酶联免疫吸附测定的分类方法
1、夹心法 夹心法常用于检测大分子抗原,一般的操作步骤为: 将具有专一性的抗体固著(coating)于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体; 加入待测检体,检体中若含有待测的抗原,则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结; 洗去多余待测检体; 洗去多余未键结一次抗体,加入带有酶的二次抗体,与一次抗体键结; 洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或仪器读取呈色结果。 2、间接法 间接法常用于检测抗体,一般的操作步骤为: 将已知的抗原固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余的抗原; 加入待测检体,检体中若含有待测的一次抗体,则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结; 洗去多余待测检体,加入带有酶的二次抗体,与待测的一次抗体键结; 洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酶呈色,藉仪器(ELISA reader)测定塑胶盘中的吸光值(OD值),以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。 3、竞争法 竞争法是......阅读全文
酶联免疫吸附测定的分类方法
1、夹心法 夹心法常用于检测大分子抗原,一般的操作步骤为: 将具有专一性的抗体固著(coating)于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体; 加入待测检体,检体中若含有待测的抗原,则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结; 洗去多余待测检体; 洗去多余未键结一次抗体,加入带有酶的二次抗体,与一
酶联免疫吸附测定方法介绍
双抗体夹心法双抗体夹心法双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法,操作步骤如下:一、将特异性抗体与固相载体连接,形成固相抗体:洗涤除去未结合的抗体及杂质。二、加受检标本:使之与固相抗体接触反应一段时间,让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合,形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。三、加酶标抗体:使固
PCR酶联免疫吸附测定的方法特点
中文名称PCR酶联免疫吸附测定英文名称PCRELISA定 义在PCR扩增反应液中加入抗原标记的核苷酸(如地高辛精标记的脱氧尿三磷)使其参入PCR产物,经变性后与特定的能够固定化的寡核苷酸探针杂交,然后用连接了酶的抗体去检测杂交分子的一种聚合酶链反应与酶联免疫吸附测定结合的技术。可用于PCR产物的保
肽酶联免疫吸附测定的方法特点
中文名称肽-酶联免疫吸附测定英文名称peptideELISA定 义以肽为包被抗原的酶联免疫吸附测定。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
酶联免疫吸附测定的目的和方法介绍
酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,简写ELISA或ELASA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。酶联免疫吸附测定(ELISA)为免疫学中的经典实验,本词条从定义、基本原理、分类
酶联免疫吸附测定方法的注意事项
⒈ 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。⒉ 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:⑴ 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯
酶联免疫吸附测定的方法类型和操作步骤
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。该法适于测定细胞培养上清、血清、血浆及组织液中的样本,干扰小可以测到每毫升纳克水平的细胞因子(或受体)的水平。在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体,②酶标记的抗原或抗体,③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出
酶联免疫吸附测定的方法类型和操作步骤
ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。该法适于测定细胞培养上清、血清、血浆及组织液中的样本,干扰小可以测到每毫升纳克水平的细胞因子(或受体)的水平。在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体,②酶标记的抗原或抗体,③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出
酶联免疫吸附测定
1 试剂的准备 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。2 标本的采取和保存可用作ELISA测定
酶联免疫吸附测定的原理
原理是抗原与抗体之间的特异性结合。酶联免疫吸附是在固相载体上包被好能与目的抗原特异性结合的抗体,当检测样本中含有目的抗原时,其会与固相载体上的抗体相结合,并加入和链接化学发光酶,通过冲洗去掉其他非目的抗原,加入显色底物与之反应,此时吸光度越大也就是颜色越深的就说样本中明目的抗原越多,没有颜色反应
酶联免疫吸附测定的原理
酶联免疫吸附测定基本原理:抗原或抗体预先结合到某种固相载体表面;测定时,将受检样品(含待测抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体起反应形成抗原或抗体复合物;反应终止时,固相载体上酶标抗原或抗体被结合量(免疫复合物)即与标本中待检抗体或抗原的量成一定比例;经洗涤去除反
酶联免疫吸附测定的简介
酶联免疫吸附测定enzyme linked immunosorbent assay(简写ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。酶联免疫吸附测定(ELISA)为免疫学中的经典实验,本词条从定义、基本原理、分类方法、操作
酶联免疫吸附测定的原理
原理是抗原与抗体之间的特异性结合。酶联免疫吸附是在固相载体上包被好能与目的抗原特异性结合的抗体,当检测样本中含有目的抗原时,其会与固相载体上的抗体相结合,并加入和链接化学发光酶,通过冲洗去掉其他非目的抗原,加入显色底物与之反应,此时吸光度越大也就是颜色越深的就说样本中明目的抗原越多,没有颜色反应的就
斑点酶联免疫吸附测定(DELISA)材料和方法
(以快速诊断口蹄疫为例) 斑点酶联免疫吸附测定法(DotELISA,DELISA)是以纤维素膜代替免疫酶固相载体法中常用的聚苯乙烯微量反应板而建立的一种免疫检验方法。DELISA不仅保留了常规ELISA的优点,而且还弥补了抗原或抗体对载体包被不牢等不足,所以具有敏感性高,特异性强,被检样品用量少
酶联免疫吸附测定(ELISA)
基本原理 1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原
斑点酶联免疫吸附测定
实验概要斑点酶联免疫吸附测定法(DotELISA,DELISA)是以纤维素膜代替免疫酶固相载体法中常用的聚苯乙烯微量反应板而建立的一种免疫检验方法。DELISA不仅保留了常规ELISA的优点,而且还弥补了抗原或抗体对载体包被不牢等不足,所以具有敏感性高,特异性强,被检样品用量少,节省材料,不需特殊仪
斑点酶联免疫吸附测定
实验概要斑点酶联免疫吸附测定法(DotELISA,DELISA)是以纤维素膜代替免疫酶固相载体法中常用的聚苯乙烯微量反应板而建立的一种免疫检验方法。DELISA不仅保留了常规ELISA的优点,而且还弥补了抗原或抗体对载体包被不牢等不足,所以具有敏感性高,特异性强,被检样品用量少,节省材料,不需特殊仪
斑点酶联免疫吸附测定
实验概要斑点酶联免疫吸附测定法(DotELISA,DELISA)是以纤维素膜代替免疫酶固相载体法中常用的聚苯乙烯微量反应板而建立的一种免疫检验方法。DELISA不仅保留了常规ELISA的优点,而且还弥补了抗原或抗体对载体包被不牢等不足,所以具有敏感性高,特异性强,被检样品用量少,节省材料,不需特殊仪
酶联免疫吸附测定的原理简介
1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到
酶联免疫吸附测定的检测步骤
ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控品(这是严格的要求,它的范围必须在质控范围内)。经过一个小时的孵育,然后洗板,加底物,半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分,然后就是读数。由数值来判断结果的阴性或阳
物镜的分类方法
显微镜的鉴别能力主要决定于物镜。物镜的鉴别能力可分为平面和垂直鉴别能力。物镜(objective lens) 物镜是决定光学显微镜基本性能及功能的最重要的光学单元。因此,为了满足各种需求和应用,我们研制出了有着最佳光学性能和功能(这对光学显微镜而言也是最重要的性能和功能)的物镜,推出了能满足不同使用
分离方法的分类
分离方法的分类有多种方式,但是有些分类方式并不十分严格,这是由于有些分离方法涉及两种以上的机制;每一种分离方式无非是以下三个过程的单独、同时或依次进行的过程:①化学转化;②两相中的分配;③相的物理分离。按照分配和相分离之间的关系来研究分离就产生多种分离模式。1、间歇分离 这是最简单的分离模式。它只涉
可控硅的分类方法和分类
可控硅有多种分类方法。 (一)按关断、导通及控制方式分类:可控硅按其关断、导通及控制方式可分为普通可控硅、双向可控硅、逆导可控硅、门极关断可控硅(GTO)、BTG可控硅、温控可控硅和光控可控硅等多种。 (二)按引脚和极性分类:可控硅按其引脚和极性可分为二极可控硅、三极可控硅和四极可控硅。 (三
酶联免疫吸附测定法的概述
酶联免疫测定方法是以抗原和抗体分子为测定 靶标的方法,亦是目前最为常用的实验室诊断方法之一。 从理论上说,一种 生物或生理活性物质,只要有办法得到其特异的抗体,就可以建立这种物质的酶联免疫测定方法。在以前看来一些难以进行质量测定的微量生物活性物质,如受体、 细胞因子以及酶等均可使用酶联免疫测定
关于酶联免疫吸附测定的发展介绍
亲和素是一种糖蛋白,一分子亲和素可以与四个生物素小分子发生专一亲和作用,类似抗原与抗体亲和。它们之间的作用力是已知最强的非共价作用。80年代后,随着生物素-亲合素系统(BAS)作用被发现,这一亲和作用被结合应用到ELISA技术上,大大提高了后者反应的灵敏性与专一性。生物素很易与蛋白质(如抗体等)
关于酶联免疫吸附测定的结果判断
定性测定定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或抗体作出"有"或"无"的简单回答,分别用"阳性"、"阴性"表示。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应。"阴性"则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果,即用滴度来表示反应的强度,其实质仍是一个定性试验。在这种半定量测定中,将标本作一系
酶联免疫吸附测定法的概述
酶联免疫测定方法是以抗原和抗体分子为测定 靶标的方法,亦是目前最为常用的实验室诊断方法之一。 从理论上说,一种 生物或生理活性物质,只要有办法得到其特异的抗体,就可以建立这种物质的酶联免疫测定方法。在以前看来一些难以进行质量测定的微量生物活性物质,如受体、 细胞因子以及酶等均可使用酶联免疫测定
酶联免疫吸附测定法的原理
酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用的免疫学检测技术,用于定量或定性检测样品中的抗原或抗体。基本原理是将抗原或抗体固定在固相载体(如 96 孔酶标板)表面,然后加入待检测的样品,使其中的抗原或抗体与固相载体上的抗原或抗体结合。
血浆蛋白的分类方法
血浆蛋白是血浆中最主要的固体成分,含量为60~80g/L,血浆蛋白质种类繁多,功能各异。用不同的分离方法可将血浆蛋白质分为不同的种类。 最初用盐析法只是将血浆蛋白分为白蛋白和球蛋白,后来用分段盐析法可细分为白蛋白、拟球蛋白、优球蛋白和纤维蛋白等组分。 用醋酸纤维薄膜电泳法可分为白蛋白、α1球
衍生化方法的分类
分衍生化常用的反应有酯化、酰化、烷基化、硅烷化、硼烷化、环化和离子化等。虽然气相色谱已有许多衍生化方法,但它有一个致命的缺点是不能用于热不稳定化合物。此外,对于一些有复杂基质的实际样品,除分离上的困难外,还容易污染进样器和损坏柱子。衍生化反应从是否形成共价键来说,可分为两种:标记和非标记反应。标记反