动物细胞培养的培养条件简介
1、无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。 2、营养物质:无机物(无机盐、微量元素等),有机物(糖、氨基酸、促生长因子等) 3、血清和血浆 (提供细胞生长必须的营养成份) 4、温度和pH(36.5±0.5℃,7.2~7.4) 5、气体环境(95%的空气+5%CO₂的混合气体) 6、其中5%CO₂气体是为保持培养液的pH稳定......阅读全文
细胞培养设施和基本条件
1、实验室设计:细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响.细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘.细胞培养工作包括:工作液配制、无菌操作(采样)、温育、无菌处理,细胞和用品贮存等.细胞培养室的设计
关于动物细胞培养的分类的介绍
1 根据细胞种类:原代细胞培养, 传代细胞培养 原代细胞:将动物各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA) 或机械方法处理,分散成单细胞,在合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。培养的细胞为正常的动物细胞,一般培养10代后不再增殖,死亡
动物细胞培养的基础培养基的介绍
细胞培养基成分复杂,包括盐类、糖类、维生素、氨基酸、代谢前体、生长因子、激素和微量元素。对这些物质的需求因细胞而有差异,这也导致大量的不同培养基配方出现。主要碳源物质通常是葡萄糖,有时也会使用半乳糖代替,这是因为半乳糖的代谢速度较慢。氨基酸(尤其是L-谷氨酰胺)和丙酮酸盐也可作为碳源。 除了营
动物细胞培养的相关内容
动物细胞培养(animal cell culture)就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞(使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶)然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 细胞培养是指细胞在体外条件下的生长,动物细胞在单独细胞培养的过程中不再形成个体。
关于细胞克隆的动物细胞培养介绍
在所有的细胞离体培养中,最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。 ⑴血清:动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子,如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里,血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。 ⑵支持物:大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用
血清在动物细胞培养中的作用
血清在动物细胞培养中起着多方面的作用: ①提供细胞生存和增殖所必需的生长调节因子。 ②补充基础培养基中没有或量不足的营养成分。 ③含有一些可供贴壁细胞型细胞贴壁生长的基质成分。 ④提供载体蛋白,可结合维生素、脂质、金属离子等。 ⑤在一些情况下,中和毒性物质
哺乳动物细胞的细胞培养温度
维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定而适宜的温度;不同种类的细胞对培养温度要求也不同。人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃,偏离这一温度范围,细胞的正常代谢会受到影响,甚至死亡。培养细胞对低温的耐受力较对高温强,温度上升不超过39℃时,细胞代谢与温度成正比;人体细胞在39-40℃1小时,即能
动物细胞培养——水的准备与灭菌
实验方法原理目的纯水,火菌水的常规供应.训练目标在无菌区外正确地进行准备操作。了解水的纯化和制备过程的必要知识。监份:间断的。时间:30min.背景信息超纯水(UPW)的制备和灭菌(见 11.4节.图 5.17,图11.10)。示范材料和操作:准备1几作的监督人要讲解水纯化设备的原理和操作,并示范操
RPMI1640培养基的配制及细胞培养的条件
一、 培养基的特性——细胞生存的环境与条件1、温度条件(37±0.5℃) 2、pH条件 (7.2~7.4) 3、气体条件 4、水的质量(三蒸) 5、渗透压 6、营养条件 7、无菌条件二、培养基的分类1、平衡盐液 2、天然培养基(小牛血清、胚胎液) 3、合成培养基(化学成分清楚)三、R
RPMI1640培养基的配制及细胞培养的条件
一、 培养基的特性——细胞生存的环境与条件1、温度条件(37±0.5℃) 2、pH条件 (7.2~7.4) 3、气体条件 4、水的质量(三蒸) 5、渗透压 6、营养条件 7、无菌条件二、培养基的分类1、平衡盐液 2、天然培养基(小牛血清、胚胎液) 3、合成培养基(化学成分清楚)三、R
动物细胞培养——无菌技术II:准备培养基
实验方法原理目的操作已灭菌溶液时保持无菌状态。训练目标无菌操作:练习灵巧和无菌的操作。监督:连续监督。背景信息无菌技术的目标(见 6.1 节);无菌环境的要素(见 6.2 节);无菌操作(见 6.3 节).在层流超净台中工作(见 6.4 节);可见的微生物污染物(见 19.3.1 节).示范材料和操
细胞培养所需要的条件-传秋生物
一,实验室设计细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物和不受其他有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作去设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒在另一室
微生物细胞培养的简介
微生物多为单细胞生物,野生生存条件比较简单。所以微生物人工培养的条件比动植物细胞简单得多。其中厌氧微生物培养比好氧微生物复杂,因为严格厌氧需要维持二氧化碳等非氧的惰性气体浓度,而好氧微生物则只需要通过不断搅拌提供无菌氧气。微生物对培养条件要求不如动植物细胞那样苛刻,玉米浆、蛋白胨、麦芽汁、酵母膏
关于动物细胞培养的历史发展的介绍
1907年,哈里森(Harrison)在无菌条件下用淋巴液作培养基,培养蛙胚神经组织存活数周,并观察到神经细胞突起的生长过程,由此创建了盖片覆盖凹窝玻璃悬滴培养法,奠定了动物组织体外培养的基础。之后,又有人将悬滴培养法改良为双盖片培养,提高了传代效率并减少了污染;1923年,卡雷尔(Carrel
恒温恒湿培养箱细胞培养的基本条件
合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的重要的条件之一,培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质,而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。 2血清 目前,大多数合成培养基都需要添加血清.血清是细胞培养液中重要的成分之一,含有细胞生长所需的多种生长因子及其它营养成分。 3无菌无毒细胞
淋巴细胞培养条件选择和失败原因
一、严格无菌操作 对实验室以及培养过程中所接触的试剂、液体、器皿、仪器的消毒,均应严格按照有关细胞培养的参考书的要求进行操作。无菌观念要贯穿整个实验的始终, 不可松懈。二、培养器皿的选择 淋巴细胞培养既可选择培养板(24 、48 、96 孔) 、培养瓶,也可选择三角烧瓶、试管等器皿进行培养。有研究表
可否使用与原先细胞培养条件不同之培养基?
不能更换培养基。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活。
动物细胞培养——pH标准色阶的制备
实验方法原理目的制备一系列色阶,与实验室通常使用的比色卡很相似,含有简单的培养基或带酚红的盐溶液,调节其pH范围使之包含培养中常见的pH范围。应用在制备培养墓以及换液或传代前川于参照估计pH。训练目标熟悉酚红作为pH指示剂的使用.用注射式过渡器灭菌。监督:开始时连续监督,在之后直到操作完成,可以减少
动物细胞培养基的成分有哪些
动物细胞培养基有平衡盐溶液、天然培养基、合成培养基、无血清培养液等四种。 平衡盐溶液: 目前常用的平衡盐溶液有乳酸钠和复方氯化钠溶液(1.86%乳酸钠溶液和复方氯化钠溶液之比为1:2)与碳酸氢钠和等渗盐水溶液(1.25%碳酸氢钠溶液和等渗盐水之比为1:2)两种。 天然培养基: 天然培养基
动物细胞培养——单层细胞的换液
实验方法原理目的给单层细胞换新鲜培养纂。应用用于给快速生长的培养物在传代之间更换培养基,或从一种类型培养基换成另一种培养幕,训练目标加强无菌操作技巧.介绍细胞维持的一个基本原理,即在持续培养周期中更换培养基。让实习生观察培养基并明白耗竭培养基的特征.例如细胞密度和(或)pH降低,并观察有没有污染.r
实用哺乳动物细胞培养手册(下)
细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒清洗在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分的化学物质,均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗,且要根据器皿的组成材料不同,选择不同 的清洗方法。玻璃器皿的清
实用哺乳动物细胞培养手册(五)
细胞培养基本概念细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结 构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群。细胞培养目的与用途1、科学研究:药物研究开发与基础研究 药物研究与开发(1) 新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定
实用哺乳动物细胞培养手册(四)
细胞培养无菌操作基本技术无菌操作技术分为三个部分:工作环境及表面的处理,细胞培养所用玻璃及塑料制品的处理及培养液与培养细胞的处理。工作环境的处理 使用层流超净工作台是最经济有效的手段。超净工作台正常工作时,向下的气流可阻挡外界空气污染物进入超净台。(1)实验前,无菌室及无菌操作台用紫外灯照射 30-
血清对动物细胞培养中有哪些作用
血清指血浆除去纤维蛋白原后的胶状液体。每100ml人血清含有蛋白质6—8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。血清不会凝固。有免疫,维持酸碱平衡和渗透压的作用,血清蛋白质亦可储备供给机体蛋白质不足时的应用。人和动物的血清常用以进行各种血清学试验,帮助诊断疾病。含抗体的血清可作为预防或治疗疾病之用。血清中含有
动物细胞培养中细胞如何冻存?
细胞冻存的原则是:冻存缓慢降温,复苏快速升温。不同的动物细胞稍微有点不同,下面是一般的方法:(一)细胞冻存 1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液; 2. 取对数生长期的细胞,用胰蛋白酶把单层生长的细胞消化下来,悬浮生长的细胞则直接将细胞移至15ml离心管中、; 3
实用哺乳动物细胞培养手册(三)
细胞培养环境1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作
实用哺乳动物细胞培养手册(中)
细胞培养环境1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规
实用哺乳动物细胞培养手册(上)
细胞培养基本概念细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结 构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群。细胞培养目的与用途1、科学研究:药物研究开发与基础研究 药物研究与开发(1) 新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定
实用哺乳动物细胞培养手册(中)
细胞培养环境 1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作
实用哺乳动物细胞培养手册(中)
细胞培养环境1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于