多聚酶链式反应的原理
多聚酶 链式反应的原理类似于DNA的天然 复制过程。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡 核苷酸 引物，经 变性、退火和延伸若干个 循环后，DNA扩增2n倍。 1．变性：加热使模板DNA在 高温下（94℃）变性，双链间的氢键断裂而形成两条单链，即变性阶段。 2．退火：使溶液温度降至50－60℃，模板DNA与引物按 碱基配对原则互补结合，即退火阶段。 3．延伸：溶液反应温度升至72℃，耐热DNA 聚合酶以单链DNA为模板，在引物的引导下，利用反应混合物中的4种脱氧 核苷三磷酸（dNTP)，按5’→3’方向复制出互补DNA，即引物的延伸阶段。 上述3步为一个循环，即高温变性、低温退火、中温延伸3个阶段。从理论上讲，每经过一个循环，样本中的DNA量应该增加一倍，新形成的链又可成为新一轮循环的模板，经过25-30个循环后DNA可扩增106-109倍。典型的PCR反应体系由如下组分组成：DNA模板、反应 缓冲液、dN......阅读全文
多聚酶链式反应的原理
多聚酶 链式反应的原理类似于DNA的天然 复制过程。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡 核苷酸 引物，经 变性、退火和延伸若干个 循环后，DNA扩增2n倍。 1．变性：加热使模板DNA在 高温下（94℃）变性，双链间的氢键断裂而形成两条单链，即变性阶段。 2．退火：使溶液温度降至
多聚酶链式反应PCR
多聚酶链式反应PCR ：(1)PCR原理：在模板DNA、引物和4种脱氧单核苷酸存在的条件下依赖于耐高温的DNA聚合酶的酶促合成反应。以欲扩增的DNA做为模板，以和模板正链和负链末端互补的两种寡聚核苷酸做为引物，经过模板DNA变性、模板引物复性结合、并在DNA聚合酶作用下发生引物链延伸反应来合成新的模
多聚酶链式反应技术（PCR技术）
多聚酶链式反应即PCR（polymerase chain reaction）技术，应用这一技术可以将微量目的基因（DNA片段）扩增一百万倍以上。PCR反应理论的提出和技术的完善对于分子生物学的发展具有特殊的意义，它以敏感度高、特异性强、产率高、重复性好以及快速简便等优点迅速成为分子生物学研究中应用最
多聚酶链式反应技术（PCR技术）
多聚酶链式反应即PCR（polymerase chain reaction）技术，应用这一技术可以将微量目的基因（DNA片段）扩增一百万倍以上。PCR反应理论的提出和技术的完善对于分子生物学的发展具有特殊的意义，它以敏感度高、特异性强、产率高、重复性好以及快速简便等优点迅速成为分子生物学研究中应用最
多聚酶链式反应技术（PCR技术）
多聚酶链式反应即PCR（polymerase chain reaction）技术，应用这一技术可以将微量目的基因（DNA片段）扩增一百万倍以上。 PCR反应理论的提出和技术的完善对于分子生物学的发展具有特殊的意义，它以敏感度高、特异性强、产率高、重复性好以及快速简便等优点迅速成为分子生物学研究
多聚酶链式反应技术（PCR技术）(1)
多聚酶链式反应即PCR（polymerase chain reaction）技术，应用这一技术可以将微量目的基因（DNA片段）扩增一百万倍以上。PCR反应理论的提出和技术的完善对于分子生物学的发展具有特殊的意义，它以敏感度高、特异性强、产率高、重复性好以及快速简便等优点迅速成为分子生物学研究中应
多聚酶链式反应技术（PCR技术）(2)
（2）反应增强剂：PCR反应中加入一定浓度的增强剂如1%～10%二甲基亚砜（DMSO）、5%～20%甘油、非离子去污剂、1.25%～10%甲酰胺和10～100 μg/ml牛血清白蛋白等可提高反应特异性和产量，有些反应只能在这些辅助剂存在时才能进行。（3）热启动PCR：如果PCR反应混合物置于低于Tm
多聚酶链式反应(PCR)基因扩增及琼脂糖凝胶电泳检测
一、 实验目的通过本实验学习PCR反应的基本原理，掌握PCR的基本操作技术以及琼脂糖凝胶电泳技术。二、 实验原理PCR用于扩增位于两端已知序列之间的DNA区段，即通过引物延伸而进行的重复双向DNA合成。基本原理及过程如下：PCR循环过程中有三种不同的事件发生：（1）模板变性；（2）引物退火；（3）热
免疫多聚酶链反应
实验概要免疫多聚酶链反应(PCR)是一种抗原检测系统，将一段已知序列的DNA片段标记到抗原抗体复合物上，再用PCR方法将这段DNA扩增，然后用常规方法检测PCR产物。由于PCR具有强大的扩增能力，因而比常规的免疫学检测法，如ELISA和放射免疫测定(RIA)的敏感性提高好几个数量级。实验原理免疫PC
免疫多聚酶链反应
实验概要免疫多聚酶链反应(PCR)是一种抗原检测系统，将一段已知序列的DNA片段标记到抗原抗体复合物上，再用PCR方法将这段DNA扩增，然后用常规方法检测PCR产物。由于PCR具有强大的扩增能力，因而比常规的免疫学检测法，如ELISA和放射免疫测定(RIA)的敏感性提高好几个数量级。实验原理免疫PC
PCR－(多聚酶链反应)
【实验目的】掌握PCR技术的原理，学习PCR技术的基本方法，了解PCR技术的应用范围与意义。【实验原理】详见14章第2节。【实验对象】特定的DNA序列。【试剂与器材】引物(primer)，根据需扩增的DNA设计相应的引物；TagDNA聚合酶； 10×PCR缓冲液(随酶一起购买)；5mmol/L dN
关于多聚酶链反应的基本原理介绍
多聚酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)又称体外核酸扩增技术，即对特定DNA片段进行非细胞依赖性扩增，其基本过程是将已提取的待测DNA在一对寡核苷酸引物、三磷酸核苷及耐热DNA多聚酶存在的情况下，分别于90℃、55℃和72℃下经变性、退火和核苷酸链的延伸，如此循
聚合酶链式反应的原理
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DN
dna多聚酶的临床意义
(1) 升高：乙肝病毒持续感染者、急性乙型肝炎潜伏期、初期、繁殖期、乙型慢性肝炎、乙型慢性肝炎的e抗体阳性、DNA多聚酶高值时说明肝功能恶化。(2) 降低：乙型慢性肝炎的e抗原阳性者。
dna多聚酶的注意事项
(1) 此酶的活性可在乙肝病毒感染的早期发现，甚至于在HBsAg出现前检出。(2) 可作为乙肝病毒复制及有传染性的标志。
聚合酶链式反应（PCR）的原理
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备
聚合酶链式反应的原理简介
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，
几种多聚螯合物酶法
实验概要本文介绍了三种多聚螯合物酶法：PowerVision法，ELPS法和EPOS法。实验原理1. PowerVision系统的原理是连接抗体上紧密地连接上许许多多的酶分子，呈串珠状排列，由于利用了一种小的呈线性或很小枝状多功能试剂作为骨架分子，与酶和免疫球蛋白交联，排列紧密，形成串珠状多聚物，
生化检测项目DNA多聚酶介绍
DNA多聚酶介绍： 基因是遗传的物质基础，它决定了病原体的生物特性。除个别病毒外，现知的所有微生物均是以核酸为遗传物质。乙肝病毒的基因是脱氧核糖核酸(DNA)，与病毒复制所必需的DNA聚合酶关系密切。因此基因检测成为乙肝检测组成部分。DNA多聚酶正常值： 25cpm。DNA多
几种多聚螯合物酶法
实验概要本文介绍了三种多聚螯合物酶法：PowerVision法，ELPS法和EPOS法。实验原理1. PowerVision系统的原理是连接抗体上紧密地连接上许许多多的酶分子，呈串珠状排列，由于利用了一种小的呈线性或很小枝状多功能试剂作为骨架分子，与酶和免疫球蛋白交联，排列紧密，形成串珠状多聚物，
连接酶链式反应的基本原理
LCR ，即在D N A 连接酶的作用下，通过连接与模板D N A互补的两个相邻寡核苷酸链，快速进行D N A 片段扩增。D N A连接酶可将与模板D N A 链互补的两条毗邻寡核苷酸片段连接起来，两条寡核苷酸链接头处存在碱基错配则阻止连接反应的发生。所以通过连接酶反应，可明确区分寡聚核苷酸是否与模
聚合酶链式反应（PCR）的反应原理
PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备,能在变
PCR（聚合酶链式反应）的反应原理
【原理】 PCR（polymerase chain reaction）用于在体外将微量的目标DNA大量扩增，以便进行分析。反应体系：①样品DNA；②引物（primer），是人工合成的一对寡核苷酸链（约15-20个核苷酸），用于扩增夹在双引物与模板DNA互补区之间的区域；③4种dNTP；④Tag
PCR(多聚酶链反应)实验原理、方法步骤和注意事项
【实验对象】特定的DNA序列。【试剂与器材】 引物(primer)，根据需扩增的DNA设计相应的引物；TagDNA聚合酶； 10×PCR缓冲液(随酶一起购买)；5mmol/L dNTP贮备液(商品化产品)；DNA模板(需扩增的 DNA)；双蒸水；矿物油；PCR反应管；微量移液器；离心机及PCR仪
多聚螯合物酶组化实验
EPOS 法 EnVision 法 UIP 法 PowerVision 法 实验方法原理 采用一种具有惰性的多聚化合物（葡聚糖）
多聚螯合物酶组化实验
实验方法原理 采用一种具有惰性的多聚化合物（葡聚糖）为骨架，将特异性抗体和 HRP 结合在一起，形成 HRP-多聚化合物-特异性抗体巨大复合物，该复合物内不含第二抗体及亲和素。染色时，只需在组织切片上加入相应的酶标记特异性抗体 EPOS 试剂，孵育 30～60 min 即可完成。勿需再加
聚合酶链式反应PCR原理是什么？
PCR（聚合酶链式反应）技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性→退火→延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合
聚合酶链式反应的的基本原理
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，加入设计引物，DN
聚合酶链式反应（PCR）的原理和具体过程
原理就是DNA半保留复制吧过程只要记住1.DNA变性（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下， 氢键断裂，形成单链DNA2.退火（25℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。3.延伸（70℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物
dna多聚酶的注意事项及相关疾病
注意事项 (1) 此酶的活性可在乙肝病毒感染的早期发现，甚至于在HBsAg出现前检出。(2) 可作为乙肝病毒复制及有传染性的标志。 相关疾病 慢性迁延性肝炎