细胞因子生物学活性检测

实验方法原理 白细胞介素1是一种重要的细胞因子,主要由单核-巨噬细胞产生,IL-1不仅对多种免疫活性细胞有重要的调节功能,而且与发热、炎症发生以及某些疾病的病理变化有关。目前对IL-1产生水平的检测主要应用生物学活性检测的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺细胞检测IL-1生物学活性 小鼠胸腺细胞在丝裂原刺激下表达IL-1受体,在有IL-1同时存在的条件下,IL-1可协同丝裂原促T细胞的增殖作用。根据加入IL-1后增殖水平(3H-TdR掺入率)的增加可计算出样品中IL-1的活性单位,或计算出刺激指数。二、应用EL-4 CTLL检测IL-1生物学活性 小鼠胸腺瘤细胞系EL4的某些亚克隆细胞表面具有高密度IL-1受体,在IL-1诱导下产生高水平的IL-2,通过用IL-2依赖株CTLL-2检测IL-2的生物学活性,从而反映检测样品中IL-1的水平。实验材料 ConAEL4细胞CTLL-2细胞试剂、试剂盒 FCS RPMI......阅读全文

细胞因子生物学活性检测

实验方法原理 白细胞介素1是一种重要的细胞因子,主要由单核-巨噬细胞产生,IL-1不仅对多种免疫活性细胞有重要的调节功能,而且与发热、炎症发生以及某些疾病的病理变化有关。目前对IL-1产生水平的检测主要应用生物学活性检测的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺细胞检测IL-1生物学活性 小鼠胸腺细胞在丝裂原

细胞因子的生物学活性

  细胞因子具有非常广泛的生物学活性,包括促进靶细胞的增殖和分化,增强抗感染和细胞杀伤效应,促进或抑制其它细胞因子和膜表面分子的表达,促进炎症过程,影响细胞代谢等。  一、免疫细胞的调节剂  免疫细胞之间存在错综复杂的调节关系,细胞因子是传递这种调节信号必不可少的信息分子。例如在T-B细胞之间,T细

细胞因子生物学活性检测实验-古朵实验√

白细胞介素1是一种重要的细胞因子,主要由单核-巨噬细胞产生,IL-1不仅对多种免疫活性细胞有重要的调节功能,而且与发热、炎症发生以及某些疾病的病理变化有关。目前对IL-1产生水平的检测主要应用生物学活性检测的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺细胞检测IL-1生物学活性 小鼠胸腺细胞在丝裂原刺激下表达IL

细胞因子生物学活性检测和浓度测定方法

细胞因子(cytokine)是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的统称。在免疫应答过程中,细胞因子在免疫调节、炎症应答、肿瘤转移等生理和病理过程中起重要作用。细胞因子的检测不仅是基础免疫研究的有较手段,同时在临床疾病诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面具有重要价值。但是,由于细胞因子

细胞因子生物学检测法

  生物学检测又称生物活性检测,是根据细胞因子特定的生物活性而设计的检测法。由于各种细胞因子具有不同的活性,例如IL-2促进淋巴细胞增殖,TNF杀伤肿瘤细胞,CSF刺激造血细胞集落形成,IFN保护细胞免受病毒攻击,因此选择某一细胞因子独特的生物活性,即可对其进行检测。生物活性检测法又可分为以下几类:

细胞因子生物学活性测定法的特点

  ①敏感性较高;  ②特异性不高;  ③操作繁琐;  ④易受干扰。

细胞因子生物学活性测定法的特点

  细胞因子生物学活性测定法主要具有以下特点:  ①敏感性较高;  ②特异性不高;  ③操作繁琐;  ④易受干扰。

细胞因子生物学活性测定法有什么特点?

细胞因子生物学活性测定法主要具有以下特点:①敏感性较高;②特异性不高;③操作繁琐;④易受干扰。

TNFα生物学活性检测方法

光密度法 实验材料 小鼠L929细胞 试剂、试剂盒 TNF标准品

干扰素生物学活性检测

实验方法原理干扰素能刺激某些指示细胞(如人羊膜上皮细胞Wish株、人喉癌细胞株Hep-2以及人胚肌皮或肺单层细胞)产生抗病毒蛋白,从而使细胞免受水疱性口炎病毒(VSV)的攻击,根据待测样品不同稀释度的保护能力,计算出干扰素生物学活性单位。实验材料VSVWISHHeP-2细胞株试剂、试剂盒MTT二甲亚

TNFα生物学活性检测方法

基本原理TNF的生物学活性之一是能直接杀伤肿瘤细胞。TNF与相应受体结合后向细胞内移,被靶细胞溶酶体摄取导致溶酶体稳定性降低,各种酶外泄,引起细胞溶解。肿瘤细胞株对TNF-α的敏感性有很大的差异,用放线菌素D、丝裂酶素C、放线菌酮等处理肿瘤细胞,可明显增强TNF-α杀伤肿瘤细胞活性。材料和试剂1,完

表达蛋白的生物学活性的检测

一、MTT比色法检测细胞活性(一)原理活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。(二)试剂准备1、青链霉素溶液(100X):青霉素100万U,链霉素100万U,溶于100mlddH2

表达蛋白的生物学活性的检测

一、MTT比色法检测细胞活性(一)原理    活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。(二)试剂准备1、   青链霉素溶液(100X):青霉素100万U,链霉素100万U,溶于10

表达蛋白的生物学活性的检测

一、MTT比色法检测细胞活性(一)原理活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶能催化无色的MTT形成蓝色的甲肷,其形成的量与活细胞数和功能状态呈正相关。对细胞活力有影响的表达蛋白活性检测可以通过MTT比色法进行。(二)试剂准备1、青链霉素溶液(100X):青霉素100万U,链霉素100万U,溶于100mlddH2

IL10生物学活性检测

实验材料 小鼠IL-4试剂、试剂盒 FCS-IMDM培养液rh IL-10标准品3H-TdR仪器、耗材 离心机培养箱实验步骤 D36细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算待测样品的IL-10的活性单位⑥

检测细胞生物学活性有哪些方法

根据每细胞定重量设计用于单细胞、细胞及丝状体微物测定定体积品通离或滤菌体离经洗涤再离直接称重求湿重丝状体微物滤用滤纸吸菌丝间自由水再称重求湿重论细菌品丝状菌品放已知重量平皿或烧杯内于一05℃烘干至恒重取放入干燥器内冷却再称量求微物干重 要测定固体培养基放线菌或丝状真菌先加热至50℃使琼脂熔化滤菌丝体

IL4生物学活性检测

实验材料 IL-4诱生试剂、试剂盒 生理盐水淋巴细胞分层液FCS-IMDM培养液PHA仪器、耗材 细胞培养板培养箱实验步骤 一、IL-4生物学活性测定 CT.4S细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算待

IL1生物学活性检测

实验方法原理 IL-1与小鼠胸腺细胞共同培养时,IL-1可刺激小鼠胸腺细胞增殖。进一步通过3H-TdR掺入法或染料摄入法判定小鼠胸腺细胞增殖量,推定IL-1的生物学活性。通过检测IL-1的生物学活性,可了解单核-巨噬细胞等的功能。实验材料 小鼠胸腺细胞试剂、试剂盒 FCS-RPMI-1640培养液L

肿瘤坏死因子α生物学活性检测

实验方法原理TNF-α受体广泛地分布于多种肿瘤细胞和血细胞,根据TNF-α与相应靶细胞结合后引起不同的生物学效应,建立了多种检测TNF-α生物学活性方法。某些肿瘤细胞膜表面的TNF-α受体与TNF-α结合后,可导致这些肿瘤细胞的死亡,可通过检测对肿瘤细胞的杀伤能力,来反映TNF-α的生物学活性。若这

IL8生物学活性检测

(一)原理IL-8对中性粒细胞具有激活和趋化作用,通过检测中性粒细胞的迁移距离可以确定IL-8的生物学活性,即对中性粒细胞的趋化活性。 (二)材料 (1)6%右旋糖酐生理盐水溶液。 (2)淋巴细胞分层液比重为1.077+(-)0.001。 (3)2%琼脂糖:称取2g琼脂糖,加入到10

细胞因子的生物学作用

细胞因子还有其他的生物学作用,比如促进细胞凋亡和促进创伤组织修复。肿瘤坏死因子超家族中的一些细胞因子可以直接杀伤或者诱导靶细胞的凋亡,比如TNF-a和LT-α可以杀伤被病毒感染的靶细胞或肿瘤细胞。转化生长因子一B(TGF-B)可以刺激成纤维细胞和成骨细胞而促进损伤组织的修复,表皮生长因子可促进上皮细

细胞因子的生物学作用

细胞因子还有其他的生物学作用,比如促进细胞凋亡和促进创伤组织修复。肿瘤坏死因子超家族中的一些细胞因子可以直接杀伤或者诱导靶细胞的凋亡,比如TNF-a和LT-α可以杀伤被病毒感染的靶细胞或肿瘤细胞。转化生长因子一B(TGF-B)可以刺激成纤维细胞和成骨细胞而促进损伤组织的修复,表皮生长因子可促进上皮细

趋化活性测定法测定细胞因子活性

  具有趋化活性的细胞因子,也称趋化因子,诸如IL-8、IL-16、PANTES、MCP及MIP等,能诱导中性粒细胞、单核-巨噬细胞或淋巴细胞等定向迁移。其诱导细胞迁移的方式包括趋化性和化学增活性。趋化性是诱导细胞由趋化因子低浓度处向趋化因子高浓度处做定向移动的特性,可采用琼脂糖和Boyden盲端微

趋化活性测定法测定细胞因子活性

  具有趋化活性的细胞因子,也称趋化因子,诸如IL-8、IL-16、PANTES、MCP及MIP等,能诱导中性粒细胞、单核-巨噬细胞或淋巴细胞等定向迁移。其诱导细胞迁移的方式包括趋化性和化学增活性。趋化性是诱导细胞由趋化因子低浓度处向趋化因子高浓度处做定向移动的特性,可采用琼脂糖和Boyden盲端微

IL10生物学活性检测实验

实验材料小鼠IL-4试剂、试剂盒FCS-IMDM培养液rh IL-10标准品3H-TdR仪器、耗材离心机培养箱实验步骤D36细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算待测样品的IL-10的活性单位⑥展开 注

IL6生物学活性检测实验

实验材料IL-6的诱生试剂、试剂盒FCS-RPMI-1640培养液谷氨酰胺HEPES青霉素链霉素PBSA缓冲液仪器、耗材离心机培养箱摇床实验步骤 1.  IL-6的诱生:诱生过程与IL-2基本相同。用于诱导产生IL-6的细胞可用PBMC。诱生剂用PHA。2.  IL-6的生物学活性测定:采用MH60

IL6生物学活性检测实验

实验材料 IL-6的诱生试剂、试剂盒 FCS-RPMI-1640培养液谷氨酰胺HEPES青霉素链霉素PBSA缓冲液仪器、耗材 离心机培养箱摇床实验步骤 1.  IL-6的诱生:诱生过程与IL-2基本相同。用于诱导产生IL-6的细胞可用PBMC。诱生剂用PHA。2.  IL-6的生物学活性测定:采用M

IL8生物学活性检测实验

IL-8中对中性粒细胞具有激活和趋化作用,通过检测中性粒细胞的迁移距离可以确定IL-8的生物学活性,即对中性粒细胞的趋化活性。实验材料IL-8的诱生试剂、试剂盒右旋糖酐生理盐水琼脂糖淋巴细胞分层液Hank’s液甲醇Wright-Giemsa染液仪器、耗材洁净载玻片打孔器离心机培养箱实验步骤一、IL-

IL8生物学活性检测实验

实验材料 IL-8的诱生试剂、试剂盒 右旋糖酐生理盐水琼脂糖淋巴细胞分层液Hank’s液甲醇Wright-Giemsa染液仪器、耗材 洁净载玻片 打孔器离心机培养箱实验步骤 一、IL-8的诱生1.  常规分离PBMC,洗涤后,调细胞浓度为5×106/ml。2.  将细胞接种于24孔细胞培养板,每孔0

IL4生物学活性检测实验

实验材料IL-4诱生试剂、试剂盒生理盐水淋巴细胞分层液FCS-IMDM培养液PHA仪器、耗材细胞培养板培养箱实验步骤一、IL-4生物学活性测定 CT.4S细胞悬液制备①↓接种细胞于96孔培养板②↓加待测样品和标准品③↓加3H-TdR④↓收集细胞,测定3H-TdR掺入量⑤↓绘制标准曲线,计算待测样品的