Th细胞的生物活性检测
是根据某些细胞因子特定的生物学活性,应用相应的指示系统和标准品来反映待测标本中某种细胞因子的活性水平,一般以活性单位来表示,生物学检测法一般敏感性较高,但实验周期较长,如集落形成法需10~14d;易受细胞培养中某些因素的影响,如血清、pH、药物;易受生物学活性相同或相近的其他细胞因子的影响,如检测IL-2时可受IL-4的干扰,TNF-α和TNF-β(淋巴毒素)表现出极为相似的生物学作用;易受待检样品某些细胞因子抑制物的干扰,如IL-1的活性可被IL-1受体拮抗物(IL-lra)抑制,TNF-α可被TNF-BP阻断;不能区分某些细胞因子的型和亚型,如IFN-α、β和γ,以及IFN-α中不同的亚型显示相同的生物学活性;某些指示细胞因子的敏感性不同,所获结果难于标准化,此外,某些人源的细胞因子如Hil-2对小鼠细胞起作用,但鼠源性的IL-2对人的细胞则无刺激作用,生物学检测法大致可分为增殖可增殖抑制、集落形成、直接杀伤靶细胞、保护......阅读全文
Th细胞的生物活性检测
是根据某些细胞因子特定的生物学活性,应用相应的指示系统和标准品来反映待测标本中某种细胞因子的活性水平,一般以活性单位来表示,生物学检测法一般敏感性较高,但实验周期较长,如集落形成法需10~14d;易受细胞培养中某些因素的影响,如血清、pH、药物;易受生物学活性相同或相近的其他细胞因子的影响,如检
Th1细胞和Th2细胞的检测
实验材料 细胞内因子 抗体 试剂、试剂盒 PMA 贮存液 依诺霉素贮存液 莫能星
Th1细胞和Th2细胞的检测
实验材料 细胞内因子 抗体 试剂、试剂盒 PMA 贮存液 依诺霉素贮存液 莫能星
Th1细胞和Th2细胞的检测
实验材料细胞内因子抗体试剂、试剂盒PMA 贮存液依诺霉素贮存液莫能星RPMI-1640破膜剂实验步骤一、检测试剂1. PMA 贮存液:PMA 溶于 DMSO,浓度为 0.1 mg/mI,-20℃ 保存,工作液贮存液 1:100 稀释于 RPMI-1640 或 PBS(无菌,无叠氮钠)中,此时为 1
Th细胞的细胞仪检测法
流式细胞术(flow cytometery,FCM)其基本原理是:用刺激剂PMA、ionomycin(离子霉素)体外激活淋巴细胞,用蛋白转运抑制如莫能霉素(monensin)阻止细胞因子分泌到细胞外,细胞内蛋白质转运方式被打乱,引起细胞因子向高尔基体积聚,用流式细胞仪便可测出增强细胞因子。这一技
Th细胞的核酸杂交法检测
这是一类利用细胞因子的基因探针检测特定细胞因子基因表达的技术,绝大多数细胞因子mRNA在T细胞中只短暂存在,其存在的量与T细胞产生细胞因子的量有很好的相关性,所以,在大多数情况下,细胞内mRNA的量可以反映细胞产生细胞因子的情况,反有公认的细胞因子的基因均已克隆化,故能较容易地得到某一细胞因子的
细胞因子生物学活性检测
实验方法原理 白细胞介素1是一种重要的细胞因子,主要由单核-巨噬细胞产生,IL-1不仅对多种免疫活性细胞有重要的调节功能,而且与发热、炎症发生以及某些疾病的病理变化有关。目前对IL-1产生水平的检测主要应用生物学活性检测的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺细胞检测IL-1生物学活性 小鼠胸腺细胞在丝裂原
Th1细胞和Th2细胞的区别
由于Th1细胞和Th2细胞都能分泌细胞因子促进自身的增殖并抑制对方的增殖,因此在正常情况下机体中 Th1细胞和Th2细胞处于相对平衡的状态。但当机体发生功能异常时,常表现出平衡偏向其中一方,称为 “Th1/Th2漂移”。一旦Th1细胞和Th2细胞之间的平衡状态被打破,很可能造成人体细胞因子网络的动态
检测细胞活性的方法
将细胞放入染色剂中 如果染色剂进入细胞内 则说明细胞死亡 因为活着的细胞的细胞膜有选择透过性 如果细胞死亡 细胞膜将失去其功能特点也就是选择透过性 变成全透性 举个我们曾经做过的题为例子:将2个某植物的种子放到品红溶液中 一段时间后一个种子内仍然不变色 另一个种子被染成红色 说明被染成红色的种子已死
关于Th细胞检测的酶联免疫点法介绍
Schauer等对胞内细胞因子的测定作出综合评价,标本来源包括末梢血单个核细胞、肿瘤细胞、组织细胞等,检测方法常用免疫组化法,主要为碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)技术[6] 和测定mRNA的荧光原位杂交技术(FISH),此外还有显微荧光法,将单个细胞用多聚甲醛固定,皂素渗透后,行间接免疫荧
检测细胞生物学活性有哪些方法
根据每细胞定重量设计用于单细胞、细胞及丝状体微物测定定体积品通离或滤菌体离经洗涤再离直接称重求湿重丝状体微物滤用滤纸吸菌丝间自由水再称重求湿重论细菌品丝状菌品放已知重量平皿或烧杯内于一05℃烘干至恒重取放入干燥器内冷却再称量求微物干重 要测定固体培养基放线菌或丝状真菌先加热至50℃使琼脂熔化滤菌丝体
细胞活性检测化学发光细胞活性测定
ATP发光法ATP是细胞的能量直接来源,ATP发光法是通过检测细胞内ATP含量来分析细胞增殖。市面上的原理是利用外源的萤火虫荧光素(Luciferin)与荧光素酶(Luciferase),以细胞内含的ATP为能量来源,发生氧化反应产生生物冷光,因此可通过监测冷光光度,来对应ATP含量并判断细胞增殖状
流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群(三)
2 不同时间的PMA刺激对小鼠外周血T淋巴细胞抗原表达的影响。PMA刺激8h后CD4阳性T淋巴细胞的表达没有明显下降。PMA刺激12h后,CD4阳性T淋巴细胞的表达明显下降。而CD8表达在8h和12h均没有明显下降。典型的检测结果见图2。图2 不同时间的PMA刺激对小鼠外周血T淋巴细胞抗原表达的影响
流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群(二)
2 不同浓度的PMA刺激后人T淋巴细胞CD4、CD8和CD3的表达。24孔细胞培养板中,每孔加入约5×105个细胞,加入RPMI 1640培养基至总体积1ml。加入不同浓度的PMA(10ng、20ng和50ng终浓度)和500ng/ml Ionomycin共同刺激人外周血单个核细胞,同时加入
流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群(一)
早在1986年Mosmann等[1]依据小鼠分泌的细胞因子谱不同首次将Th细胞分为Th1和Th2两个功能不同的独立亚群。Th1细胞主要分泌IL-2、、IL-12、IFN-γ和TNF- α等细胞因子,介导与细胞毒和局部炎症有关的免疫应答,参与细胞免疫及迟发型超敏反应。Th2细胞主要分泌IL-4、I
流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群(四)
从Rostaing等[2]发表流式细胞术检细胞内细胞因子的方法后,陆续有人研究了流式细胞术检测细胞内因子方法的可行性及重复性等问题。虽然活化T淋巴细胞有各种各样的方法,如:PMA、PHA、Con A、CD3、CD2和CD28等。但是目前公认的较好的方法仍然是PMA和钙离子载体的联合刺激。研究
什么是Th细胞
Th细胞为辅助型t细胞,参与体液免疫,有B细胞或巨噬细胞提成抗原给th细胞以后,Th细胞就被活化.诱导b细胞增值和释放细胞因子诱导b细胞分化产生抗体.
外周血B细胞的检测_活性B细胞检测
实验步骤展开
细胞活性检测Orangu™细胞计数
Orangu™计数法Orangu™ solution(Cell Guidance,货号:OR01-500)是一种无细胞毒性、高灵敏度、比色法,用于测定细胞增殖和细胞毒性的细胞活性试剂。利用WST-8(细胞代谢的一种水溶性的四唑盐)在细胞内线粒体脱氢酶作为电子介质的情况下,它被还原为橙色的甲瓒染料,且
外周血活性T细胞的检测
实验步骤展开
外周血活性T细胞的检测
实验步骤 展开
外周血活性T细胞的检测
外周血活性T细胞的检测 实验步骤
细胞活性检测的方法介绍
可以简单将分析细胞活力和增殖测定的方法分成5大类:● 代谢增殖测定● DNA合成增殖实验● 化学发光细胞活性测定● 荧光染料增殖实验● 台盼蓝细胞计数
Th1细胞的功能
主要是增强吞噬细胞介导的抗感染免疫,特别是抗胞内病原体的感染。IFN-γ(γ干扰素)活化巨噬细胞,增强其杀伤已被吞噬的病原体的能力。还能促进IgG的生成。
Th2细胞的来源
Th2细胞的前体细胞为Th0细胞,是未受抗原刺激的初始CD4+T细胞。Th0细胞向不同谱系(Th1、Th2、Th3等)的分化受到抗原的性质、细胞因子的种类与细胞因子间的平衡的调控。 Th0细胞向Th2细胞分化需要由嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、NKT细胞或已分化的Th2细胞产生的白细胞介素I
Th细胞的调节作用
在机体的特异性免疫应答中,Th细胞发挥重要作用。根据Th细胞分泌的细胞因子的不同,可将Th细胞分成Th0,Th1,Th2等类型,其中Th1和Th2细胞分别由Th0细胞分化而来。Th2细胞主要诱导体液免疫,Th1细胞主要诱导细胞免疫。Th1和Th2细胞通过各自分泌的细胞因子相互制约,Th细胞主要分
Th1细胞的定义
Th0细胞在IL-12等细胞因子作用下分化而成,Th1细胞为CD4阳性细胞,主要分泌IL-2(白细胞介素2)、IFN-γ(γ干扰素)、TNF(β肿瘤坏死因子)等。功能为参与调节细胞免疫,辅助细胞毒性T细胞分化,介导细胞免疫应答,参与迟发型超敏反应等。 Th1,Th2,Th3,和Th17细胞同属
Th1/Th2的细胞平衡相关内容
由于Th1细胞和Th2细胞都能分泌细胞因子促进自身的增殖并抑制对方的增殖,因此在正常情况下机体中 Th1细胞和Th2细胞处于相对平衡的状态。但当机体发生功能异常时,常表现出平衡偏向其中一方,称为 “Th1/Th2漂移”。一旦Th1细胞和Th2细胞之间的平衡状态被打破,很可能造成人体细胞因子网络的
细胞因子生物学活性检测实验-古朵实验√
白细胞介素1是一种重要的细胞因子,主要由单核-巨噬细胞产生,IL-1不仅对多种免疫活性细胞有重要的调节功能,而且与发热、炎症发生以及某些疾病的病理变化有关。目前对IL-1产生水平的检测主要应用生物学活性检测的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺细胞检测IL-1生物学活性 小鼠胸腺细胞在丝裂原刺激下表达IL
细胞因子生物学活性检测和浓度测定方法
细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段,同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。但是,由于细胞因子