HePG2细胞培养注意事项
很好培养啊……你是想问这种细胞特殊的培养需要还是只是指培养细胞应注意的事项呀?就,正常操作就是,不要啥东西都用火烧一下。。。手不要碰任何瓶口,不要碰微量移液枪的插枪头的位置,手、胳膊不要从开口的东西上面经过,如果是用细胞培养瓶培养,放入培养箱速度快一点,别打开这培养箱的门,瓶盖不用拧得很松。如果是新手操作一定要戴无菌手套,培养液里一定要加抗生素,一般不太会污染。其它的就只能具体问题具体分析了……总之这个细胞株我觉得很好养,不用担心。......阅读全文
hepg2细胞siRNA转染条件
之前我们用过Lipo,说明书上要求细胞的密度在70%左右,同时在转染后的4-6小时注意要换培养液,后来我们实验室换了RFect sRNA Transfection Reagent,细胞密度在45%左右 ,设置siRNA终浓度10nM,30nM,50nM,100nM四个梯度,每个梯度最好做2个复孔,一
HepG2细胞培养的条件
HepG2人肝肿瘤细胞株广泛应用于遗传毒理学及病毒培养等方面的研究,研究肝脏疾病发病机理及其临床应用有着重要意义。由于其与肝细胞具有相同的生物学活性,还被用于胰岛素抵抗的研究。本文对肝癌细胞培养的最佳条件做一简单综述。1.HepG2细胞的复苏条件1.1 复苏温度的选择唐孟萱等采用下述方法进行细胞复苏
HePG2细胞培养注意事项
很好培养啊……你是想问这种细胞特殊的培养需要还是只是指培养细胞应注意的事项呀?就,正常操作就是,不要啥东西都用火烧一下。。。手不要碰任何瓶口,不要碰微量移液枪的插枪头的位置,手、胳膊不要从开口的东西上面经过,如果是用细胞培养瓶培养,放入培养箱速度快一点,别打开这培养箱的门,瓶盖不用拧得很松。如果是新
hepg2细胞换液时用吹打吗
换液时没有必要吹打。少量细胞贴壁的情况下,细胞生长缓慢,状态不佳,建议重新复苏一支细胞,或者消化现有细胞,在较小的容器如6cm dish中培养,等细胞数量较多之后再重新传到大容器中培养。
HepG2细胞培养最佳条件的选择
HepG2人肝肿瘤细胞株广泛应用于遗传毒理学及病毒培养等方面的研究,研究肝脏疾病发病机理及其临床应用有着重要意义。由于其与肝细胞具有相同的生物学活性,还被用于胰岛素抵抗的研究。本文对肝癌细胞培养的最佳条件做一简单综述。1.HepG2细胞的复苏条件1.1 复苏温度的选择唐孟萱等采用下述方法进行细胞复苏
拿到人肝癌细胞HEPG2后要先这么处理
拿到人肝癌细胞HEPG2后要先这么处理。 1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培
HepG2/ADR细胞人细胞阿霉素耐药株培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mLHepG2/ADR细胞人细胞阿霉素耐药株。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入
HepG2/ADR细胞人细胞阿霉素耐药株复苏操作流程
1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后
HepG2/ADR细胞人细胞阿霉素耐药株注意事项
1. 上述操作方案的数据可作为参考,实际操作已实验室配备的耗材为准,2. 冻存时含 10%DMSO,事先加 9ml 培养液是为了稀释 DMSO,理论上 1%DMSO对细胞性3. 隔着 PE 手套能有效防止水浴过程中导致污染4. 重悬的体积只是作为参考,具体的根据需要可进行调整5. 由于复苏过程中已经
HepG2/ADR细胞人细胞阿霉素耐药株培养注意事项
1. 收到HepG2/ADR细胞人细胞阿霉素耐药株。后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读HepG2/ADR细胞人细胞阿霉素耐药株。说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。若由
常见的人肝癌细胞HEPG2细胞株都有哪几种?
通过选择法或克隆形成法从原代培养细胞中获得具有特殊性质或标志物的细胞称为细胞株。稳定细胞株筛选一般是将外源DNA克隆到具有某种抗性或选择基因的载体上,载体被转染到宿主细胞并整合到染色体中,用载体中所含的选择标志进行筛选,筛选得到可稳定表达目的蛋白的细胞株。那么常见的人肝癌细胞HEPG2细胞株都有哪
PI3K/Akt/mTOR信号通路
目的:通过特异性阻断PI3K和mTOR,观察HepG2和Hep3B细胞株PI3K/Akt/mTOR信号通路活性及生物学行为的改变,探讨相关的分子机制。 方法:在培养的HepG2、Hep3B人肝癌细胞株和人正常肝细胞株QSG-7701上,以免疫印迹方法(Western blot)检测各细胞株中PI
PI3K/Akt/mTOR信号通路
特异性阻断法 mTOR抑制剂作用法 样本比较法 实验方法原理 通过特异性阻断PI3K和mTOR,观察HepG2和Hep3B细胞株PI3K/
PI3K/Akt/mTOR信号通路
实验方法原理 通过特异性阻断PI3K和mTOR,观察HepG2和Hep3B细胞株PI3K/Akt/mTOR信号通路活性及生物学行为的改变,探讨相关的分子机制。实验材料 HepG2人肝癌细胞Hep3B人肝癌细胞株人正常肝细胞株QSG-7701试剂、试剂盒 LY294002Rapamycin阿霉素仪器、
PI3K/Akt/mTOR信号通路
特异性阻断法 mTOR抑制剂作用法 样本比较法 实验方法原理 通过特异性阻断PI3K和mTOR,观察HepG2和Hep3B细胞株PI3K/
PI3K/Akt/mTOR信号通路_mTOR抑制剂作用法
实验方法原理观察阿霉素(Doxorubicin,DOX)单用或与RAPA联合用药对HepG2和Hep3B细胞生物学行为及PI3K/Akt/mTOR信号通路活性的影响,探讨mTOR抑制剂增强HCC化疗药物疗效的相关作用机制。实验材料HepG2细胞Hep3B细胞试剂、试剂盒阿霉素RAPA仪器、耗材培养箱
PI3K/Akt/mTOR信号通路_特异性阻断法
PI3K/Akt/mTOR信号通路可以:(1)诱导缺氧诱导因子1的表达和活性;(2)作为细胞内非常重要的信号转导途径;(3)在细胞的生长、存活、增殖、凋亡、血管生成、自吞噬等过程中发挥着极其重要的生物学功能。实验方法原理通过特异性阻断PI3K和mTOR,观察HepG2和Hep3B细胞株PI3K/Ak
LncRNA发生m5C异常修饰或成肝癌诊断新靶点的应用
前言:近年来,异常RNA修饰与肿瘤发生的关系引起了广泛关注。作为一种广泛存在的修饰,DNA和RNA中的5-甲基胞嘧啶(m5C)已被发现数十年。DNA m5C修饰在肿瘤发生中的作用已被广泛研究。然而,关于RNA m5C修饰在肿瘤发生中的作用知之甚少。NSUN2是哺乳动物中主要的m5C修饰甲基转
一般6孔板的一个孔铺满HepG2细胞后的细胞量大概有多少
看浓度有多少,一般30-300个进行计数。HepG2细胞分泌多种血浆蛋白:清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原、铁传递蛋白等。注释:该细胞表达3-羟基-3-甲基戊二酸辅酶A还原酶和肝甘油三酸脂脂肪酶。该细胞在有百草枯(英文名:gramoxone)的环境下过氧化氢酶mRNA表达增加,ApoA-I
河南大学王超杰团队的文章被撤回-原因是……
2010年9月17日,河南大学王超杰团队(王建红为第一作者)在Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters(IF=2.82)在线发表题为“Synthesis and bioevaluation of aryl-guanidino polyamine conju
使用lncRNAi方法通过靶向多个OncomiRs来实现HCC的肿...(一)
使用lncRNAi方法通过靶向多个OncomiRs来实现HCC的肿瘤精准治疗一箭N雕,lncRNAi实现肿瘤精准治疗由于引起肿瘤的发生是一个复杂的网络,因此,是否可以通过一次靶向多个OncomiR进行肿瘤治疗呢?今天,小编通过一篇发表在《Molecular Cancer Therapeuti
lncRNAi方法通过靶向多个OncomiRs来实现HCC的肿瘤精准治疗
一箭N雕,lncRNAi实现肿瘤精准治疗 由于引起肿瘤的发生是一个复杂的网络,因此,是否可以通过一次靶向多个OncomiR进行肿瘤治疗呢?今天,小编通过一篇发表在《Molecular Cancer Therapeutics》上的研究,来看看科学家们怎么使用lncRNAi的方法,通过靶向多个
葛根营养及功能挖掘研究获新进展
近日,国家中药材产业技术体系岗位科学家、华南农业大学食品学院教授杜冰团队从葛根蛋白中分离出新型抗氧化多肽YLWVGA,并揭示了其通过调控Keap1/Nrf2信号通路缓解HepG2细胞氧化损伤的分子机制。相关成果发表于《食品化学》(Food Chemistry)。氧化应激是由活性氧过剩和抗氧化防御减弱
匹伐他汀钙片的药理介绍
匹伐他汀钙通过拮抗胆固醇生合成途径中的限速酶—HMG-CoA还原酶,从而阻碍肝脏的胆固醇生合成。促进肝脏中低密度脂蛋白(LDL)受体的表达和LDL由血液进入肝脏,因此降低总胆固醇。此外,持续抑制肝脏内胆固醇的生物合成,减少向血液中分泌极低密度脂蛋白(VLDL),降低血浆中的甘油三酯。 1、抑制
细胞-SELEX(CellSELEX)技术筛选适配体的方法介绍
该方法的主要靶标物质是细胞、细菌或病毒等,操作过程中采用离心、沉淀的方法分离去除未结合适配体,再通过热解离或酶切作用获得特异性适配体序列。Liang 等针对感染狂犬病毒的活细胞,应用 Cell-SELEX 经过35 轮重复筛选获得了 5 条 DNA 适配体。病毒效价测定与实时定量反转录 PCR
使用lncRNAi方法通过靶向多个OncomiRs来实现HCC的肿...(二)
3、lncRNAi影响HCC细胞的增殖和迁移能力lncRNAi在细胞中能起作用,那么会影响哪些细胞的生物学功能呢?结果显示,AdSVPE1a-lncR有非常显著的Hep3B和Huh-7细胞杀伤能力。在Hep3B细胞中加入MOI=0.5 pfu/cell ,细胞存活不到50%,加入MOI=2
桑叶多酚多糖协同调节脂质稳态分子研究获进展
近日,广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所蚕桑南药与微生物资源加工利用研究团队在桑叶多酚-多糖协同调节脂质稳态分子机制研究方面取得新进展。相关成果分别在线发表于《食品生物科学》和《LWT:食品科学与技术》。 该研究体外模拟消化和结肠发酵发现,桑叶多酚-多糖可促进短链脂肪酸生成,调节脂质代谢优
《Scientific-Reports》报告HCC转移新机制
原发性肝细胞癌(HCC)肝内外转移是导致临床手术后病人预后较差的重要原因之一。由于目前临床上尚缺乏有效的靶向治疗肝癌的化疗药物,寻找治疗HCC转移的有效靶点一直是科学家关注的重点。来自东方肝胆外科医院周伟平教授,第二军医大学微生物教研室任浩教授,上海同仁医院马俐君教授的研究团队通过临床样本,细胞
激光扫描影像系统在3D肿瘤球体或干细胞克隆球体快速...2
结果: 肿瘤微球体生长在超低粘附板中 A 96孔板 Figure 2A: 生长在96孔超低粘附板中
谱芯片应用于TMED3调控原发性肝细胞癌HCC的转移机制研究
原发性肝细胞癌(HCC)肝内外转移是导致临床手术后病人预后较差的重要原因之一。由于目前临床上尚缺乏有效的靶向治疗肝癌的化疗药物,寻找治疗HCC转移的有效靶点一直是科学家关注的重点。来自东方肝胆外科医院周伟平教授,第二军医大学微生物教研室任浩教授,上海同仁医院马俐君教授的研究团队通过临床样本,细胞