视网膜色素上皮细胞的分离培养法相关介绍

上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别受到重视。但上皮细胞培养中常混杂有成纤维细胞,培养时生长速度往往超过上皮细胞,并难以纯化,同时上皮细胞难以在体外长期生存,因此纯化和延长生存时间是培养关键。体内上皮细胞生长在胶原构成的基膜, 因此培养在有胶原的底物上可能利于生长, 另外人或小鼠表皮细胞培养在以 3T3 细胞为饲养层(用射线照射后)时,细胞易生长并可发生一定程度的分化现象。降低 PH、Ca2+含量和温度,向培养基中加入表皮生长因子,均有利于表皮细胞生长。以表皮细胞为例, 用皮肤表皮和真皮分离培养法可获得纯上皮细胞, 其法如下: 1、 取材:外科植皮或手术残余皮肤小块, 早产流产儿皮肤更好, 取角化层薄者, 切成 0.5-1 平方厘米小块。 2、置 0.02%EDTA 中,室温,5 分钟。 3、换入 0.25%胰蛋白酶中,4℃过夜。 4、分离:取出皮块,用血......阅读全文

原发性视网膜色素变性

  原发性视网膜色素变性(RP)是一种比较常见的毯层-视网膜变性,是一组以进行性感光细胞及色素上皮功能丧失为共同表现的遗传性视网膜变性疾病,也是世界范围内常见的致盲性眼病,该病常起于儿童或少年早期,至青春期症状加重,视野逐渐收缩,至中年或老年,黄斑受累致中心视力减退,甚或严重障碍而失明。亦有少数患者

柱层析分离净化法的相关信息介绍

  柱层析法又称色层法或色谱法, 分离原理是根据物质在固定相上的吸附能力不同而进行分离,一般情况下极性大的物质易被固定相吸附,极性小的物质不易被固定相吸附,柱层析过程即是吸附、 解吸、 再吸附和再解吸的过程。柱层析中硅胶作为固定相对复杂有机化合物的分离具有较高的效率,因而在生物油柱层析分离中主要应用

水蒸气蒸馏分离法的相关介绍

  水蒸气蒸馏是分离纯化有机化合物的重要方法之一,它是将水蒸气通入含有不溶或微溶于水但有一定挥发性的有机物的混合物中,并使之加热沸腾,使待提纯的有机物在低于100℃的情况下随水蒸气一起被蒸馏出来,从而达到分离提纯的目的。  水蒸气蒸馏常用于蒸馏在常压下沸点较高或在沸点时易分解的物质,也常用十高沸点物

关于视网膜分离症的护理介绍

  手术成功与否以视网膜能否复位为标准。但视网膜复位,并不一定有相应的视功能恢复。例如超过6个月的所谓陈旧性脱离,因视细胞已发生不逆性损害,即使视网膜术后已经复位,视功能亦不能改善,视野绝对性缺损依然存在。中心视力的预后,主要看黄斑是否受害,(脱离、囊样变性、星芒状固定皱褶等)及受害时间的长短。

上皮细胞类培养实验_胃上皮细胞培养实验

实验方法原理胃癌为我国高发癌症之一,培养正常人胃上皮细胞对研究胃癌癌变机理有很大应用价值。近年来培养人的肾脏上皮、气管上皮、前列腺上皮等都有报道,但培养人胃上皮细胞少见成功。近年我研究室通过培养90例正常胃上皮细胞初代培养获得成功,并建成转化细胞系(Ges-1)。培养人正常胃上皮细胞获得成功主要在于

高速逆流色谱法分离纯化红曲色素组分

摘 要:采用高速逆流色谱法(HSCCC)分离纯化红曲发酵产品中6种Azaphilone类色素组分。筛选弱极性分离溶剂系统正己烷- 醋酸乙酯- 甲醇- 水,研究6 种色素组分在不同溶剂体系中的分配系数,建立两步逆流萃取分离的技术路线。经过HPCCC 分离纯化和丙酮结晶操作,得到6 种高纯度的Azaph

上皮细胞的培养方法

上皮细胞的培养方法上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别受到重视.但上皮细胞培养中常混杂有成纤维细胞,培养时生长速度往往超过上皮细胞,并难以纯化,同时上皮细胞难以在体外长期生存,因此纯化和延长生存时间是培养关键.体内上皮细胞生长在胶原构成的

上皮细胞的培养方法

上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别受到重视.但上皮细胞培养中常混杂有成纤维细胞,培养时生长速度往往超过上皮细胞,并难以纯化,同时上皮细胞难以在体外长期生存,因此纯化和延长生存时间是培养关键.体内上皮细胞生长在胶原构成的基膜,因此培养在有

美研究有望改进老年黄斑变性干细胞疗法

  美国国家眼科研究所一项新研究说,可以更好地用诱导多能干细胞(iPS细胞)培育视网膜色素上皮细胞,从而改进对老年黄斑变性的干细胞疗法,未来有望给一些失明者带来光明。  老年黄斑变性是一种常见的与年龄有关的眼部疾病,早期症状为视力下降,晚期则表现为视野中心出现暗点、视物模糊,严重者会失明,是造成老年

上皮细胞培养

1、取材:外科植皮或手术残余皮肤小块,早产流产儿皮肤更好,取角化层薄者,切成0.5-1平方厘米小块。2、置0.02%EDTA中,室温,5分钟。3、换入0.25%胰蛋白酶中,4℃过夜。4、分离:取出皮块,用血管钳或镊子将表皮与真皮层分开。5、取出表皮,剪成更小的块后,置0.25%胰酶中,37℃,30—

上皮细胞培养

  1)表皮细胞培养  1.取材:取外科植皮或手术残余皮肤小块,以角化层薄者为佳,早产流产儿皮肤更好,切成0.5~1平方厘米小块。  2.EDTA处理:先置入0.02%EDTA中室温置5分钟。  3.冷消化:换入0.25%胰蛋白酶中,置4℃过夜。  4.分离:取出皮肤,用血管钳或镊子把表皮与真皮层分

视网膜动脉硬化的相关介绍

  眼底视网膜的动脉是人体全身唯一可以看到的血管,能够直观的观察到眼底的血管,这也体现了全身的血管情况。  属于中医学中“视瞻昏渺”、“暴盲”等范畴。其危险性决定于硬化的程度,程度越高就越危险。单纯的老年性生理性动脉硬化,既无高血压、糖尿病等全身疾患,也无眼部其他异常情况,仅在眼底检查时发现视网膜动

原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化

 原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化  PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化  原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。  在体外培养原代细胞时,为了保

原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化

PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。在体外培养原代细胞时,为了保证实验结果的可靠性、一致性、稳定性、和可重复性,要求采用

细菌平板划线分离培养法实验

(1)曲线划线分离法:此法多用于含菌量不多的标本或培养咽拭、棉拭所取的培养物,将标本或咽拭、棉拭培养物直接涂布于培养基的 1/5 处,然后用接种环或直接用咽拭(棉拭)作曲线连续划线接种。(2)分区划线分离法:此法多用于含菌量较多的粪便等标本的细菌分离培养。先用接种环取粪便标本,将其涂布在培养基的

细菌平板划线分离培养法实验

实验步骤(1)曲线划线分离法:此法多用于含菌量不多的标本或培养咽拭、棉拭所取的培养物,将标本或咽拭、棉拭培养物直接涂布于培养基的 1/5 处,然后用接种环或直接用咽拭(棉拭)作曲线连续划线接种。(2)分区划线分离法:此法多用于含菌量较多的粪便等标本的细菌分离培养。先用接种环取粪便标本,将其涂布在培养

细胞色素c族的相关介绍

  有c及c1都是线粒体细胞色素,二者的光谱性质十分近似,二者的辅基和与酶蛋白的联接方式都相同。c1单体分子量为38 000,c1是以多聚体存在,无论是单体还是多聚体,都不能与aa3起反应。细胞色素c是分子量最小的细胞色素,由于它的分子量小,是可溶的,容易提取纯化,所以研究比较多,对其结构也最清楚,

细胞色素b族的相关介绍

  包括bT、bK、b5、P450等,bT、bK存在于线粒体内膜,是线粒体呼吸链的成分,不能与O2结合。b5及P450主要存在于内质网,是微粒体混合功能氧化酶系的组成成分(见“微粒体氧化”条),还原型P450与CO结合后,在450nm有最大吸收峰(γ峰),故取名细胞色素P450,它能与O2结合。

关于纸层析法色素分离的原理介绍

  纸层析是用滤纸作为载体的一种色层分析法,其原理主要是利用混合物中各组分在;流动相和固定相的分配比(溶解度)的不同而使之分离。滤纸上吸附的水为固定相(滤纸纤维常能吸20%左右的水),有机溶剂如乙醇等为流动相,色素提取液为层析试样。把试样点在滤纸的滤液细线位置上,当流动相溶剂在滤纸的毛细管的作用下,

肺泡上皮细胞的分离步骤

一、取得完全无血液残留的肺脏:实验前j将大鼠全身血液放净,取得完全无血液残留的肺脏二、消化肺组织:常用于细胞消化的酶有胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。胰蛋白酶是最早用于消化、分离上皮细胞的酶,现在一般用损伤性小的弹性蛋白酶来替代胰蛋白酶。但这种酶却有活性不稳定,有效作用时间短暂,容易自我降解等问题。D

特殊细胞培养实验_单细胞分离培养法

实验方法原理从理论上说各种培养细胞都可用以进行克隆培养。但实际上,初代培养细胞和有限细胞系(二倍体细胞)比较困难。无限细胞系、转化细胞系和肿瘤细胞等则比较容易。其原因是,当体内任何细胞被置于体外培养后,对培养环境都有一个适应过程。期间细胞对营养液具有同化作用,即从培养液中摄取营养的同时,也向培养液排

原发性视网膜色素变性的病因分析

  本病为遗传性疾病,其遗传方式有常染色体隐性,显性与性连锁性遗传3种,以隐性遗传最多;显性遗传次之;性连锁遗传最少,但家族史阴性的散发性病例,亦占有相当数量,通过连锁分析,在人类多条染色体上发现了50多个致病基因位点,近数年来,采用定位克隆和“定位候选基因”的方法,其中18个已被确定,目前认为常染

遗传性视网膜色素变性的概述

  视网膜色素变性是一种少见的遗传性眼病,其遗传方式有常染色体隐性、显性与性连锁隐性3种,以隐性遗传最多(70%-90%);显性遗传次之(3%-20%);性连锁遗传最少(10%以下),是由视神经和视网膜进行性变性萎缩而致。这种病的特殊表现是孩子的视力原来正常或稍低,10~20岁开始发病。初起人暮或黑

关于原发性视网膜色素变性的简介

  原发性视网膜色素变性 具有遗传倾向的慢性进行性视网膜色素上皮和光感受器的变性疾病夜盲和双眼视野逐渐向心脏缩窄是本病主要特征。眼底检查,视乳头呈蜡黄色逐渐苍白萎缩,境界清晰。视网膜血管显著变细早期赤道部视网膜有骨细胞样色素,遮盖部分血管。病变逐渐向后极部扩展甚至累及黄斑,视网膜呈青灰色。眼底荧光血

连续培养的方法恒浊法的相关介绍

  其原理是根据培养器内微生物的生长密度,用光电控制系统(浊度汁)来检测培养液的浊度(即菌液浓度),并控制培养液的流速,从而获得菌体密度高、生长速度恒定的微生物细胞的连续培养液。当培养器中浊度增高时,通过光电控制系统的调节,可促使培养液流速加快,反之则慢,以此来达到恒密度的目的。  在恒浊器中的微生

纯上皮细胞的培养方法

   因此培养在有胶原的底物上可能利于生长,另外人或小鼠表皮在以3T3细胞为饲养层(用射线照射后)时,细胞易生长并可发生一定程度的分化现象。降低PH、Ca2 含量和温度,向培养基中加入表皮生长因子,均有利于表皮细胞生长。以表皮细胞为例,用皮肤表皮和分离培养法可获得纯上皮细胞,方法如下:1、 取材:外

动物胸腺上皮细胞的培养

实验材料:1. 胸腺上皮细胞来源;一般取材小鼠或手术切取的儿童之胸腺;2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;3. 有血清培养液:可使用RPMI1640培养液,添加10%胎牛血清、谷氨酰胺2mmol/L、丙酮酸钠1mmol/L、非必

动物胸腺上皮细胞的培养

  正常动物胸腺上皮细胞的培养   实验材料:   1. 胸腺上皮细胞来源;一般取材小鼠或手术切取的儿童之胸腺;   2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;   3. 有血清培养液:可使用RPMI1640培养液,添加10%

呼吸色素的血色蛋白的相关介绍

  呼吸色素(respiratory pigment):  含铜元素的血色蛋白,叫血蓝蛋白,使血液呈蓝色或青色;  含钒元素的血色蛋白叫血绿蛋白,使血液呈绿色;  含铁元素的血色蛋白叫血红蛋白,使血液呈红色。

乳腺上皮细胞培养

实验方法原理 在内源性巨噬细胞存在的条件下,将经离心得到的哺乳早期的乳汁上皮细胞放入营养丰富的培养液中培养,并可用混合性蛋白酶螯合液传代。试剂、试剂盒 RPMI 1640胎牛血清人血清胰岛素氢化可的松霍乱毒素胰蛋白酶液仪器、耗材 培养瓶 离心管实验步骤 材料无菌1. 生长培养液:RPMI 16402