外周血单个核细胞淋巴细胞和单个核细胞
1、淋巴细胞 淋巴细胞来源于造血干细胞(hemopoietic stem cell,HSC)。造血干细胞可分化成多能前体细胞( multipotent progenitor cell,MPC),继而分化为淋巴样干细胞和髓样干细胞。淋巴样干细胞可继续发育为成熟的T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞等。骨髓、胸腺造血微环境是造血干细胞分化发育的主要场所。 2、单个核细胞 单个核细胞是血液白细胞中具有单个核细胞的一个含糊术语。以淋巴细胞为主,也包括少数单核细胞、浆细胞等。外周血中单个核细胞的相对密度在1.076-1.090之间,常用相对密度1.077±0.001聚蔗糖-泛影葡胺作密度梯度离心加以分离。......阅读全文
人单个核细胞的分离
实验概要人单个核细胞的分离主要试剂DPBS、0.5%甲基纤维素、人淋巴细胞分离液、人HSCs培养液主要设备离心机,超净台,体视镜,倒置显微镜,96孔培养板,T75培养瓶,25mL/10mL/5mL移液管实验材料脐带血100 mL,取自医院,并和产妇签知情同意书实验步骤(1)用血袋从医院取脐带血100
单个核细胞的分离纯化
外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)主要指淋巴细胞和单核细胞,是免疫学实验最常用的细胞,也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。1.原理PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密度较大,为1.092左右;淋巴细胞和单核细胞的
从单个核细胞中分离T细胞
从单个核细胞中分离T细胞1)用玫瑰花结形成试验分离E+细胞1.制备AET-绵羊红细胞1)在刻度离心管中,用无菌的含5%小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次,每次离心500×g 10分钟。2)吸净上清液,测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞,加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液,混匀。室温中反
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞
测定细胞免疫功能首先要从人或动物外周血或组织中获取有活性的细胞,如淋巴细胞、巨噬细胞、粒细胞等。取得有活性的细胞应根据不同目的,采用不同方法,考虑(1)细胞纯度;(2)细胞获得量;(3)细胞活力;(4)使用方法的简易程度和本室条件等。目前常用Ficoll密度梯度离心法直接分离和纯化外周血单个核细胞。
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞
测定细胞免疫功能首先要从人或动物外周血或组织中获取有活性的细胞,如淋巴细胞、巨噬细胞、粒细胞等.取得有活性的细胞应根据不同目的,采用不同方法,考虑 (1) 细胞纯度; (2) 细胞获得量; (3) 细胞活力; (4) 使用方法的简易程度和本室条件等.测定细胞免疫功能首先要从人或动物外周血或组织中获取
外周血单个核细胞结核分枝杆菌DNA的检测价值
【摘要】 目的 探讨单个核细胞结核分枝杆菌DNA检测在肺结核诊断中的价值。方法 380例外周血用淋巴细胞分离出单个核细胞,用1%TritonX-100加蛋白酶K提抽模板DNA作PCR扩增,产物227bp。结果 外周血单个核细胞结核分枝杆菌DNA检出率为90.3%(343/380)明显高于
分离人肠黏膜单个核细胞
实验步骤基 本 方案 离 人 肠 黏 膜 单 个 核 细 胞材 料新鲜的大肠或小肠样本,外科手术后分离获得H B S S ,不含钙和镁, p H 7. 2D T T - H B S S 溶液: 75m g D T T 溶于 50 ml H B S S ,新鲜配制E D T A - H B S S 溶
小鼠单个核细胞的分离实验
基 本 方 案 从 脾 脏 、胸腺和淋巴结制备细胞悬液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培养基新鲜分离的小鼠器官: < 6 周龄的小鼠胸腺; 6 周 至 6 个月龄的小鼠脾脏和淋巴结60 mmX 15 mm 培养皿剪 刀 和 镊 子(保 存 在 7 0 % 乙醇的烧杯中)装 有 19 G 针
小鼠单个核细胞的分离实验
实验步骤基 本 方 案 从 脾 脏 、胸腺和淋巴结制备细胞悬液材 料RPMI-5 或 DMEM-5 完全培养基新鲜分离的小鼠器官: < 6 周龄的小鼠胸腺; 6 周 至 6 个月龄的小鼠脾脏和淋巴结60 mmX 15 mm 培养皿剪 刀 和 镊 子(保 存 在 7 0 % 乙醇的烧杯中)装 有 19
利用Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞
实验概要本实验用Ficoll密度梯度离心法直接分离和纯化了外周血单个核细胞。实验原理常用来分离人外周血单个核细胞(PBMC)的分层液比重是 1.077±0.001 的聚蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F/H)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体,呈中性,犌W水性高,平均分子量
脾脏单个核细胞悬液如何制备
(1)大鼠断颈处死后,无菌取脾置于消毒平皿中称重;(2)超净工作台上置10cm直径无菌平皿,加入5~10ml D-hanks平衡液 ,置一80目的不锈钢筛于平皿中,脾脏置于筛网中,用剪刀剪碎脾,用5ml玻璃注射器针芯轻轻捻磨脾脏,使分散的细胞滤过金属网进入平皿的液体中, D-hanks冲洗一次;(3
外周血和脐带血中分离单个核细胞—FicollHypaque梯度离心法
外周血单个核细胞可应用于: (1)免疫学(包括自身免疫性疾病),传染病,血液系统恶性肿瘤,疫苗开发,移植免疫学研究; (2)预测药物和异生素免疫抑制作用; (3)高通量筛选本实验来自「精编免疫学实验指南」作者:J.E.科利根等,译者:曹雪涛等,实验方法原理FicoH-Hypaque(又称淋巴细胞分层
从单个核细胞中分离T细胞的方法
1)用玫瑰花结形成试验分离E+细胞:1.制备AET-绵羊红细胞:1)在刻度离心管中,用无菌的含5%小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次,每次离心500×g 10分钟。2)吸净上清液,测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞,加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液,混匀。室温中反应30分钟。3)用无
人单个核细胞分离液使用注意细节
人单个核细胞分离液1.077是一种用于分离人外周血单个核细胞的无菌、低内毒素水平的密度梯度分离液。外周血中单个核细胞(PBMC)包括淋巴细胞和单核细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同,红细胞和粒细胞密度较大,1.090g/mL 左右,淋巴细胞和单核细胞密度为 1.075~1.090g/mL,血小板
PNAS突破:单个细胞核转录组测序
研究人员成功地从单个脑细胞细胞核中分离出全部的信使RNA并对其进行了测序。这项发表在《美国科学院院刊》(PNAS)上的新研究,将帮助研究人员更好地了解一些器官在健康和疾病状态下的功能机制,为开发出个体化治疗提供了又一块跳板。 动物和植物中的大多数细胞都包含有一个细胞核,里面储存着细胞的DN
从全血里纯化单个核细胞(人、大鼠和小鼠)
所需仪器:XL03RH型控温离心机(低速冷冻离心机,可使用24*15ml离心管,水平转子);抽血注射器(大小与抽血体积相一致)试剂:Optiprep;Tricine-缓冲盐溶液(TBS,仅小鼠血)0.85%(质量浓度)NaCl,10mmol/L Tricine-NaOH(ph = 7.4)。 方法:
脾脏、胸腺和淋巴结中单个核细胞分离和培养
基本方案从小鼠脾脏、胸腺和淋巴结制备单个核细胞分离和培养。实验材料RPMI-5或DMEM-5完全培养基。2.新鲜分离的小鼠器官:≤6周龄的小鼠胸腺;6周至6个月龄的小鼠脾脏和淋巴结。3.60mm×15mm培养皿。4.剪刀和镊子(保存在70%乙醇的烧杯中)。5.装有19G针头的6ml注射器。6.200
什么是外周血淋巴细胞微核率
病情分析:你好,淋巴细胞微核是游离于胞浆内的圆形或椭圆形小体,结构和染色与主核相似,大小为主核的1/3以下,其来源可能是染色体的断片。测定方法与染色体畸变率相似,观察分析比染色体畸变率容易。在0.2~5gy剂量范围内,微核率与剂量呈线性关系。,意见建议:
小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞
PriCells-小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞 基本原理活细胞(密度较小)和死细胞(密度较大)密度不同,从而有助于将活的淋巴细胞和红细胞分离。 附加材料高密度溶液:Ficoll-Paque(Ficoll和泛影酸钠;Pharmacia LKB)或Lympholyte-M(Cedarlane)
密度梯度分离法分离单个核细胞(MNCs)
试剂和材料:1. 合适的培养基或冷冻液;2. PBSA;3. Ficoll-Hypague;4. 巴氏吸管;5. 50ml离心管;实验方法:1. 将脐血样品用PBSA按1:1比例稀释;2. 将15ml Ficoll-Hypague吸入50ml离心管;3. 将30mlPBSA稀释的脐血样品缓慢地加到F
人骨髓单个核细胞(BM-MNCs)的制备梯度密度离心
* 仅使用新鲜骨髓。避免冷冻和解冻骨髓细胞,并在无菌条件下进行。1
从单个核细胞中分离T细胞(玫瑰花结形成试验、尼龙毛、...
从单个核细胞中分离T细胞一、用玫瑰花结形成试验分离E+细胞1.制备AET-绵羊红细胞1)在刻度离心管中,用无菌的含5%小牛血清的Hanks液洗涤绵羊红细胞3次,每次离心500×g 10分钟。2)吸净上清液,测量红细胞比容。轻击试管分散红细胞,加入4倍红细胞比容量、新鲜制备的AET溶液,混匀。室温中反
单个细胞的PCR分析
单个二倍体细胞在分析单精子以前,Li等人对个体二倍体细胞内的β珠蛋白基因进行过研究。两 个组织培养细胞株用于这些实验。其中一个纯合是镰刀型细胞密码子6(βS)发生突 变,另一个纯合子则来源于正常的βB等位基因。扩增含有密码子6的β珠蛋白片段的 引物,及能够区别这两个特异的等位基因的寡核苷酸探针(AS
单个细胞的PCR分析
单个二倍体细胞在分析单精子以前,Li等人对个体二倍体细胞内的β珠蛋白基因进行过研究。两 个组织培养细胞株用于这些实验。其中一个纯合是镰刀型细胞密码子6(βS)发生突 变,另一个纯合子则来源于正常的βB等位基因。扩增含有密码子6的β珠蛋白片段的 引物,及能够区别这两个特异的等位基因的寡核苷酸探针(A
骨髓外周血有核细胞定量的测定
【参考值】 正常人骨髓有核细胞测定值: 骨髓有核细胞总数:18.0~21.0×109/kg 骨髓有核红细胞数:3.4~4.1×109/kg 骨髓有核粒细胞数:9.0~13×109/kg 骨髓巨核细胞数:0.006~0.016×109/kg 正常人外周血粒细胞数及半衰期更新率: 外周血
解析单个癌细胞检测技术
在很多医疗不发达的地区,医生有限,资源奇缺,购买昂贵的诊断设备更是难以实现。而这些地方的癌症患者又常常因为无法及时获得早期诊断,错失最佳的治疗时间,而失去宝贵的生命。近年来自美国哈佛大学和麻省理工大学的研究人员共同开发了一种袖珍微流体设备,可在血液样本中检测出单个癌细胞,帮助医生快速诊断癌症是否已从
单个癌细胞的形态特点
主要表现在细胞核上,可归纳为五大特征:⑴核大:癌细胞核可比正常大1-5倍。但核膜不内折。⑵核大小不等:由于各个癌细胞核增大程度不一致,同一视野的癌细胞核,大小相差悬殊。⑶核畸形核膜增厚:癌细胞核可出现明显的畸形,表现为细胞核形态不规则,呈结节状、分叶状等,核膜出现凹陷、皱褶,使核膜呈锯齿状。⑷核深染
正常单个hela细胞的大小
直径约为10μm,重约0.001μg人体细胞一般是以微米(毫米的千分之一)为单位的,从数微米到几十微米不等。在医学上,显微镜下比较肿瘤细胞的大小是和正常细胞相比而言的,较小的肿瘤细胞如小细胞肺癌,较大的肿瘤细胞如巨细胞瘤。
单个脑细胞的基因表达谱
科研人员报告了一种根据基因表达谱为人类大脑的单个细胞分类的方法。人类大脑含有许多种类的细胞,它们的基因表达模式有差别。此前为这些细胞类型分类的方法一直限于使用几个基因或蛋白质标记物以及分析整个细胞群。Stephen Quake及其同事使用单细胞RNA测序分析了来自人类大脑组织的466个个体细胞的
概述单个癌细胞的形态特点
⑴核大:癌细胞核可比正常大1-5倍。但核膜不内折。 ⑵核大小不等:由于各个癌细胞核增大程度不一致,同一视野的癌细胞核,大小相差悬殊。 ⑶核畸形核膜增厚:癌细胞核可出现明显的畸形,表现为细胞核形态不规则,呈结节状、分叶状等,核膜出现凹陷、皱褶,使核膜呈锯齿状。 ⑷核深染:由于癌细胞核染色质增