测细胞克隆培养之前，中等密度，用射线照射或药物作用使其失去增殖能力。实验材料 第二代13天胎龄小鼠胚胎成纤维细胞丝裂霉素C仪器、耗材 克隆培养用培养基X射线或6GCo源实验步骤 1. 用胰蛋白酶消化原代培养的胚胎成纤维细胞（见方案 12.
饲养层的准备
实验方法原理接种同源或异源细胞—比如来自小鼠胚胎的细胞。待受测细胞克隆培养之前，中等密度，用射线照射或药物作用使其失去增殖能力。实验材料第二代13天胎龄小鼠胚胎成纤维细胞丝裂霉素C仪器、耗材克隆培养用培养基X射线或6GCo源实验步骤1. 用胰蛋白酶消化原代培养的胚胎成纤维细胞（见方案 12.6、方案
饲养细胞的概念
饲养细胞（Feeder cell），也叫滋养细胞，在体外的细胞培养中，单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖，必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖，加入的细胞即为饲养细胞。
饲养层的准备
实验方法原理 接种同源或异源细胞—比如来自小鼠胚胎的细胞。待受测细胞克隆培养之前，中等密度，用射线照射或药物作用使其失去增殖能力。 实验材料 第二代13天